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通过DNA改组技术获得高活性β-葡萄糖苷酸酶 被引量:5
1
作者 熊爱生 姚泉洪 +3 位作者 彭日荷 陈建民 李贤 范惠琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期162-167,共6页
β 葡萄糖苷酸酶是在植物转基因中广泛应用的报告基因 .以质粒pBI12 1中的GUS基因为基础 ,利用DNA改组方法 ,经DNaseⅠ降解 ,PrimerlessPCR ,PrimerPCR对GUS基因进行了突变和改组 ,然后将改组的GUS基因连接到原核表达载体pG2 5 1中 ,构... β 葡萄糖苷酸酶是在植物转基因中广泛应用的报告基因 .以质粒pBI12 1中的GUS基因为基础 ,利用DNA改组方法 ,经DNaseⅠ降解 ,PrimerlessPCR ,PrimerPCR对GUS基因进行了突变和改组 ,然后将改组的GUS基因连接到原核表达载体pG2 5 1中 ,构建了库容为 10 8的突变体库 .经过活性的筛选 ,得到活性提高的克隆 ,再以此为基础 ,经过新的改组、筛选得到活性大幅度提高的克隆GUS2 4 .基因测序显示 ,GUS2 4与GUS基因之间的同源性为 99 7% ,共有 6个核苷酸位点发生了改变 ,分别是 :379位的A突变为G ,396位的T突变为C ,711位的G突变为A ,95 8位T突变为C ,990位的T突变为C ,1649位的A突变为G .核苷酸序列推导的氨基酸序列显示 ,3个氨基酸发生了突变 ,12 7位的Ser突变为Gly ,32 0位的Trp突变为Arg ,5 5 0位的Asn突变为Ser.X gluc染色检测和荧光测活结果显示GUS2 4基因表达的 β 葡萄糖苷酸酶基较GUS基因表达产物活性提高 展开更多
关键词 β-葡萄糖苷酸酶 植物 转基因 报告基因 DNA改组技术 酶活性 体外分子进化
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霍山石斛细胞再生物的诱导和培养 被引量:6
2
作者 王亦菲 陆瑞菊 +2 位作者 孙月芳 周润梅 黄剑华 《上海农业学报》 CSCD 2004年第4期8-10,共3页
以野生霍山石斛 (DendrobiumhuoshanenseC .Z .TangetS .J .Cheng)茎尖及带芽点的节段为外植体 ,研究了基本培养基、各种激素对细胞团的诱导及分化作用 ,确定了以MS为基本培养基与 6 BA、NAA配合使用进行诱导 ;以大量元素减半 ,并降低... 以野生霍山石斛 (DendrobiumhuoshanenseC .Z .TangetS .J .Cheng)茎尖及带芽点的节段为外植体 ,研究了基本培养基、各种激素对细胞团的诱导及分化作用 ,确定了以MS为基本培养基与 6 BA、NAA配合使用进行诱导 ;以大量元素减半 ,并降低蔗糖浓度至 2 0 %的MS培养基进行分化 ,获得了大量再生芽簇。 展开更多
关键词 霍山石斛 细胞再生物 诱导 增殖 分化
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超声波直接转导外源基因转化八棱海棠的技术研究 被引量:3
3
作者 丛郁 渠慎春 +2 位作者 乔玉山 姚泉洪 章镇 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期42-46,共5页
应用超声波直接转导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,同时,利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理功率和转化缓冲液中二甲基亚砜(DMSO)对rolC基因转化率的影响。结果表明:当DMSO为5%(体积分数)时,用80 W功率处理20 min,... 应用超声波直接转导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,同时,利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理功率和转化缓冲液中二甲基亚砜(DMSO)对rolC基因转化率的影响。结果表明:当DMSO为5%(体积分数)时,用80 W功率处理20 min,能够获得最佳的转化效果。在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片,共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗,转化率为1.85%。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。 展开更多
关键词 八棱海棠 超声波转化 ROLC基因
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利用RAPD技术对桃种内种质的分析 被引量:1
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作者 袁政 罗来水 +1 位作者 肖德兴 张大兵 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期172-175,共4页
利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对毛桃 2 0个品种进行基因组DNA多态性分析 ,利用筛选出的14个 10碱基随机引物共扩增出 181条带 ,其中 14 3条具有自身特征性标记 ,利用这些DNA片段 ,按UPGMA法进行聚类分析 ,并建立树状图。在遗传距离 ... 利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对毛桃 2 0个品种进行基因组DNA多态性分析 ,利用筛选出的14个 10碱基随机引物共扩增出 181条带 ,其中 14 3条具有自身特征性标记 ,利用这些DNA片段 ,按UPGMA法进行聚类分析 ,并建立树状图。在遗传距离 0 .70 2以上 ,将供试的 2 0个桃品种分为 5类 。 展开更多
关键词 RAPD 亲缘关系 树状图 种质
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试纸条技术在转基因农作物检测中的应用 被引量:8
5
作者 袁铁琰 张大兵 王全喜 《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第5期37-39,共3页
简述了试纸条技术的基本原理及试纸条技术在转基因农作物检测中的优势与不足 ,并对试纸条技术对转基因农作物检测的应用进行了展望。
关键词 试纸条 检测 转基因农作物 基本原理 应用
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大麦花药离体诱变及铝胁迫下的培养反应 被引量:11
6
作者 孙月芳 陆瑞菊 +2 位作者 王亦菲 周润梅 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期95-98,共4页
2份大麦品系的离体麦穗经辐照处理后 ,其花药在铝胁迫培养基上诱导愈伤组织 ,愈伤组织在铝胁迫培养基上进行分化。试验结果表明 ,离体麦穗辐照处理显著降低花药离体培养的愈伤组织诱导率和而后的绿苗分化率 ,诱导培养基中的较高铝浓度... 2份大麦品系的离体麦穗经辐照处理后 ,其花药在铝胁迫培养基上诱导愈伤组织 ,愈伤组织在铝胁迫培养基上进行分化。试验结果表明 ,离体麦穗辐照处理显著降低花药离体培养的愈伤组织诱导率和而后的绿苗分化率 ,诱导培养基中的较高铝浓度胁迫降低愈伤组织诱导率 ,分化培养基中的铝胁迫降低绿苗分化率。辐照处理后花药在铝胁迫培养基上诱导形成愈伤组织并在铝胁迫培养基上分化形成绿苗。 展开更多
关键词 铝胁迫 离体诱变 大麦 愈伤组织诱导率 绿苗分化率 反应 辐照处理 花药离体培养 诱导培养基 分化培养基 试验结果 诱导形成 铝浓度 麦穗 迫降
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不同基因型大麦离体培养花药对赤霉病菌粗毒素的反应 被引量:7
7
作者 孙月芳 陆瑞菊 +2 位作者 王亦菲 周润梅 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期172-174,共3页
研究了在离体培养条件下,大麦耐、感赤霉病基因型花药对赤霉病菌粗毒素的反应。结果表明:随着赤霉病菌粗毒素预处理浓度的提高,大麦花药愈伤组织诱导率降低,愈伤组织的绿苗分化率降低。耐病基因型的愈伤组织诱导率和绿苗分化率的降低幅... 研究了在离体培养条件下,大麦耐、感赤霉病基因型花药对赤霉病菌粗毒素的反应。结果表明:随着赤霉病菌粗毒素预处理浓度的提高,大麦花药愈伤组织诱导率降低,愈伤组织的绿苗分化率降低。耐病基因型的愈伤组织诱导率和绿苗分化率的降低幅度均小于感病材料。说明大麦个体水平的耐、感赤霉病性与花药水平对赤霉病粗毒素反应具有一致性。 展开更多
关键词 赤霉病菌 粗毒素 基因型 花药 大麦 反应 愈伤组织诱导率 绿苗分化率 离体培养条件 预处理 低幅度 一致性 水平 感病 耐病 病性
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大豆及豆制品中DNA提取方法初探 被引量:8
8
作者 陆晔 朱佩云 +3 位作者 王文静 项翠琴 潘爱虎 张大兵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第11期101-103,共3页
为了满足转基因食品标签制管理的需要,必须从食品中提取DNA,并运用PCR方法检测外源基因的有无。本文初探了大豆及常见豆制品中DNA的提取方法,为转基因食品的PCR检测打下了基础。
关键词 大豆 转基因食品 豆制品 DNA提取 聚合酶链式反应
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植物遗传转化的新方法:Floral Dip 被引量:16
9
作者 徐芳 熊爱生 +2 位作者 彭日荷 侯喜林 姚泉洪 《中国蔬菜》 北大核心 2005年第3期29-31,共3页
目前,遗传转化效率低一直制约着许多作物的分子育种和基因功能研究。Floraldip技术已成为模式植物拟南芥遗传转化的主要手段,该方法在十字花科植物中有广阔的应用前景。本文介绍了此种方法的发展过程和技术原理,并对进一步的研究工作提... 目前,遗传转化效率低一直制约着许多作物的分子育种和基因功能研究。Floraldip技术已成为模式植物拟南芥遗传转化的主要手段,该方法在十字花科植物中有广阔的应用前景。本文介绍了此种方法的发展过程和技术原理,并对进一步的研究工作提出了建议。 展开更多
关键词 植物 遗传转化 FLORAL Dip技术 技术原理 农杆菌介导 蘸花法 拟南芥
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观赏水草的离体培养 被引量:25
10
作者 孙月芳 陆瑞菊 +1 位作者 周润梅 王亦菲 《上海农业学报》 CSCD 2004年第2期17-19,共3页
以二个观赏水草为供试材料 ,进行离体培养研究。供体植株经消毒、短时间修复培养的重复 ,达到减少植株带菌量以及提高成活率的目的 ;确定以MS为基本培养基 ,6 BA 0 .5mg/L与 0 .2 5mg/L交替使用能有效提高增殖率和控制玻璃苗 ,添加NAA ... 以二个观赏水草为供试材料 ,进行离体培养研究。供体植株经消毒、短时间修复培养的重复 ,达到减少植株带菌量以及提高成活率的目的 ;确定以MS为基本培养基 ,6 BA 0 .5mg/L与 0 .2 5mg/L交替使用能有效提高增殖率和控制玻璃苗 ,添加NAA 0 .0 2mg/L能使试管苗健壮 ,转入 1/ 2MS无激素培养基即能获得 98%以上的生根率 ,炼苗后移栽水培 ,成活率可达 10 0 %。 展开更多
关键词 观赏水草 离体培养 培养基 外植体 表面灭菌 组织培养
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梨ACC氧化酶基因(ACO)的片段克隆及其RNAi载体构建 被引量:10
11
作者 胡钟东 乔玉山 +2 位作者 王三红 姚泉洪 章镇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期877-879,共3页
以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一... 以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一起,经鉴定后,插入到植物表达载体中,构建成能够表达ACC氧化酶基因的双链RNA的植物载体pYF028,为耐贮砂梨的遗传转化创造条件。 展开更多
关键词 ACC氧化酶(ACO) RT-PCR 克隆 RNAI载体构建
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砂梨脂氧合酶cDNA片段克隆与RNAi载体构建 被引量:8
12
作者 胡钟东 乔玉山 +2 位作者 王三红 姚泉洪 章镇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1285-1290,共6页
以砂梨‘若光’的成熟果实为材料,根据脂氧合酶氨基酸保守区设计1对简并引物,采用RT-PCR克隆到1段长827 bp的序列,经Blast比对和DNAstar软件聚类分析,结果表明由该序列推导出的氨基酸序列含有脂氧合酶氨基酸保守结构域,与马铃薯脂氧合... 以砂梨‘若光’的成熟果实为材料,根据脂氧合酶氨基酸保守区设计1对简并引物,采用RT-PCR克隆到1段长827 bp的序列,经Blast比对和DNAstar软件聚类分析,结果表明由该序列推导出的氨基酸序列含有脂氧合酶氨基酸保守结构域,与马铃薯脂氧合酶基因的氨基酸序列相似性达到77.5%,判断其为砂梨脂氧合酶基因片段,命名为LOX1,并将序列登录到GenBank,登录号为EF215448。根据RNAi载体的构建原则,选择LOX1一开放阅读框设计携带酶切位点的特异引物,通过PCR扩增正、反向基因片段,再与YYT间隔区串连,插入植物表达载体pYF7713中的相应位置,成功地构建了干扰LOX基因表达的RNAi的植物双元表达载体pYL028,为深入研究该基因在砂梨果实成熟过程中的功能及耐贮藏基因工程育种奠定了基础。 展开更多
关键词 砂梨 脂氧合酶 RT-PCR 克隆 RNAI
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苹果与八棱海棠的试管苗外植体植株再生 被引量:23
13
作者 孙爱君 章镇 +3 位作者 姚泉洪 盛炳成 黄晓敏 范惠琴 《上海农业学报》 CSCD 2000年第2期23-30,共8页
苹果品种 (新乔纳金、嘎拉 )及八棱海棠的试管苗外植体 (叶片、叶柄、节间茎段 ) ,在附加 BA与 NAA的 MS培养基上 ,均能分化不定芽。其中在 BA4 mg/ L+NAA0 .2 mg/ L浓度组合的 MS培养基上 ,嘎拉与八棱海棠叶片的再生频率达到 10 0 %。... 苹果品种 (新乔纳金、嘎拉 )及八棱海棠的试管苗外植体 (叶片、叶柄、节间茎段 ) ,在附加 BA与 NAA的 MS培养基上 ,均能分化不定芽。其中在 BA4 mg/ L+NAA0 .2 mg/ L浓度组合的 MS培养基上 ,嘎拉与八棱海棠叶片的再生频率达到 10 0 %。八棱海棠叶片再生苗在附加 IBA0 .5mg/ L的 1/ 2 展开更多
关键词 苹果 八棱海棠 外植体 植株再生 试管苗
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以不结球白菜无菌苗茎尖诱导筛选耐热变异体 被引量:13
14
作者 王亦菲 陆瑞菊 +2 位作者 周润梅 孙月芳 黄剑华 《上海农业学报》 CSCD 2002年第2期6-9,共4页
以优质不结球白菜 [BrassicacampestresL .ssp .chinensis(L .)Makino]“小叶青”为供试材料 ,研究了平阳霉素处理浓度、时间、外源添加物对供试茎尖存活率以及激素配比对茎尖不定芽诱导率的影响。结果表明 :平阳霉素 80mg/L的 4h处理... 以优质不结球白菜 [BrassicacampestresL .ssp .chinensis(L .)Makino]“小叶青”为供试材料 ,研究了平阳霉素处理浓度、时间、外源添加物对供试茎尖存活率以及激素配比对茎尖不定芽诱导率的影响。结果表明 :平阳霉素 80mg/L的 4h处理可作为适宜诱变处理 ,添加椰汁有利于茎尖存活 ;AgNO32 .0mg/L、BA 1.0mg/L、KT 2 .0mg/L的激素组合有利于诱导正常型不定芽和获得较高的诱导率。通过研究 ,建立了不结球白菜耐热变异体诱导及筛选技术程序 ,获得了耐热性提高的变异体材料。 展开更多
关键词 不结球白菜 无菌苗 茎尖 诱导筛选 耐热变异体
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磁化水灌溉番茄的效果研究 被引量:13
15
作者 韩佩来 王少鸥 +2 位作者 沈建英 时文兴 张保国 《上海农业学报》 CSCD 2004年第4期50-52,共3页
以“日本桃太郎”番茄品种为供试材料 ,定植后用美科能磁化水装置 (香港资讯自控科技有限公司提供 )处理的磁化水浇灌。实验结果表明 :(1)用磁化水浇灌番茄 ,对其园艺性状有影响 ,与对照组比较发根数增加了 3.5条、达 2 1% ,茎粗增加了 ... 以“日本桃太郎”番茄品种为供试材料 ,定植后用美科能磁化水装置 (香港资讯自控科技有限公司提供 )处理的磁化水浇灌。实验结果表明 :(1)用磁化水浇灌番茄 ,对其园艺性状有影响 ,与对照组比较发根数增加了 3.5条、达 2 1% ,茎粗增加了 0 .32cm、达 19.87% ,对其它性状也有不同程度的影响。 (2 )用磁化水浇灌番茄 ,其产量有较大的增产 ,每公顷比对照增产 6 5 73.2 7kg ,增产幅度达 10 .4 6 % ,达到极显著水平。 (3)用磁化水浇灌番茄 ,对其品质有明显改善 ,灰分、磷和粗蛋白含量明显提高 ,维生素C和可溶性固形物略有增加 ,而粗纤维、脂肪有下降的趋势。 展开更多
关键词 磁化水 灌溉 番茄 园艺性状 产量 品质
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NACL胁迫对不同基因型大麦花药离体培养的影响 被引量:8
16
作者 孙月芳 陆瑞菊 +2 位作者 王亦菲 周润梅 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期19-22,共4页
以2份耐盐大麦和3份未经耐盐性鉴定的大麦为供试材料,比较了它们的离体培养花药对诱导培养基中添加0.3%NACL、愈伤组织对分化培养基中添加0.3%NACL的培养反应。实验结果表明:在不添加NACL诱导培养基上培养的花药反应率与供试材料耐盐性... 以2份耐盐大麦和3份未经耐盐性鉴定的大麦为供试材料,比较了它们的离体培养花药对诱导培养基中添加0.3%NACL、愈伤组织对分化培养基中添加0.3%NACL的培养反应。实验结果表明:在不添加NACL诱导培养基上培养的花药反应率与供试材料耐盐性无相关性;不添加NACL培养基上形成的愈伤组织在不添加NACL分化培养基上形成绿苗分化率与供试材料的耐盐性相关性不明显;添加NACL培养基上形成的花药反应率与供试材料耐盐性呈明显相关;添加NACL培养基上形成的绿苗分化率与供试材料的耐盐性相关性明显;愈伤组织诱导和苗分化二阶段连续给予NACL胁迫比分别给予NACL胁迫更易鉴定出供试材料的耐盐性。 展开更多
关键词 大麦 花药 NACL胁迫 愈伤组织诱导 绿苗分化
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转基因水稻中重组植酸酶的表达 被引量:9
17
作者 李钱峰 刘巧泉 +4 位作者 张达江 王红梅 于恒秀 顾铭洪 姚泉洪 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期243-247,共5页
为通过在转基因植株中表达植酸酶降解植酸来提高水稻中无机磷利用率,构建了由玉米泛素基因Ubi启动子控制的植酸酶基因植物表达载体,并以来源于水稻未成熟胚的愈伤组织作为转化受体,经农杆菌介导法将植酸酶基因导入水稻中,共获得15个独... 为通过在转基因植株中表达植酸酶降解植酸来提高水稻中无机磷利用率,构建了由玉米泛素基因Ubi启动子控制的植酸酶基因植物表达载体,并以来源于水稻未成熟胚的愈伤组织作为转化受体,经农杆菌介导法将植酸酶基因导入水稻中,共获得15个独立的转基因株系。对转基因水稻总DNA的PCR和Southern杂交分析证明目的基因已整合入转基因水稻植株基因组中,并能稳定遗传。对部分转基因水稻未成熟种子总RNA进行RT-PCR分析,表明导入的植酸酶基因能够在转基因水稻种子中正常表达。无机磷含量分析表明含目的基因的转基因水稻种子及其后代叶片中的无机磷含量较未转化植株均有了明显的提高。 展开更多
关键词 转基因 水稻 重组植酸酶 无机磷含量 营养品质
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HAL1基因转化烟草提高烟叶含钾量研究 被引量:12
18
作者 郭兆奎 杨谦 +2 位作者 姚泉洪 万秀清 颜培强 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2006年第5期46-51,共6页
提取酿酒酵母总RNA进行RT-PCR反转录,根据HAL1基因(GeneID:856113)序列设计阅读框引物,对反转录产物进行PCR扩增,并进行全序列测定,构建筛选标记为带内含子的Km抗性基因的植物双元表达载体,经根癌农杆菌介导法将HAL1基因导入烟草品种龙... 提取酿酒酵母总RNA进行RT-PCR反转录,根据HAL1基因(GeneID:856113)序列设计阅读框引物,对反转录产物进行PCR扩增,并进行全序列测定,构建筛选标记为带内含子的Km抗性基因的植物双元表达载体,经根癌农杆菌介导法将HAL1基因导入烟草品种龙江911和K326中,进行卡那霉素抗性筛选、GUS染色、目的基因扩增和HAL1基因mRNA荧光定量PCR检测,并对T1代各转化烟草材料烟叶含钾量进行化验分析。测序结果证实PCR扩增得到的DNA与酿酒酵母HAL1基因序列相同,获得抗卡那霉素、GUS阳性的转化植株12株。经PCR扩增检测证实HAL1基因已整合入转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析结果表明HAL1基因已在烟苗根系表达,烟叶含钾量化验结果证明HAL1基因可使烟叶含钾量提高30%。 展开更多
关键词 酿酒酵母 HAL1基因 烟草 K^+含量
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大麦幼穗和油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响 被引量:4
19
作者 孙月芳 陆瑞菊 +2 位作者 王亦菲 周润梅 黄剑华 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2003年第2期19-22,共4页
以4个大麦品系为供试材料,比较了诱导培养基中添加不同发育时期和不同添加量的大麦幼穗提取液以及添加油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响,摸索促进诱导分化率提高的最佳方案。结果表明,诱导培养基中添加大麦幼穗提取液对花药反应... 以4个大麦品系为供试材料,比较了诱导培养基中添加不同发育时期和不同添加量的大麦幼穗提取液以及添加油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响,摸索促进诱导分化率提高的最佳方案。结果表明,诱导培养基中添加大麦幼穗提取液对花药反应率及绿苗分化率有明显的促进效果,单核期大麦幼穗提取液的效果优于二核期幼穗提取液的效果;添加油菜花蕾提取液对花培反应的影响优于单核期大麦幼穗提取液的影响。供试材料"SD"在添加单核期幼穗提取液的诱导培养基上的花药反应率和绿苗分化率分别是对照的1.6和1.7倍;材料"93T"的花药反应率和绿苗分化率分别是对照的1.7和3.0倍;诱导培养基中添加60g/L的油菜花蕾提取液的促进作用又优于添加60g/L的大麦幼穗提取液。 展开更多
关键词 大麦 幼穗 油菜花蕾 花药培养 花药反应率 绿苗分化率 培养基 提取液
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利用油菜单倍体茎尖筛选抗菌核病变异体 被引量:7
20
作者 王亦菲 黄剑华 +5 位作者 陆瑞菊 孙月芳 周润梅 周志疆 谢祝捷 刘成洪 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期355-359,共5页
用平阳霉素 (Pingyangmycin)对甘蓝型油菜品系 9885和 9841的单倍体茎尖进行诱变处理 ,以草酸作为选择压力 ,获得一批耐草酸性明显比原始品种提高的变异体。经大田抗菌核病性鉴定 ,筛选出
关键词 油菜 单倍体茎尖 筛选 抗菌核病变异体 平阳霉素 单倍体组织 草酸 抗病性
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