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自身核抗原U1RNP 70 kD多肽全长基因克隆及鉴定 被引量:3
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作者 沈南 薛峰 +1 位作者 陆瑜 陈顺乐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期15-18,共4页
应用逆转录PCR方法从Hela细胞中成功地克隆了编码自身核抗原U1RNP70kD多肽的全长基因,将此基因重组入原核表达载体系统PGEX-2T中,以限制性酶切及核苷酸测序鉴定扩增的DNA片段,经计算机分析,基因全长1.... 应用逆转录PCR方法从Hela细胞中成功地克隆了编码自身核抗原U1RNP70kD多肽的全长基因,将此基因重组入原核表达载体系统PGEX-2T中,以限制性酶切及核苷酸测序鉴定扩增的DNA片段,经计算机分析,基因全长1.3kb,编码437个氨基酸,并进行了基因同源性比较。结果表明,克隆得到的基因与Genbank报道的完全一致,蛋白质一级结构分析表明编码的70kD多肽在羧基片段有3个可能的抗原性区域,该多肽的抗原表位可能主要存在于羧基半段上,为重组蛋白的表达及抗原表位的定位研究奠定基础。 展开更多
关键词 自身抗原 多肽 基因克隆 鉴定
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人Fas全长cDNA的克隆和序列分析
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作者 裴军 沈南 +2 位作者 薛峰 王元 陈顾乐 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1999年第S1期4-6,共3页
目的克隆人Fas基因。方法采用RT-PCR技术从EB病毒转化的人B淋巴细胞株中扩增包含全长阅读框架的FascDNA,与pGEM-T质粒连接,经测序验证。结果RT-PCR扩增Fas的PCR产物经限制性内切酶后生成的片段符合预期大小。氨节育抗性的克隆经测序... 目的克隆人Fas基因。方法采用RT-PCR技术从EB病毒转化的人B淋巴细胞株中扩增包含全长阅读框架的FascDNA,与pGEM-T质粒连接,经测序验证。结果RT-PCR扩增Fas的PCR产物经限制性内切酶后生成的片段符合预期大小。氨节育抗性的克隆经测序证实得到的正常人FSS与首次文献报道Fas基因有2个碱基的差异。结论本研究用RT-PCR方法克隆了正常人Fas全长cDNA,为进一步研究Fas的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 FAS基因 序列分析 克隆
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