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mtROS/NLRP3信号通路对铁过载诱导的肝纤维化过程中巨噬细胞极化的影响
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作者 俞佳雯 周薏 +2 位作者 钱春美 穆蓝 阙任烨 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第9期1765-1774,共10页
目的:探究线粒体活性氧(mtROS)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路对铁过载诱导的肝纤维化过程中巨噬细胞极化的影响。方法:选用32只C57BL/6雄性小鼠,随机分为对照组、模型(右旋糖酐铁,50 mg/kg)组、mtROS阻断... 目的:探究线粒体活性氧(mtROS)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路对铁过载诱导的肝纤维化过程中巨噬细胞极化的影响。方法:选用32只C57BL/6雄性小鼠,随机分为对照组、模型(右旋糖酐铁,50 mg/kg)组、mtROS阻断剂MitoTEMPO(3 mg/kg)组和NLRP3抑制剂MCC950(10 mg/kg)组,每组8只。除对照组外,各组均每日腹腔注射右旋糖酐铁,对照组每日腹腔注射等剂量生理盐水,连续7周。Mito⁃TEMPO组和MCC950组从第4周开始腹腔注射给药,每周3次。取小鼠血清进行生化分析,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。取肝组织进行HE染色、Masson染色、天狼星红染色及免疫组织化学检测。MitoSOX Red探针法检测mtROS水平。ELISA法检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-10和精氨酸酶1(Arg-1)。Western blot法检测Arg-1、iNOS、NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和caspase-1蛋白表达水平。RT-qPCR法检测NLRP3、ASC和cas⁃pase-1的mRNA表达水平。免疫荧光双标法检测M1型巨噬细胞及M2型巨噬细胞。结果:(1)与对照组比较,模型组小鼠汇管区炎症细胞浸润,纤维组织明显增生,肝小叶结构严重紊乱,部分区域可见假小叶形成。模型组小鼠血清ALT和AST水平显著升高(P<0.01),NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA和蛋白表达及mtROS水平均较对照组显著上升(P<0.01)。模型组小鼠血清铁、铁蛋白、肝脏总铁及亚铁含量均显著升高(P<0.01),M1极化标志物IL-6、TNF-α和iNOS等蛋白表达显著升高(P<0.01),M2极化标志物IL-10和Arg-1蛋白及CD206表达显著下降(P<0.01)。(2)与模型组比较,mtROS阻断剂组和NLRP3抑制剂组小鼠炎症明显消退,纤维组织增生减少,ALT和AST水平明显降低(P<0.01)。α-平滑肌肌动蛋白和I型胶原阳性显色面积显著减少(P<0.01),小鼠血清铁、铁蛋白、肝脏总铁及亚铁含量均显著逆转(P<0.01),M1极化标志物蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:mtROS/NLRP3信号通路可通过促进巨噬细胞M1极化进而参与铁过载诱导的肝纤维化过程。 展开更多
关键词 铁过载 mtROS/NLRP3信号通路 肝纤维化 巨噬细胞极化
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三苯氧胺诱导血小板凋亡的研究 被引量:4
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作者 王志成 张晓峰 +1 位作者 陈晓宇 戴克胜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第9期853-857,共5页
目的探讨三苯氧胺(TAM)诱导血小板凋亡作用及其分子机制。方法取健康志愿者静脉血,分离得到富含血小板血浆(PRP)和洗涤血小板,血小板与不同浓度TAM孵育后,流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸(PS)暴露、线粒体跨膜电位(ΔΨm)去极化、胞质Ca2+浓... 目的探讨三苯氧胺(TAM)诱导血小板凋亡作用及其分子机制。方法取健康志愿者静脉血,分离得到富含血小板血浆(PRP)和洗涤血小板,血小板与不同浓度TAM孵育后,流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸(PS)暴露、线粒体跨膜电位(ΔΨm)去极化、胞质Ca2+浓度;Western blot检测活化的caspase-3和gelsolin酶解产物。在抑制实验中,血小板先与线粒体通透性转换孔(MPTP)抑制剂环孢素-A(Cyp-A)或二甲基亚砜(DMSO)预孵育,然后再与TAM孵育,流式细胞仪和Western blot检测凋亡标志物。结果 TAM浓度依赖地诱导血小板PS暴露、ΔΨm去极化、胞质Ca2+浓度增加和活化的caspase-3。Cyp-A抑制TAM诱导的PS暴露、ΔΨm去极化和caspase-3活化,但不抑制胞质Ca2+浓度升高。结论 TAM能够诱导血小板发生凋亡。 展开更多
关键词 血小板 线粒体 细胞凋亡 他莫昔芬
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血小板黏附受体GPIb-IX-V介导的信号通路研究进展 被引量:2
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作者 胡萍 谢如锋 王志成 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第3期419-422,F0003,共5页
血小板在生理性止血和病理性血栓形成中起关键作用。血小板黏附受体GPIb-IX-V复合物能与血管性血友病因子(VWF)、P-选择素、凝血酶等结合,在血小板血栓形成的起始阶段和凝血过程中起重要作用。磷脂酶C(PLC)、磷脂酶A2(PLA2)、14-3-3ζ... 血小板在生理性止血和病理性血栓形成中起关键作用。血小板黏附受体GPIb-IX-V复合物能与血管性血友病因子(VWF)、P-选择素、凝血酶等结合,在血小板血栓形成的起始阶段和凝血过程中起重要作用。磷脂酶C(PLC)、磷脂酶A2(PLA2)、14-3-3ζ蛋白、细胞骨架等参与GPIb-IX-V介导的信号通路,现就GPIb-IX-V复合物介导的信号通路作一综述。 展开更多
关键词 血小板 糖蛋白 信号通路 血栓 止血
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解离素-金属蛋白酶17活性调控机制的研究进展
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作者 朱可馨 王冰 王志成 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第8期1185-1188,共4页
血小板在发生活化或凋亡的同时伴随有黏附受体糖蛋白(GP)Ⅰbα酶切,GPⅠbα酶切作为血小板发生活化或凋亡的一个重要生物标志物。目前,GPⅠbα酶切主要由解离素-金属蛋白酶17(ADAM17)所介导。ADAM17是锌离子依赖的金属蛋白酶,属于adamal... 血小板在发生活化或凋亡的同时伴随有黏附受体糖蛋白(GP)Ⅰbα酶切,GPⅠbα酶切作为血小板发生活化或凋亡的一个重要生物标志物。目前,GPⅠbα酶切主要由解离素-金属蛋白酶17(ADAM17)所介导。ADAM17是锌离子依赖的金属蛋白酶,属于adamalysin蛋白家族,与其他金属酶密切相关。现就近年来ADAM17的结构、功能以及活性调节等方面的研究进行综述。 展开更多
关键词 金属蛋白酶 血小板 酶切
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