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长链非编码RNA LINC00473对人胃癌细胞增殖和迁移能力的影响
被引量：
1
1
作者
朱虹
张玮
+2 位作者
刘国倩
孟红霞
邵世和
《临床检验杂志》
CAS
2019年第5期383-388,共6页
目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过C...
目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、western blot实验检测细胞的增殖和迁移能力以及EMT相关蛋白标志物表达水平的变化。结果与GES-1细胞相比,LINC00473在胃癌细胞中的表达水平明显降低(P<0.05)。与siNC转染对照组相比,敲减LINC00473表达后,靶细胞的增殖能力(F=163.10,P<0.01)、克隆形成(t=3.29,P<0.05)和迁移能力(t=4.68,P<0.05)明显增加;E-cadherin表达减弱(t=4.08,P<0.05),N-cadherin(t=5.06,P<0.01)、Snail(t=7.69,P<0.01)和Vimentin(t=3.82,P<0.05)蛋白的表达水平升高。与Vector转染对照组相比,上调LINC00473表达后靶细胞的增殖能力(F=186.00,P<0.01)、克隆形成(t=3.22,P<0.05)和迁移能力(t=5.52,P<0.01)明显下降;E-cadherin表达升高(t=2.90,P<0.05),N-cadherin(t=7.44,P<0.01)、Snail(t=2.78,P<0.05)和Vimentin(t=4.64,P<0.01)蛋白的表达水平降低。结论敲减LINC00473的表达可促进胃癌细胞的增殖、迁移的能力,可能通过调控EMT参与胃癌细胞的迁移。
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关键词
胃癌
长链非编码RNA
LINC00473
增殖
迁移
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职称材料
幽门螺杆菌virD4基因的克隆表达及其功能初探
2
作者
朱虹
杨洋
+3 位作者
樊书
栾瑄
孟红霞
邵世和
《临床检验杂志》
CAS
2019年第7期539-545,共7页
目的研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能。方法通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白质,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白质;纯化的重组蛋...
目的研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能。方法通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白质,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白质;纯化的重组蛋白质免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA法检测效价,western blot法分析抗原反应特异性;重组蛋白质与GES-1细胞共培养,检测其对细胞炎症因子的表达及细胞增殖的影响。结果 virD4基因全长为1 728 bp,序列与Shi470菌株的virD4基因同源性较高;成功构建原核表达载体,经诱导及纯化获得相对分子质量为63 000的重组蛋白质;成功免疫小鼠制备多克隆抗体,效价为512 000,抗原抗体反应具有特异性;virD4能诱导GES-1细胞分泌炎症因子和增殖。结论成功克隆并表达virD4基因,制备多克隆抗体,其重组蛋白质能诱导细胞因子分泌及细胞增殖。
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关键词
幽门螺杆菌
virD4
tfs3编码Ⅳ型分泌系统
原核表达
重组蛋白质
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职称材料
题名
长链非编码RNA LINC00473对人胃癌细胞增殖和迁移能力的影响
被引量：
1
1
作者
朱虹
张玮
刘国倩
孟红霞
邵世和
机构
江苏大学医学院、江苏省检验医学重点实验室
上海市东方医院巴里马歇尔消化疾病诊疗中心
出处
《临床检验杂志》
CAS
2019年第5期383-388,共6页
基金
国家自然基金面上项目(81772157)
江苏省自然基金项目(BK20161345)
文摘
目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、western blot实验检测细胞的增殖和迁移能力以及EMT相关蛋白标志物表达水平的变化。结果与GES-1细胞相比,LINC00473在胃癌细胞中的表达水平明显降低(P<0.05)。与siNC转染对照组相比,敲减LINC00473表达后,靶细胞的增殖能力(F=163.10,P<0.01)、克隆形成(t=3.29,P<0.05)和迁移能力(t=4.68,P<0.05)明显增加;E-cadherin表达减弱(t=4.08,P<0.05),N-cadherin(t=5.06,P<0.01)、Snail(t=7.69,P<0.01)和Vimentin(t=3.82,P<0.05)蛋白的表达水平升高。与Vector转染对照组相比,上调LINC00473表达后靶细胞的增殖能力(F=186.00,P<0.01)、克隆形成(t=3.22,P<0.05)和迁移能力(t=5.52,P<0.01)明显下降;E-cadherin表达升高(t=2.90,P<0.05),N-cadherin(t=7.44,P<0.01)、Snail(t=2.78,P<0.05)和Vimentin(t=4.64,P<0.01)蛋白的表达水平降低。结论敲减LINC00473的表达可促进胃癌细胞的增殖、迁移的能力,可能通过调控EMT参与胃癌细胞的迁移。
关键词
胃癌
长链非编码RNA
LINC00473
增殖
迁移
Keywords
gastric cancer
long non-coding RNA
LINC00473
proliferation
migration
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
幽门螺杆菌virD4基因的克隆表达及其功能初探
2
作者
朱虹
杨洋
樊书
栾瑄
孟红霞
邵世和
机构
江苏大学医学院
上海市
东方医院
出处
《临床检验杂志》
CAS
2019年第7期539-545,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(81772157)
江苏省自然科学基金(BK20161345)
文摘
目的研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能。方法通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白质,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白质;纯化的重组蛋白质免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA法检测效价,western blot法分析抗原反应特异性;重组蛋白质与GES-1细胞共培养,检测其对细胞炎症因子的表达及细胞增殖的影响。结果 virD4基因全长为1 728 bp,序列与Shi470菌株的virD4基因同源性较高;成功构建原核表达载体,经诱导及纯化获得相对分子质量为63 000的重组蛋白质;成功免疫小鼠制备多克隆抗体,效价为512 000,抗原抗体反应具有特异性;virD4能诱导GES-1细胞分泌炎症因子和增殖。结论成功克隆并表达virD4基因,制备多克隆抗体,其重组蛋白质能诱导细胞因子分泌及细胞增殖。
关键词
幽门螺杆菌
virD4
tfs3编码Ⅳ型分泌系统
原核表达
重组蛋白质
Keywords
Helicobacter pylori
virD4
tfs3-encoded type Ⅳ secretion system
prokaryotic expression
recombinant protein
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
R378.3 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
长链非编码RNA LINC00473对人胃癌细胞增殖和迁移能力的影响
朱虹
张玮
刘国倩
孟红霞
邵世和
《临床检验杂志》
CAS
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
幽门螺杆菌virD4基因的克隆表达及其功能初探
朱虹
杨洋
樊书
栾瑄
孟红霞
邵世和
《临床检验杂志》
CAS
2019
0
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职称材料
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