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细胞外基质蛋白1在肿瘤中的表达及意义 被引量:5
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作者 侯彦强 范列英 +7 位作者 屠小卿 朱烨 周演武 娄加陶 何玮 倪健 孔宪涛 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1314-1316,共3页
目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在肿瘤组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学EnVision法,检测肝脏、乳腺、直肠组织(正常组织和肿瘤组织)中ECM1的表达,比较正常组织和肿瘤组织淋巴结转移肿瘤和淋... 目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在肿瘤组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学EnVision法,检测肝脏、乳腺、直肠组织(正常组织和肿瘤组织)中ECM1的表达,比较正常组织和肿瘤组织淋巴结转移肿瘤和淋巴结未转移肿瘤之间的ECM1表达差异。结果:ECM1的表达如下:正常肝组织阳性率20.0%(4/20),肝癌组织阳性率85.4%(70/82);正常乳腺组织阳性率9.1%(1/11),乳腺癌组织阳性率60.0%(18/30),其中淋巴结(一)者为37.5%(6/16),淋巴结(+)者为85.7%(12/14);正常直肠组织阳性率11.8%(2/17),直肠癌组织阳性率54.5%(18/33),其中淋巴结(一)者为33.3%(6/18),淋巴结(+)者为80.0%(12/15)。统计分析表明,对ECM1的表达,肿瘤组织高于正常组织,淋巴结转移性肿瘤高于非转移性(P<0.01)。结论:ECM1在肿瘤组织中过表达,并且与肿瘤的转移相关。 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白1 肿瘤 肿瘤转移
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肿瘤细胞蛋白质组的二维液相色谱分离 被引量:7
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作者 彭艳 郑颖 +6 位作者 蒋平 何玮 侯彦强 周聪 郭春香 倪健 焦炳华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期862-864,共3页
目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反... 目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反相HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV图转换成胶图。结果:一维色谱聚焦分离pH值8.5-4.0之间的组分共收集到16个,每个组分的二维UV图转换成pI/UV胶图。结论:二维液相色谱分离法是一种有效的分离肿瘤细胞裂解液的方法。 展开更多
关键词 蛋白质组 肿瘤细胞 二维液相色谱分离
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细胞外基质蛋白1在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义 被引量:3
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作者 侯彦强 仲人前 +2 位作者 耿红莲 倪健 孔宪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第4期384-387,共4页
目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein1,ECM1)在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学和免疫细胞化学EnVision法检测乳腺癌手术切除标本中乳腺组织(正常组织和癌组织)和恶性程度不同的乳腺癌... 目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein1,ECM1)在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学和免疫细胞化学EnVision法检测乳腺癌手术切除标本中乳腺组织(正常组织和癌组织)和恶性程度不同的乳腺癌细胞株(MCF-7、Sk-Br-3和MDA-435)中ECM1的表达,并比较正常乳腺组织和乳腺癌组织、淋巴结转移和未转移乳腺癌之间的ECM1表达差异。Western blotting检测确定ECM1亚型蛋白。结果:ECM1的表达在正常乳腺组织中阳性率为8.7%(2/23),在乳腺癌组织中阳性率为60.4%(29/48);其中乳腺癌淋巴结未转移者为38.5%(10/26),淋巴结转移者为86.4%(19/22)。统计分析表明,ECM1的表达在乳腺癌组织中高于正常组织(P<0.01),在转移性乳腺癌中高于非转移性乳腺癌(P<0.01)。恶性程度低的乳腺癌细胞株MCF-7、Sk-Br-3中不表达ECM1,而恶性程度较高的MDA-435细胞株中高表达ECM1。乳腺癌细胞中高表达的ECM1蛋白主要是相对分子质量为68000的ECM1a亚型。结论:ECM1(主要为ECM1a亚型)在乳腺癌组织和恶性程度高的乳腺癌细胞中过表达,并且与乳腺癌的淋巴结转移相关。 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白1 乳腺癌 表达 淋巴结转移
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小胶质细胞蛋白质组三维分离方法的建立 被引量:1
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作者 蒋平 彭艳 +2 位作者 倪健 向正华 焦炳华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期687-689,共3页
目的:建立基于二维液相色谱法的三维分离小胶质细胞蛋白质组的方法。方法:将小胶质细胞裂解后制备全细胞蛋白,在传统的一维HPCF、二维HPRP分离后,增加了三维SDSPAGE电泳,对小胶质细胞实现了三维分离。结果:经过优化后的三维分离,小胶质... 目的:建立基于二维液相色谱法的三维分离小胶质细胞蛋白质组的方法。方法:将小胶质细胞裂解后制备全细胞蛋白,在传统的一维HPCF、二维HPRP分离后,增加了三维SDSPAGE电泳,对小胶质细胞实现了三维分离。结果:经过优化后的三维分离,小胶质细胞全蛋白按照pH值由高到低的顺序分为34个组分,其中pH8.5~4.0的部分包含16个组分,每一个组分又包含若干种蛋白质。结论:同传统的二维液相色谱分离方法相比,改进后的三维分离方法对小胶质细胞全蛋白具有更彻底、更好的分离效果,为后续的质谱鉴定提供了分离度更好的样品。 展开更多
关键词 小胶质细胞 分离方法 蛋白质组 三维 SDS-PAGE电泳 液相色谱法 细胞蛋白 分离效果 质谱鉴定 二维 组分 pH值 改进后 分离度 传统
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细胞外基质蛋白1对MCF-7和HUVEC增殖影响的研究 被引量:1
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作者 侯彦强 蔡丽君 +7 位作者 范列英 罗鹏 何玮 娄加陶 周演武 倪健 孔宪涛 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1310-1313,共4页
目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)对乳腺癌细胞株MCF-7和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响。方法:构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,采用PCR方法,扩增出ECM1基因,... 目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)对乳腺癌细胞株MCF-7和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响。方法:构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,采用PCR方法,扩增出ECM1基因,用BglⅡ和Kpn Ⅰ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆酶切、测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞,药物G418筛选稳定转染细胞株,荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP,免疫组化检测ECM1蛋白表达。用MTT比色法分析ECM1对MCF-7和HUVEC增殖的影响。结果:成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,并在MCF-7中稳定表达;MTT比色法检测MCF-7增殖结果显示未转染组、空载体转染组和ECM1转染组的D570值分别为0.95±0.07、0.97±0.09和1.03±0.12,三者无明显差异;MTT比色法检测HUVEC增殖结果示培养液组、空载体转染上清组、ECM1转染上清组HUVEC D570值分别为0.89±0.06、0.92±0.09和1.39±0.10,差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:ECM1对乳腺癌细胞株MCF-7的增殖无影响,但能显著促进血管内皮细胞体外增殖。 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白1 MCF-7 人脐静脉内皮细胞 细胞增殖
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RNA类药物在疾病治疗中的研究进展 被引量:1
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作者 彭艳 洪海燕 +1 位作者 焦炳华 倪健 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期70-72,共3页
RNA类小分子可作为治疗性药物应用于各类疾病的治疗。这类小分子主要包括基因表达抑制剂、基因修复剂、蛋白拮抗剂及RNA疫苗,目前已有多种反义RNA和核酶作为基因表达抑制剂正在进行各期临床试验,它们主要用于心血管疾病、肿瘤、药物代... RNA类小分子可作为治疗性药物应用于各类疾病的治疗。这类小分子主要包括基因表达抑制剂、基因修复剂、蛋白拮抗剂及RNA疫苗,目前已有多种反义RNA和核酶作为基因表达抑制剂正在进行各期临床试验,它们主要用于心血管疾病、肿瘤、药物代谢性疾病、病毒性肝炎和艾滋病等疾病的治疗。蛋白拮抗剂aptamers已作为治疗老年性黄斑和血栓药物进入临床Ⅱ,Ⅲ期试验。RNA疫苗作为免疫调节剂治疗前列腺癌和肾癌的临床试验也在进行中。 展开更多
关键词 反义RNA Aptamers RNA疫苗
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