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题名小鼠肝炎病毒N蛋白间接ELISA方法的建立
被引量：1
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作者
周艳
胡建华
高诚
周洁
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机构
扬州大学比较医学中心
上海市实验动物质量监督检验站
上海实验动物研究中心上海市计划生育科学研究所
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2008年第11期39-43,共5页
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基金
上海市科技发展基金资助项目(064909007)
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文摘
目的运用重组蛋白作为包被抗原建立检测小鼠肝炎病毒抗体的间接ELISA方法。方法将大肠杆菌表达小鼠肝炎病毒核衣壳蛋白(Nucleocapsid N)的主要抗原域NP(S)纯化后作为诊断抗原,通过条件优化,建立检测小鼠肝炎病毒抗体的间接ELISA方法。结果确定其包被抗原的浓度为300 ng/mL,血清稀释度为1∶200,山羊抗小鼠酶标抗体的稀释浓度为1∶3000。S/P≥0.386则为阳性,S/P<0.308为阴性,两者之间为可疑。经阻断试验、交叉试验和重复性实验,表明该方法特异性强,重复性好。与国家实验动物检测中心的MHV全病毒ELISA抗体诊断试剂盒比较,特异性、敏感性和符合率分别为94.1%、93.3%和93.9%。用该融合蛋白包被聚苯乙烯板后在-20℃下可保存5个月,应用该方法检测了98份送检的血清样品,有10份检测为阳性。结论本研究建立的间接ELISA特异性强,重复性好,为进一步开发MHV血清抗体诊断试剂盒奠定了基础。
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关键词
小鼠肝炎病毒
重组N蛋白
间接ELISA
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Keywords
Mouse hepatitis virus（MHV）
Recombinant nucleocapsid protein
Indirect ELISA
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分类号
Q93-32
[生物学—微生物学]
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