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PinX1基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用
1
作者
胡宗
梁桑华
+1 位作者
马文丽
郑文岭
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期631-635,共5页
探讨了PinX1基因在乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞周期中的作用,初步探讨了该基因用于乳腺癌临床治疗的可行性.采用RT-PCR技术从293-T细胞中扩增PinX 1基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,再将重组质粒转染MCF-7细胞.通过real-time PCR...
探讨了PinX1基因在乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞周期中的作用,初步探讨了该基因用于乳腺癌临床治疗的可行性.采用RT-PCR技术从293-T细胞中扩增PinX 1基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,再将重组质粒转染MCF-7细胞.通过real-time PCR检测PinX1基因的mRNA表达,用MTT法检测转染前后细胞生长曲线的变化,用流式细胞仪检测转染目的基因后细胞生长周期的改变.检测结果表明,PinX1基因已经在转染后MCF-7细胞的细胞核内稳定表达,乳腺癌细胞生长明显减缓(P<0.05),增殖变慢(P<0.05),细胞生长阻滞于G0/G1期,说明PinX1基因可抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长和增殖.
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关键词
乳腺癌
PinX1基因
载体构建
细胞增殖
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职称材料
沉默SEMA3A基因对胶质瘤细胞U251增殖和转移的影响
2
作者
何志敏
马文丽
郑文岭
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期237-244,共8页
探讨了SEMA3A基因在恶性胶质瘤细胞U251迁移和侵袭能力中的作用,及其用于胶质瘤临床治疗的可行性.用特异识别SEMA3A基因的短发卡RNA(short hairpin RNA,sh RNA)片段与真核表达载体p FH-GFP-L连接,再与辅助质粒联用来包装慢病毒.通过荧...
探讨了SEMA3A基因在恶性胶质瘤细胞U251迁移和侵袭能力中的作用,及其用于胶质瘤临床治疗的可行性.用特异识别SEMA3A基因的短发卡RNA(short hairpin RNA,sh RNA)片段与真核表达载体p FH-GFP-L连接,再与辅助质粒联用来包装慢病毒.通过荧光显微镜观察感染胶质瘤细胞U251的感染效率.通过实时定量PCR技术和Western-blot技术验证了U251细胞中SEMA3A基因的沉默效果.通过MTT法、PI染色法和Transwell小室分别检测了U251细胞增殖、细胞周期和运动能力的变化.结果表明,SEMA3A-sh RNA慢病毒感染U251能有效下调SEMA3A基因的表达水平(P<0.01),使U251细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05),细胞大量阻滞在G2/M期,并促进了细胞凋亡(P<0.05).
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关键词
胶质瘤
SEMA3A基因
增殖
转移
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职称材料
题名
PinX1基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用
1
作者
胡宗
梁桑华
马文丽
郑文岭
机构
上海大学电子生物研究所
南方医科
大学
基因工程
研究所
华南基因组
研究
中心
出处
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期631-635,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(10972130)
文摘
探讨了PinX1基因在乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞周期中的作用,初步探讨了该基因用于乳腺癌临床治疗的可行性.采用RT-PCR技术从293-T细胞中扩增PinX 1基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,再将重组质粒转染MCF-7细胞.通过real-time PCR检测PinX1基因的mRNA表达,用MTT法检测转染前后细胞生长曲线的变化,用流式细胞仪检测转染目的基因后细胞生长周期的改变.检测结果表明,PinX1基因已经在转染后MCF-7细胞的细胞核内稳定表达,乳腺癌细胞生长明显减缓(P<0.05),增殖变慢(P<0.05),细胞生长阻滞于G0/G1期,说明PinX1基因可抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长和增殖.
关键词
乳腺癌
PinX1基因
载体构建
细胞增殖
Keywords
breast cancer
PinX1 gene
vector construction
cell proliferation
分类号
R736.3 [医药卫生—肿瘤]
在线阅读
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职称材料
题名
沉默SEMA3A基因对胶质瘤细胞U251增殖和转移的影响
2
作者
何志敏
马文丽
郑文岭
机构
上海大学电子生物研究所
南方医科
大学
基因工程
研究所
华南基因组
研究
中心
出处
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期237-244,共8页
文摘
探讨了SEMA3A基因在恶性胶质瘤细胞U251迁移和侵袭能力中的作用,及其用于胶质瘤临床治疗的可行性.用特异识别SEMA3A基因的短发卡RNA(short hairpin RNA,sh RNA)片段与真核表达载体p FH-GFP-L连接,再与辅助质粒联用来包装慢病毒.通过荧光显微镜观察感染胶质瘤细胞U251的感染效率.通过实时定量PCR技术和Western-blot技术验证了U251细胞中SEMA3A基因的沉默效果.通过MTT法、PI染色法和Transwell小室分别检测了U251细胞增殖、细胞周期和运动能力的变化.结果表明,SEMA3A-sh RNA慢病毒感染U251能有效下调SEMA3A基因的表达水平(P<0.01),使U251细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05),细胞大量阻滞在G2/M期,并促进了细胞凋亡(P<0.05).
关键词
胶质瘤
SEMA3A基因
增殖
转移
Keywords
glioma
SEMA3A gene
proliferation
metastasis
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PinX1基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用
胡宗
梁桑华
马文丽
郑文岭
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
沉默SEMA3A基因对胶质瘤细胞U251增殖和转移的影响
何志敏
马文丽
郑文岭
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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职称材料
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