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rAAV2载体介导GFP基因转染树突状细胞
1
作者
周小莹
暨明
+1 位作者
刘君彦
谭孟群
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期742-746,共5页
目的:在诱导人骨髓CD34+细胞分化成树突状细胞(dendritic cells,DCs)的基础上,探讨2型重组腺相关病毒(Type2recombinant adeno-associated virus,rAAV2)载体介导绿色荧光蛋白(green fluo-rescent protein,GFP)基因转染DCs的条件。方法:...
目的:在诱导人骨髓CD34+细胞分化成树突状细胞(dendritic cells,DCs)的基础上,探讨2型重组腺相关病毒(Type2recombinant adeno-associated virus,rAAV2)载体介导绿色荧光蛋白(green fluo-rescent protein,GFP)基因转染DCs的条件。方法:采用免疫磁珠法分离纯化人骨髓来源的CD34+细胞。在含有IL-4和GM-CSF的培养体系中体外诱导CD34+细胞生成DCs,于第5天加入TNF-α诱导DCs成熟,在不同时间用rAAV2载体介导GFP基因转染未成熟和成熟的DCs。通过电子显微镜和流式细胞仪鉴定树突状细胞,荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达。结果:人骨髓CD34+细胞经诱导分化后,在光镜及透射电镜下均可观察到DCs的形态特征,流式细胞仪检测到DCs表型;荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞培养第3天、第5天和加入TNF-α后的rAAV2-GFP转染率分别为0.45%,13.54%和0.25%。结论:本实验中所采用的培养体系可成功将人骨髓CD34+细胞诱导分化成DCs,rAAV2/GFP转染DCs效率随细胞诱导分化时间的延长而增高,且转染未成熟DCs的效率高于转染成熟DCs。
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关键词
重组腺相关病毒2型
GFP
树突状细胞
基因转导
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题名
rAAV2载体介导GFP基因转染树突状细胞
1
作者
周小莹
暨明
刘君彦
谭孟群
机构
中南大学基础医学院生理学系血液研究室
上海复旦张江生物公司
出处
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期742-746,共5页
基金
国家863计划项目(2005AA2Z3G10)
高校博士点基金资助项目(20040533031)
湖南省卫生厅科研基金(C2006-001)~~
文摘
目的:在诱导人骨髓CD34+细胞分化成树突状细胞(dendritic cells,DCs)的基础上,探讨2型重组腺相关病毒(Type2recombinant adeno-associated virus,rAAV2)载体介导绿色荧光蛋白(green fluo-rescent protein,GFP)基因转染DCs的条件。方法:采用免疫磁珠法分离纯化人骨髓来源的CD34+细胞。在含有IL-4和GM-CSF的培养体系中体外诱导CD34+细胞生成DCs,于第5天加入TNF-α诱导DCs成熟,在不同时间用rAAV2载体介导GFP基因转染未成熟和成熟的DCs。通过电子显微镜和流式细胞仪鉴定树突状细胞,荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达。结果:人骨髓CD34+细胞经诱导分化后,在光镜及透射电镜下均可观察到DCs的形态特征,流式细胞仪检测到DCs表型;荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞培养第3天、第5天和加入TNF-α后的rAAV2-GFP转染率分别为0.45%,13.54%和0.25%。结论:本实验中所采用的培养体系可成功将人骨髓CD34+细胞诱导分化成DCs,rAAV2/GFP转染DCs效率随细胞诱导分化时间的延长而增高,且转染未成熟DCs的效率高于转染成熟DCs。
关键词
重组腺相关病毒2型
GFP
树突状细胞
基因转导
Keywords
adeno-associated virus
green fluorescent protein
dendritic cells
gene transfection
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
rAAV2载体介导GFP基因转染树突状细胞
周小莹
暨明
刘君彦
谭孟群
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
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