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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂新类型Tid的全序列分析 被引量:7
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作者 忻骅 曹凯鸣 +1 位作者 谢可方 顾其敏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期671-673,共3页
It was widely thought that 3 variants of Kunitz type trypsin inhibitor(SBTi A 2) existed in soybean seed storage protein.Three of codominant alleles Ti a,Ti b and Ti c were identified to decode these SBTi A 2 inhibito... It was widely thought that 3 variants of Kunitz type trypsin inhibitor(SBTi A 2) existed in soybean seed storage protein.Three of codominant alleles Ti a,Ti b and Ti c were identified to decode these SBTi A 2 inhibitors and the amino acid sequences of them were determined,of which one or more different amino acid were found.Ti d was a new variant allele of SBTi A 2 discovered after analyzing more than 15 000 samples of soybean seed in China.In order to study the structure features of Ti d protein,the amino acid sequence of this protein was deduced from its coding region which was amplified by PCR from soybean genomic DNA and sequenced.By comparison with Ti a protein,two different amino acid residue were found between Ti a and Ti d proteins.One was an extra Ala inserted in the signal peptide of Ti d,with 8 residues from N terminal,and the other existed in the mature protein,with Glu 69 in Ti a protein turned into Lys 69 in Ti d protein.The amino acid sequence of Ti d mature protein was also different from those of Ti a and Ti b. 展开更多
关键词 大豆 Kunitz型 胰蛋白酶抑制剂 TID 序列分析
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抽提大豆各组织总DNA方法的比较研究 被引量:12
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作者 忻骅 袁卫明 顾其敏 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期719-721,共3页
抽提大豆各组织总DNA方法的比较研究忻骅袁卫明顾其敏(上海复旦大学生物化学系,上海200433)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)选择性沉淀DNA的方法被广泛用于抽提生物组织,特别是植物组织的总DNA,它简便快速,所得... 抽提大豆各组织总DNA方法的比较研究忻骅袁卫明顾其敏(上海复旦大学生物化学系,上海200433)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)选择性沉淀DNA的方法被广泛用于抽提生物组织,特别是植物组织的总DNA,它简便快速,所得DNA的纯度好,适用于进一步的酶切... 展开更多
关键词 大豆 DNA 提取
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小麦×豌豆遗传物质转移的研究 被引量:1
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作者 李忠娴 张思文 +3 位作者 孙崇荣 易豪雄 罗林广 肖运萍 《江西农业学报》 CAS 1992年第2期81-91,共11页
本研究对小麦×豌豆反复试验,重复观察豌豆花粉物质在小麦上的有性过程,并以豌豆DNA直接导入小麦为验证,结果均可重复,并获得大量能真实遗传的新类型种质资源。针对后代各种性状的变异,作者进行了细胞学、植物学、生物化学、分子生... 本研究对小麦×豌豆反复试验,重复观察豌豆花粉物质在小麦上的有性过程,并以豌豆DNA直接导入小麦为验证,结果均可重复,并获得大量能真实遗传的新类型种质资源。针对后代各种性状的变异,作者进行了细胞学、植物学、生物化学、分子生物学的醇溶蛋白和麦谷蛋白的研究,以及受精生物学等多学科综合研究,结果表明,小麦与豌豆的超远缘杂交,后代确实存在父本豌豆的遗传物质,乃通过有性转移过程导致后代遗传变异。 展开更多
关键词 远缘杂交 遗传物质转移 遗传变异 小麦 豌豆
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携带TIMP-1基因逆转录病毒载体的构建及其实验研究 被引量:1
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作者 龚涌灵 陈龙邦 黄伟达 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第2期174-179,共6页
构建携带组织金属蛋白酶抑制物TIMP-1基因的逆转录病毒载体,并用于感染胰腺癌SW1990细胞系,观察其侵袭、转移能力的变化.利用常规分子克隆技术,通过对逆转录病毒表达载体PMNSM(F6)质粒的去磷酸化、粘端连接,... 构建携带组织金属蛋白酶抑制物TIMP-1基因的逆转录病毒载体,并用于感染胰腺癌SW1990细胞系,观察其侵袭、转移能力的变化.利用常规分子克隆技术,通过对逆转录病毒表达载体PMNSM(F6)质粒的去磷酸化、粘端连接,构建TIMP-1基因逆转录病毒表达载体PMNSM/hTIMP;经限制性内切酶酶切、电泳鉴定其结构正确后,用电穿孔法对体外培养的PA137包装细胞进行基因转移,G418筛选阳性克隆,收集上清,并用于感染胰腺癌SW1990细胞系的研究.构建获得TIMP-1基因逆转录病毒表达载体PMNSM/hTIMP,有效滴度为104CFU/mL~106CFU/mL.本研究构建获得的TIMP-1基因逆转录病毒表达载体,在感染胰腺癌SW1990细胞系,观察其侵袭。 展开更多
关键词 逆转录病毒 载体构建 转染 胰腺癌 TIMP-1基因
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