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重组质粒pEGFP-N2/Pim-3转染对胰腺细胞损伤的保护作用
1
作者 简捷 黄缘 +2 位作者 刘利珍 李双 邓峰 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期710-715,共6页
目的 :研究重组质粒p EGFP-N2/Pim-3转染对内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的大鼠胰腺AR4-2J细胞损伤的保护机制。方法:实验分为4组:A组(正常对照组),B组(5μg/m L LPS处理组),C组(空载质粒p EGFP-N2转染+5μg/m L LPS处理组... 目的 :研究重组质粒p EGFP-N2/Pim-3转染对内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的大鼠胰腺AR4-2J细胞损伤的保护机制。方法:实验分为4组:A组(正常对照组),B组(5μg/m L LPS处理组),C组(空载质粒p EGFP-N2转染+5μg/m L LPS处理组),D组(重组质粒p EGFP-N2/Pim-3转染+5μg/m L LPS处理组)。流式细胞仪检测各组处理24 h后细胞凋亡情况。处理0、6、12、24 h后分别提取各组总RNA及蛋白,RT-PCR及Western blot分别检测Pim-3、细胞间黏附分子(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、紧密连接蛋白闭锁蛋白(Occludin)m RNA及蛋白的表达。结果 :处理24 h,各组细胞凋亡率分别为:A组(7.85±1.14)%、B组(53.13±5.73)%、C组(51.76±5.17)%、D组(21.13±4.15)%,D组细胞相对B、C组凋亡明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);D组Pim-3表达与A、B、C组之间的差异有统计学意义(P<0.05);处理12 h后B、C、D组ICAM-1高表达,24 h达高峰,相对于A组,差异均有统计学意义(P<0.01),D组与B、C组差异有统计学意义(P<0.05);处理6 h后,B、C、D组Occludin高表达,12 h达高峰,相对于A组,差异均有统计学意义(P<0.01),D组与B、C组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:丝/苏氨酸激酶Pim-3能够抑制胰腺细胞炎症反应和胰腺细胞凋亡,可能与上调闭锁蛋白和下调细胞间黏附分子的表达有关。 展开更多
关键词 丝/苏氨酸激酶Pim-3 紧密连接蛋白闭锁蛋白 细胞间黏附分子 凋亡 脂多糖
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着色性干皮病D组蛋白对胰腺癌PANC-1细胞紫杉醇敏感性的影响
2
作者 简捷 刘利珍 +3 位作者 邓峰 黄缘 秦健斌 李双 《医学研究生学报》 北大核心 2016年第12期1286-1290,共5页
目的研究表明化疗药物耐药和与消化道肿瘤相关的一系列基因分子突变密切相关。文章研究野生型人剪切修复基因XPD转染人胰腺癌PANC-1细胞后对结合型紫杉醇敏感性的影响。方法将空载质粒p EGFP-N_2及重组质粒p EGFP-N_2/XPD通过瞬时转染... 目的研究表明化疗药物耐药和与消化道肿瘤相关的一系列基因分子突变密切相关。文章研究野生型人剪切修复基因XPD转染人胰腺癌PANC-1细胞后对结合型紫杉醇敏感性的影响。方法将空载质粒p EGFP-N_2及重组质粒p EGFP-N_2/XPD通过瞬时转染于人胰腺癌PANC-1细胞。设正常对照组(不作任何处理)、空载质粒转染组(空载质粒p EGFPN_2转染)、重组质粒XPD转染组(重组质粒p EGFP-N_2/XPD转染)。使用RT-PCR和Western blot方法检验转染后XPD mRNA及蛋白表达;MTT实验检测结合型紫杉醇对XPD转染后PANC-1细胞增殖活性的变化;流式细胞仪检测XPD转染后PANC-1细胞在结合型紫杉醇作用下凋亡反应的差异。结果重组质粒XPD转染组中XPD mRNA表达量(9.572±0.345)和蛋白表达量(1.055±0.012)较正常对照组(1.125±0.043,0.302±0.002)及空载质粒转染组(1.273±0.057,0.378±0.004)明显升高(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组XPD mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组的A值均明显低于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.05);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组细胞凋亡率均明显高于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过XPD转染PANC-1细胞可明显增强PANC-1细胞对结合型紫杉醇的化疗敏感性。 展开更多
关键词 着色性干皮病D组蛋白 人胰腺癌细胞株PANC-1 紫杉醇 增殖 凋亡
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参芪扶正对肝癌化疗血浆免疫蛋白表达的影响及疗效观察 被引量：9
3
作者 徐继 何治军 张岩 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第8期2026-2030,共5页
研究参芪扶正注射液对肝癌化疗患者免疫功能的影响及疗效观察。方法：132例原发性肝癌患者随机分为对照组和观察组，对照组患者给予动脉栓塞化疗，观察组患者在动脉栓塞化疗基础上静脉注射液参芪扶正注射液。分别于治疗前和疗程结束后... 研究参芪扶正注射液对肝癌化疗患者免疫功能的影响及疗效观察。方法：132例原发性肝癌患者随机分为对照组和观察组，对照组患者给予动脉栓塞化疗，观察组患者在动脉栓塞化疗基础上静脉注射液参芪扶正注射液。分别于治疗前和疗程结束后，采用免疫散射比浊法测定患者外周血免疫球蛋白A（immunoglobulin，IgA）、G和M蛋白含量，流式细胞仪测定CD3、CD4＋、CDs细胞亚群数量，”CT释放法测定自然杀伤细胞（naturekill，NK）的活性；疗程结束后，采用RECIST1．1标准评价患者近期疗效，统计总有效率（RR）；治疗结束后每3个月进行随访1次，统计患者的2年无病生存率。于治疗前和治疗后，采用Karnofsky评分为标准评定患者生活质量改善情况，统计总改善率。结果：观察组患者淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD4＋／cD8＋水平及NK细胞活性较治疗前和对照组显著升高（P〈0．05），CDs细胞水平显著降低（P〈0．05）；而对照组治疗后含量与治疗前差异无统计学意义（P〉0．05）。观察组总有效率显著高于对照组（80．65％VS56．45％，X2=4．308，P=0．038〈0．05）。观察组中位生存期为19．10个月（95％CI：15．418—22．782），对照组中位生存期为11．20个月（95％CI：9．71～12．294），差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组患者生活质量总改善率显著高于对照组（85．48％VS51．6l％，）（X2=4．308，P=〈0．001）。且观察组白细胞减少、血红蛋白减少和血小板减少III—IV级不良反应发生率显著低于对照组（P〈0．05）。结论：参芪扶正注射液可以显著改善肝癌化疗患者免疫功能，提高患者预后，降低不良反应发生率。 展开更多
关键词 参芪扶正注射液 免疫比浊法测免疫球蛋白含量 流式细胞仪测淋巴细胞亚群数量 51Cr释放法测NK活性 疗效 不良反应
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