抗氧化剂和NF_κB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响 被引量：11

1

作者 刘清行 金惠铭 +2 位作者 吴朝辉 陈愉 刘凯 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期20-23,共4页

目的 :探讨NFκB在大鼠肺微血管内皮细胞iNOS基因诱导表达中的作用及抗氧化剂对内皮细胞iNOS诱导表达的影响及其机制。方法 :Griess法测定细胞培养上清液NO-2 水平以反映NO的生成 ,Northern印迹分析iNOSmRNA水平 ,EMSA法测定细胞核内NF... 目的 :探讨NFκB在大鼠肺微血管内皮细胞iNOS基因诱导表达中的作用及抗氧化剂对内皮细胞iNOS诱导表达的影响及其机制。方法 :Griess法测定细胞培养上清液NO-2 水平以反映NO的生成 ,Northern印迹分析iNOSmRNA水平 ,EMSA法测定细胞核内NFκB的结合活性。结果 :抗氧化剂可阻断内皮细胞培养体系LPS和TNFα诱导的NO生成及iNOSmRNA的表达 ;LPS和TNFα可诱导大鼠肺微血管内皮细胞NFκB的激活并可被抗氧化剂阻断。结论 :LPS和TNFα诱导的内皮细胞iNOS基因表达依赖于NFκB的激活 ; 展开更多

关键词 肺微血管 抗氧化剂 NFкB 一氧化氮合酶

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肿瘤坏死因子对体外培养的血管内皮细胞的作用 被引量：23

2

作者 沙志一 金惠铭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期455-459,共5页

在体外研究了肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对人脐静脉血管内皮细胞（ＨＶＥＣ）的作用。在体外培养的ＨＶＥＣ中加入人重组的ＴＮＦα，终浓度为４００Ｕ／ｍｌ（对照组以等量０．０１Ｍ，ｐＨ７．２ＰＢＳ代替ＴＮＦ），培养７２小时后取贴... 在体外研究了肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对人脐静脉血管内皮细胞（ＨＶＥＣ）的作用。在体外培养的ＨＶＥＣ中加入人重组的ＴＮＦα，终浓度为４００Ｕ／ｍｌ（对照组以等量０．０１Ｍ，ｐＨ７．２ＰＢＳ代替ＴＮＦ），培养７２小时后取贴壁细胞及培养液进行研究。结果发现，与对照组相比，ＴＮＦ组细胞有如下变化：１．光镜观察可见ＴＮＦ组细胞明显拉长，电镜观察发现细胞表面微绒毛减少，胞质中次级溶酶体增多，线粒体肿胀，变性，髓样小体出现。２．ＴＮＦ对ＨＶＥＣ的增殖有抑制作用。３．细胞表面纤维连接蛋白（Ｆｎ）的免疫荧光明显减弱。但ＴＮＦ组培养液中Ｆｎ含量增高。根据以上实验结果作者认为，经ＴＮＦ作用后内皮细胞形态的改变，增殖的抑制与细胞表面Ｆｎ的减少是ＴＮＦ引起微血管通透性升高的可能机制。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 血管内皮 纤维连接

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L6565小鼠白血病癌基因表达的初步研究 被引量：5

3

作者 殷莲华 郑颂国 +1 位作者 程立 许良中 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期173-175,共3页

本文应用免疫组织化学方法检测我室建立的L6565淋巴细胞性白血病小鼠的肝、脾、淋巴结、胸腺等组织的癌基因和癌蛋白及分化标记。结果发现上述组织中对C-myc、c-fos癌基因都呈较强的表达,尤其以脾和肝表达最强,对c-jun、ras-P21和c-erb... 本文应用免疫组织化学方法检测我室建立的L6565淋巴细胞性白血病小鼠的肝、脾、淋巴结、胸腺等组织的癌基因和癌蛋白及分化标记。结果发现上述组织中对C-myc、c-fos癌基因都呈较强的表达,尤其以脾和肝表达最强,对c-jun、ras-P21和c-erbB-2则呈弱阳性表达,而对P53和bcl-2则不表达。同时还对它们的分化表记进行了检测,提示其可能还是处于干细胞水平。 展开更多

关键词 白血病 致癌基因 基因表达

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逆转录病毒载体介导的反义c-myc抗白血病作用的研究 被引量：3

4

作者 赵新永 殷莲华 +1 位作者 孔宪寿 杨轶群 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1043-1047,共5页

目的 :研究c-myc基因在L6 5 6 5小鼠白血病发生中的作用以及抑制其表达所起的治疗作用。方法 :用逆转录病毒载体pGNC构建一个含有小鼠反义c -myc基因的逆转录病毒表达系统pGNCas。用磷酸钙沉淀法将pGNCas导入包装细胞PA317,筛选获得病... 目的 :研究c-myc基因在L6 5 6 5小鼠白血病发生中的作用以及抑制其表达所起的治疗作用。方法 :用逆转录病毒载体pGNC构建一个含有小鼠反义c -myc基因的逆转录病毒表达系统pGNCas。用磷酸钙沉淀法将pGNCas导入包装细胞PA317,筛选获得病毒生产细胞。用pGNCas病毒感染L6 5 6 5白血病克隆细胞 ,筛选后 ,获得抗G418阳性克隆细胞L6 5 6 5as。PCR方法检测反义c -myc序列是否稳定整合入L6 5 6 5as细胞中。最后从细胞生长、形态、周期、软琼脂集落形成能力以及c -myc基因表达方面观察其恶性和表型的改变。结果 :L6 5 6 5as细胞形态变圆 ,大小较一致。生长曲线显示 :L6 5 6 5as细胞生长被抑制 ;流式细胞仪检测细胞周期 :L6 5 6 5as阻滞于G0 /G1期 ,S期细胞减少 ;软琼脂集落形成试验发现L6 5 6 5as细胞形成克隆数明显减少。免疫组化检测 :L6 5 6 5as细胞c-myc蛋白表达呈弱阳性 ,而对照组细胞呈强阳性。结论 :c -myc基因在L6 5 6 5小鼠白血病的发生中起着重要的作用 ;抑制c-myc的表达 ,可部分逆转L6 5 6 5白血病的恶性表型和恶性行为。 展开更多

关键词 逆转录病毒科 癌基因 反义寡核苷核类 白血病 C-MYC

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感染小鼠白血病病毒的L783V/3T3细胞系的建立及鉴定 被引量：1

5

作者 吕彪 季文琴 +2 位作者 程立 黄春妹 宋后燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第6期569-572,共4页

L783是上海医科大学病理生理教研室七十年代建立的一株小鼠可移植性淋巴细胞型白血病。用L783发病小鼠的血液、脾脏等组织的无细胞提取液,分别感染NIH-3T3培养细胞,建立了L783小鼠白血病病毒感染的NIH-3T3细胞系(L783V/3T3)。实验结果表... L783是上海医科大学病理生理教研室七十年代建立的一株小鼠可移植性淋巴细胞型白血病。用L783发病小鼠的血液、脾脏等组织的无细胞提取液,分别感染NIH-3T3培养细胞,建立了L783小鼠白血病病毒感染的NIH-3T3细胞系(L783V/3T3)。实验结果表明:L783V/3T3细胞的XC合胞形成试验阳性,电镜下可观察到典型的A型和C型病毒颗粒。制备L783V/3T3细胞无细胞提取液,接种新生昆明种乳鼠,能诱发淋巴细胞型白血病。 展开更多

关键词 白血病病毒 白血病 淋巴细胞性 鼠

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脂肪乳剂Intralipid对犬急性坏死性胰腺炎自然病程的影响 被引量：2

6

作者 吴海福 张宏伟 +3 位作者 左焕琛 金惠铭 夏立钧 吴肇汉 《肠外与肠内营养》 CAS 1994年第1期20-23,共4页

１４只犬主胰管内注入４％牛磺胆酸钠０．５ｍｌ／ｋｇ及胰蛋白酶０．５ｍｇ／ｋｇ混合液诱发急性坏死性胰腺炎后，随机分成全糖组和糖脂组；两组氮量相等，为０．３ｇ·ｋｇ－１／ｄ；非蛋白质热量均为２０９．２ｋＪ·ｋｇ－... １４只犬主胰管内注入４％牛磺胆酸钠０．５ｍｌ／ｋｇ及胰蛋白酶０．５ｍｇ／ｋｇ混合液诱发急性坏死性胰腺炎后，随机分成全糖组和糖脂组；两组氮量相等，为０．３ｇ·ｋｇ－１／ｄ；非蛋白质热量均为２０９．２ｋＪ·ｋｇ－１／ｄ，全糖组供热由葡萄糖提供；糖脂组由葡萄糖和脂肪乳剂提供（比例１∶１）。在胰管内注药后１ｈ开始静脉输注营养液，结果示两组在胰腺炎诱发后血淀粉酶、溶酶体酶升高，ＣＴ和组织学检查呈现急性坏死性胰腺炎的征象，表明急性坏死性胰腺炎模型制作成功。在停输ＰＮ时，全糖组的血糖降至实验前值以下，而糖脂组却无此现象，揭示单纯用葡萄糖提供热量时在停输ＰＮ以后有可能出现低血糖反应。Ｉｎｔｒａｌｉｐｉｄ输注后，各项指标连续监测结果示其对急性坏死性胰腺炎自然病程无影响。 展开更多

关键词 肠外营养 脂肪乳剂 胰腺炎

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肝素对肾脏系膜细胞生长的抑制作用 被引量：1

7

作者 张明 金惠铭 郭慕依 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期443-446,共4页

肝素对肾脏系膜细胞生长的抑制作用上海医科大学病理生理教研室（上海２０００３２）张明，金惠铭上海医科大学病理解剖教研室郭慕依肝素是多年来临床常用的抗凝药物，其化学成分为一种带负电荷高度硫酸化的氨基多糖，分子量为１２～１... 肝素对肾脏系膜细胞生长的抑制作用上海医科大学病理生理教研室（上海２０００３２）张明，金惠铭上海医科大学病理解剖教研室郭慕依肝素是多年来临床常用的抗凝药物，其化学成分为一种带负电荷高度硫酸化的氨基多糖，分子量为１２～１８ＫＤ。在体内可由血管内皮细胞、平... 展开更多

关键词 肝素 肾小球系膜细胞 抑制作用

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腹水瘤细胞克隆株异质性研究

8

作者 孔宪寿 许菡 程立 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期390-393,共4页

应用小鼠腹水瘤细胞的克隆株研究异质性。从小鼠SRS-82腹水瘤细胞系分离出SAC-ⅡB_2和SAC-ⅡC_3 2个克隆细胞株.将SRS-82腹水瘤亲代细胞与SAC-ⅡB_2,SAC-ⅡC_3克隆细胞作比较研究,结果显示3种细胞在细胞形态、生长特性、染色体组型、细... 应用小鼠腹水瘤细胞的克隆株研究异质性。从小鼠SRS-82腹水瘤细胞系分离出SAC-ⅡB_2和SAC-ⅡC_3 2个克隆细胞株.将SRS-82腹水瘤亲代细胞与SAC-ⅡB_2,SAC-ⅡC_3克隆细胞作比较研究,结果显示3种细胞在细胞形态、生长特性、染色体组型、细胞电泳率与凝集性、细胞周期分布、致瘤性和药物敏感性上存在差异.表明SRS-82腹水瘤细胞系是一个异质的群体,但3种细胞都有相同的细胞表面免疫标志,SAC-ⅡB_2和SAC-ⅡC3克隆细胞具的交叉免疫原性,即它们具有共同的免疫学特以上实验结果.为腹水瘤的诊断、分类和治疗提供了有用资料。 展开更多

关键词 异质性 细胞克隆株 腹水瘤 小鼠

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与内皮细胞有关的原癌基因表达的调控

9

作者 沙志一 金惠铭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期221-224,共4页

与内皮细胞有关的原癌基因表达的调控上海医科大学病理生理教研室（上海２０００３２）沙志一，金惠铭细胞癌基因（ｃｅｌｌｕｌａｒｏｎｃｏｇｅｎｅｓ）目前已成为医学和生物学研究中最为活跃的领域之一。癌基因不仅存在于癌瘤细胞中... 与内皮细胞有关的原癌基因表达的调控上海医科大学病理生理教研室（上海２０００３２）沙志一，金惠铭细胞癌基因（ｃｅｌｌｕｌａｒｏｎｃｏｇｅｎｅｓ）目前已成为医学和生物学研究中最为活跃的领域之一。癌基因不仅存在于癌瘤细胞中，在正常的细胞中亦有与癌基因同源的... 展开更多

关键词 基因表达 内皮细胞 原癌基因 激活 损伤

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反义c-fos寡脱氧核苷酸对淋巴瘤细胞株SAC-IIB_2恶性表型抑制的研究 被引量：4

10

作者 殷连华 孔宪寿 +1 位作者 严开平 郑颂国 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第1期58-60,共3页

已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,... 已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,同时降低其对裸鼠的致瘤性及Fos蛋白的表达,但对SAC-IIB_2的细胞动力学没有明显的影响.而正义和无义的c-fos寡脱氧核苷酸没有相应的作用.提示反义c-fos寡脱氧核苷酸能特异地抑制小鼠淋巴瘤SAC-IIB_2细胞的恶性表型. 展开更多

关键词 淋巴瘤 细胞株 c-fox 寡脱氧核苷酸 反义技术

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反义fos对淋巴瘤细胞抑制研究

11

作者 严开平 殷莲华 +1 位作者 孔宪寿 郑颂国 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期257-257,共1页

SACⅡB2是我室在SRS-82细胞系基础上建立的小鼠淋巴瘤克隆细胞株。应用免疫组织化学方法对SACⅡB2的癌基因表达产物进行筛选，发现c-fos呈高强度表达。设计同小鼠c-fos的mRNA第2～7个编码子共18个核苷酸序列互补的反义寡聚脱氧核苷酸(an... SACⅡB2是我室在SRS-82细胞系基础上建立的小鼠淋巴瘤克隆细胞株。应用免疫组织化学方法对SACⅡB2的癌基因表达产物进行筛选，发现c-fos呈高强度表达。设计同小鼠c-fos的mRNA第2～7个编码子共18个核苷酸序列互补的反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxyribonucleotidc，AS-ODN)， 展开更多

关键词 淋巴瘤细胞 c-fos 反义 小鼠 免疫组织化学方法 癌基因表达 ODN 克隆细胞 RNA 核苷酸序列

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