乌苏里藜芦生物碱对豚鼠心肌细胞动作电位及钙电流的影响 被引量：6

1

作者 王建民 魏苑 +3 位作者 钟慈声 赵伟杰 郭永田 梁子钧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1403-1405,共3页

的　研究乌苏里藜芦生物碱对豚鼠心肌细胞动作电位及钙通道电流的作用。方法　用全细胞记录技术记录单个心室肌细胞动作电位以及钙通道电流。结果　乌苏里藜芦生物碱可延长动作电位时程 ,其在 0 3～ 30 μmol·L- 1 的浓度范围内 ... 的　研究乌苏里藜芦生物碱对豚鼠心肌细胞动作电位及钙通道电流的作用。方法　用全细胞记录技术记录单个心室肌细胞动作电位以及钙通道电流。结果　乌苏里藜芦生物碱可延长动作电位时程 ,其在 0 3～ 30 μmol·L- 1 的浓度范围内 ,可使复极 90 %动作电位时程 (APD90 )和复极 50 %动作电位时程 (APD50 )分别延长 1 3%～ 1 1 2 %和 2 3 %～ 1 31 %。 3～ 30 μmol·L- 1 的高浓度可诱发异常节律。乌苏里藜芦生物碱对心肌细胞钙电流有促进作用 ,此作用呈短暂的浓度依赖性增强。结论　乌苏里藜芦生物碱可通过增加钙通道电流延长心室肌细胞动作电位时程。 展开更多

关键词 藜芦生物碱类 动作电位 心肌 钙通道 膜片钳技术

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血管吻合术后过氧化氢的形成及丹参素对超氧自由基的作用 被引量：23

2

作者 周武雄 钟慈声 +1 位作者 袁伟 顾玉东 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第2期115-117,共3页

目的了解血管吻合术后的损伤和修复。方法ＣｅＣｌ３－Ｈ２Ｏ２的电镜细胞化学法观察了大鼠颈总动脉吻合术后血管内皮Ｈ２Ｏ２的形成和机体对Ｈ２Ｏ２的清除作用以及丹参素对缺血再灌注损伤血管超氧自由基的作用。结果发现血管吻合术后... 目的了解血管吻合术后的损伤和修复。方法ＣｅＣｌ３－Ｈ２Ｏ２的电镜细胞化学法观察了大鼠颈总动脉吻合术后血管内皮Ｈ２Ｏ２的形成和机体对Ｈ２Ｏ２的清除作用以及丹参素对缺血再灌注损伤血管超氧自由基的作用。结果发现血管吻合术后内皮有大量Ｈ２Ｏ２产生，４ｈ后Ｈ２Ｏ２量无显著变化，３ｄ后才显著减少。丹参素能减少缺血再灌注血管Ｈ２Ｏ２的量，对氧自由基损伤有保护作用。结论血管吻合术后内皮的损伤与氧自由基的释放有关。 展开更多

关键词 血管吻合术 过氧化氢 丹参素 超氧自由基

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annexin钙依赖磷脂结合蛋白在细胞分泌中的作用 被引量：6

3

作者 刘懿 凌诒萍 钟慈声 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期367-369,共3页

ａｎｎｅｘｉｎ族蛋白质是广泛存在于动植物细胞内的依赖Ｃａ２＋的磷脂结合蛋白，具有多种重要生理功能。本文在介绍ａｎｎｅｘｉｎ蛋白质家族的共同特性同时，着重阐述了几种主要的ａｎｎｅｘｉｎ家族成员（ｓｙｎｅｘｉｎ、ｃａｌｅ... ａｎｎｅｘｉｎ族蛋白质是广泛存在于动植物细胞内的依赖Ｃａ２＋的磷脂结合蛋白，具有多种重要生理功能。本文在介绍ａｎｎｅｘｉｎ蛋白质家族的共同特性同时，着重阐述了几种主要的ａｎｎｅｘｉｎ家族成员（ｓｙｎｅｘｉｎ、ｃａｌｅｌｅｃｔｒｉｎ、ｃａｌｐａｃｔｉｎ）在细胞分泌过程中的作用。 展开更多

关键词 ANNEXIN 钙依赖 磷脂结合蛋白 细胞分泌

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超氧化物歧化酶对大鼠缺血骨骼肌钢泵、钙泵和细胞形态的影响 被引量：3

4

作者 李继峰 顾玉东 +2 位作者 袁伟 钟慈声 凌诒萍 《上海医科大学学报》 CSCD 1997年第2期103-106,共4页

研究超氧化物歧化酶对缺血骨骼肌和血管平滑肌的保护作用。应用大鼠离体肢体分别用超氧化物歧化酶（SOD）和生理盐水溶液灌注，保存0～48h，经2，4，8，16，24，48，72h取小腿三头肌进行Na＋－K＋－ATP醇和Ca2＋－ATP酶活性检测，并对... 研究超氧化物歧化酶对缺血骨骼肌和血管平滑肌的保护作用。应用大鼠离体肢体分别用超氧化物歧化酶（SOD）和生理盐水溶液灌注，保存0～48h，经2，4，8，16，24，48，72h取小腿三头肌进行Na＋－K＋－ATP醇和Ca2＋－ATP酶活性检测，并对此骨骼肌和股动脉平滑肌进行超微结构观察。结果：发现SOD灌注对缺血骨骷肌、股动脉平滑肌的酶活性及细胞形态都优于生理盐水灌注组（P＜0．01）。结论：结果表明SOD灌注时离体肢体的存活有保护作用。 展开更多

关键词 超氧化物歧化酶 钠泵 钙泵 骨骼肌 平滑肌 缺血

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反义核酸对人白血病HL—60细胞中c—myc基因表达的抑制 被引量：3

5

作者 汤华 单易非 +1 位作者 高红阳 周静芳 《上海医科大学学报》 CSCD 1997年第3期173-176,共4页

研究两个反义核酸（18mer，21mer）对人白血病HL—60细胞中c－myc基因表达的抑制作用。用HL－60活细胞计数，RNA含量的RT－PCR测定和c－myc基因蛋白的免疫组化染色检查。结果：两个反义寡核苷酸都能抑制HL－60细胞的增殖，增殖抑制率为1... 研究两个反义核酸（18mer，21mer）对人白血病HL—60细胞中c－myc基因表达的抑制作用。用HL－60活细胞计数，RNA含量的RT－PCR测定和c－myc基因蛋白的免疫组化染色检查。结果：两个反义寡核苷酸都能抑制HL－60细胞的增殖，增殖抑制率为11％～75％。反义核酸还抑制c－mycmRNA和Myc蛋白的表达，而对c－mcy基因正常表达的红白血病细胞K562的增殖和PHA刺激的人淋巴细胞的增殖没有影响。结论：反义寡核苷酸能抑制c－myc基因的过度表达。 展开更多

关键词 白血病 反义核酸 HL-60细胞 C-MYC基因

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兔血小板被A23187、凝血酶、ADP激活时其超微结构和颗粒数的变化 被引量：3

6

作者 丁舰 俞彰 钟慈声 《上海医科大学学报》 CSCD 1996年第6期434-438,共5页

研究钙离子导体Ａ２３１８７（１μｍｏｌ／Ｌ）、凝血酶（２ｕ／ｍｌ）、腺苷二磷酸（ＡＤＰ，２００μｍｏｌ／Ｌ）激活血小板的超微结构和颗粒数的变化。采用电子显微术和颗粒数密度（Ｎｖ）计量法。结果：激活的血小板有变形，包括... 研究钙离子导体Ａ２３１８７（１μｍｏｌ／Ｌ）、凝血酶（２ｕ／ｍｌ）、腺苷二磷酸（ＡＤＰ，２００μｍｏｌ／Ｌ）激活血小板的超微结构和颗粒数的变化。采用电子显微术和颗粒数密度（Ｎｖ）计量法。结果：激活的血小板有变形，包括伪足生成，颗粒移向中央区，微管解聚，分泌颗粒的胞吐现象及分泌颗粒减少等一系列反应，３种激动剂所引起的形态变化并无明显差异。小剂量Ａ２３１８７引起αＧ和ｄＧ的数密度分别下降５２．８８％和３６．０２％，两者差异显著（Ｐ＜０．０１）。用量大的ＡＤＰ对两种颗粒促释放的影响则无差异。结论：激动剂作用较弱时αＧ较ｄＧ更易释放。 展开更多

关键词 A23187 凝血酶 ADP 激活 血小板 颗粒 超微结构

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碳酸酐酶细胞化学方法的改良及在大鼠肾小管上皮细胞的定位 被引量：2

7

作者 李广君 钟慈声 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第S1期9-12,共4页

目的用改良的碳酸酐酶（ＣＡ）细胞化学方法研究其在肾小管上皮细胞上的分布。方法以铈作捕捉剂将Ｙｏｋｏｄａ的铅－钴置换法改为铈－钴置换法，进行ＣＡ的亚细胞定位研究。结果电镜下见铈置换的反应产物颗粒细小，均匀，非特异性沉淀... 目的用改良的碳酸酐酶（ＣＡ）细胞化学方法研究其在肾小管上皮细胞上的分布。方法以铈作捕捉剂将Ｙｏｋｏｄａ的铅－钴置换法改为铈－钴置换法，进行ＣＡ的亚细胞定位研究。结果电镜下见铈置换的反应产物颗粒细小，均匀，非特异性沉淀少。观察到ＣＡ反应产物主要存在于近曲小管刷状缘质膜，内吞泡膜腔面及线粒体被膜，远曲小管上皮细胞的线粒体被膜上也有分布，但较小。结论铈法及孵育方法的改进获得理想效果，用此细胞化学方法显示的ＣＡ，与和表面膜结合的Ⅳ型ＣＡ一致，主要功能与近曲小管完成ＨＣＯ３－重吸收有关。 展开更多

关键词 碳酸酐酶 线粒体 铈-钴置换法 细胞化学

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从四氢异喹啉类化合物中发展新钙拮抗剂 被引量：1

8

作者 董辉 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期141-144,共4页

从四氢异喹啉类化合物中发展新钙拮抗剂董辉（上海医科大学基础医学院生物物理学教研室，上海２０００３２）董辉，男，药理学专业。导师：杨藻宸教授（上海医科大学），李志明博士（香港中文大学），黄德明博士（香港大学）。论文答辩... 从四氢异喹啉类化合物中发展新钙拮抗剂董辉（上海医科大学基础医学院生物物理学教研室，上海２０００３２）董辉，男，药理学专业。导师：杨藻宸教授（上海医科大学），李志明博士（香港中文大学），黄德明博士（香港大学）。论文答辩日期：１９９２年１１月２１日，答辩... 展开更多

关键词 钙拮抗剂 四氢异喹啉类 药理

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大鼠肝癌诱发过程中肝组织细胞间粘附分子-1的异常表达

9

作者 郭德煌 旷双远 +3 位作者 方晰 梁子钧 励雁峰 钱耕荪 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第3期237-239,共3页

目的研究大鼠肝癌诱发过程中细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的不同表达。方法采用二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝癌模型，分别检测非特异性药物反应、非癌性增生性改变和肝癌发生３个阶段６个时相的肝组织中ＩＣＡＭ－１的表达... 目的研究大鼠肝癌诱发过程中细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的不同表达。方法采用二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝癌模型，分别检测非特异性药物反应、非癌性增生性改变和肝癌发生３个阶段６个时相的肝组织中ＩＣＡＭ－１的表达。结果在诱癌的前２个阶段ＩＣＡＭ－１的表达逐渐增强，到２０周左右ＩＣＡＭ－１的表达到高峰，其后表达减弱。结论ＩＣＡＭ－１的这种不同表达可能与细胞因子对肝细胞的不同刺激及肝癌结节的数量和大小有关。 展开更多

关键词 肝肿瘤 大鼠 ICAM-1 基因异常表达

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胆道铸型扫描电镜观察

10

作者 毛明珍 汪良 钟慈声 《上海医科大学学报》 CSCD 1995年第2期116-118,共3页

用扫描电镜铸型法观察大鼠肝内胆道系统以及与肝组织间的空间结构关系。结 果：当用中等剂量的铸型剂 （８０μｌ）从总胆管逆向注入时，可见小叶间及小叶内胆管及 Ｍａｌｌ’ｓ间 隙内有铸型剂充盈，胆小管中未见铸型剂；当用较大量（... 用扫描电镜铸型法观察大鼠肝内胆道系统以及与肝组织间的空间结构关系。结 果：当用中等剂量的铸型剂 （８０μｌ）从总胆管逆向注入时，可见小叶间及小叶内胆管及 Ｍａｌｌ’ｓ间 隙内有铸型剂充盈，胆小管中未见铸型剂；当用较大量（２００μｌ）注入时，除上述部位充盈外，还 可见肝狄氏间隙、肝血窦内有铸型剂。表明：铸型剂通过胆管上皮间隙，进入胆管周围淋巴而 入Ｍａｌｌ’ｓ间隙；当铸型剂增多时，可经 Ｍａｌｌ’ｓ间隙进入狄氏间隙和肝血窦。这可能是临床上造 成胆道－静脉返流的一条途径。 展开更多

关键词 扫描电镜术 胆道铸型 胆道静脉返流

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反义寡核苷酸对HL60细胞c-myc基因表达的抑制和诱导分化作用 被引量：4

11

作者 王松梅 单易非 +1 位作者 高红阳 汤华 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第3期167-170,共4页

目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ... 目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ）３’与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃｍｙｃｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。结果用ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测出ＨＬ６０细胞ｃｍｙｃｍＲＮＡ的含量减少；细胞形态学变化以及非特异性酯酶（ＮＳＥ）染色、硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验均提示ＨＬ６０细胞出现了分化，部分细胞向粒细胞方向分化，部分细胞向单核细胞方向分化。结论ｃｍｙｃ反义寡核苷酸能够抑制ｃｍｙｃ基因的表达并能诱导ＨＬ６０细胞分化。 展开更多

关键词 C-MYC基因 HL60细胞 反义寡核苷酸 分化

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小鼠SRS白血病病毒前病毒DNA片段的分子克隆 被引量：1

12

作者 李赤波 郑葆芬 《上海医科大学学报》 CSCD 1993年第4期251-254,T014,共5页

从重组质粒pSF_(11)中提取SRS白血病病毒(SRSV)5kb DNA片段,用双脱氧法对其两末端进行测序,每端测得约150bp,从中筛选出PCR引物。SRSV新鲜感染NIH/3T3细胞,从感染细胞的胞质内提取前病毒DNA。用PCR法对SRSV前病毒DNA中的约3.4kb片段进... 从重组质粒pSF_(11)中提取SRS白血病病毒(SRSV)5kb DNA片段,用双脱氧法对其两末端进行测序,每端测得约150bp,从中筛选出PCR引物。SRSV新鲜感染NIH/3T3细胞,从感染细胞的胞质内提取前病毒DNA。用PCR法对SRSV前病毒DNA中的约3.4kb片段进行扩增,扩增产物用BamHⅠ酶切后与碱性磷酸单酯酶处理的pUC_(19)载体连接,并转化大肠杆菌JM_(103),得到含约3.4kb前病毒DNA片段插入子的重组质粒,并经Southern Blot证实,定名为pSF_(12),该克隆的SRSV DNA片段含有部分的env和pol基因。pSF_(12)和pSF_(11)构成SRSV的完整基因克隆。 展开更多

关键词 白血病 病毒 前病毒DNA 分子克隆

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人类T细胞白血病病毒Ⅰ型的血清学调查

13

作者 马继延 郑葆芬 +1 位作者 陈晓红 谢红燕 《上海医科大学学报》 CSCD 1993年第1期63-65,T004,共4页

人类T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)主要导致T细胞白血病和T细胞淋巴瘤,并且在一些自身免疫性的疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)患者中有较高的感染率。我们对上海周围地区与HTLV-Ⅰ有关的部分病例进行检测。运用免疫荧光法从临床白血病患者... 人类T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)主要导致T细胞白血病和T细胞淋巴瘤,并且在一些自身免疫性的疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)患者中有较高的感染率。我们对上海周围地区与HTLV-Ⅰ有关的部分病例进行检测。运用免疫荧光法从临床白血病患者中筛选了6例T淋巴细胞性白血病患者,用病理切片诊断出28例皮肤T细胞淋巴瘤患者以及56例SLE患者;分别抽取患者的血清样品,运用ELISA和Western蛋白印迹电泳的方法进行检测。从上述90例标本中,发现一例T淋巴细胞性白血病患者血清呈阳性反应。 展开更多

关键词 T细胞 血清学 白血病病毒

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聚合酶链反应中引物的计算机辅助筛选

14

作者 李赤波 吴春根 郑葆芬 《上海医科大学学报》 CSCD 1994年第2期143-145,共3页

利用计算机辅助筛选聚合酶链反应（ＰＣＲ）的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括：①引物的３′端均以ＧＣ对结尾；②引物的长度为１８～的个寡核苷酸；③每个引物中的ＧＣ含量为４５％～６０％；④避免引物自身... 利用计算机辅助筛选聚合酶链反应（ＰＣＲ）的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括：①引物的３′端均以ＧＣ对结尾；②引物的长度为１８～的个寡核苷酸；③每个引物中的ＧＣ含量为４５％～６０％；④避免引物自身及引物之间的同源性。由此我们设计了ＳＲＳ小鼠白血病病毒的引物，成功地扩增了３．４ｋｂ的大片段目的基因。实验结果证明了由此法筛选出来的引物的有效性和特异性。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 引物 计算机

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用试管PCR法和玻片PCR法检测SRSV感染细胞中的病毒顺序

15

作者 高红阳 吴春根 单易非 《上海医科大学学报》 CSCD 1993年第3期228-230,共3页

多聚酶链反应(PCR)作为一种快速灵敏的分子生物学实验手段正日益引起科研及实践工作者的重视。传统的PCR常需先提得核酸,再对核酸样品进行扩增。我们采用的试管PCR法和玻片PCR法可省去提取核酸的步骤,而直接从细胞开始,对小鼠SRS腹水瘤... 多聚酶链反应(PCR)作为一种快速灵敏的分子生物学实验手段正日益引起科研及实践工作者的重视。传统的PCR常需先提得核酸,再对核酸样品进行扩增。我们采用的试管PCR法和玻片PCR法可省去提取核酸的步骤,而直接从细胞开始,对小鼠SRS腹水瘤病毒基因进行扩增,灵敏度达到1×10~5个细胞。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 基因检测 病毒

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RNase　H在反义寡聚脱氧核苷酸抑制小鼠白血病病毒表达过程中的作用

16

作者 粟文英 单易非 《上海医科大学学报》 CSCD 1994年第5期351-355,T021,共6页

用与Ｍｏｌｏｎｅｙ小鼠白血病病毒（Ｍｏ－ＭｕＬＶ）５＇端引物序列、ｅｎｖ－ＬＴＲ间序列及ｐｏｌ基因互补的三种反义脱氧寡核苷酸（１４ｍｅｒ，１８ｍｅｒ，３５ｍｅｒ）进行抗小鼠白血病病毒（ＳＲＳＶ）作用研究。发现它们在兔... 用与Ｍｏｌｏｎｅｙ小鼠白血病病毒（Ｍｏ－ＭｕＬＶ）５＇端引物序列、ｅｎｖ－ＬＴＲ间序列及ｐｏｌ基因互补的三种反义脱氧寡核苷酸（１４ｍｅｒ，１８ｍｅｒ，３５ｍｅｒ）进行抗小鼠白血病病毒（ＳＲＳＶ）作用研究。发现它们在兔网织红细胞体外翻译系统中能抑制ＳＲＳＶｍＲＮＡ的转译，其中，３５ｍｅｒ作用最强，浓度为８μｍｏｌ／Ｌ时抑制率约４０％１４ｍｅｒ作用较弱，抑制率仅２３％；ＲＮａｓｅＨ能有效降解不对称ＰＣＲ反应合成的单链反义ＤＮＡ（１１９ｍｅｒ）与ＳＲＳＶＲＮＡ杂交体中的ＲＮＡ，加入ＲＮａｓｅＨ后，３５ｍｅｒ和１８ｍｅｒ对ＳＲＳＶｍＲＮＡ转译的抑制率分别由４２％提高到５９％和２７％提高到３３％，但１４ｍｅｒ抑制率无改变。提示反义寡核苷酸能有效地抑制ＳＲＳＶｍＲＮＡ的表达，这种作用呈序列特异性和剂量依赖性。它们可能是通过ＲＮａｓｅＨ对反义ＤＮＡ·ＳＲＳＶｍＲＮＡ杂交体中的ＲＮＡ降解所致。 展开更多

关键词 RNaseH 反义核酸 体外翻译

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人疣内乳头瘤病毒的分离及形态观察

17

作者 李丽春 吴展琪 +2 位作者 曹式芳 钟慈声 徐丽英 《上海医科大学学报》 CSCD 1994年第16期423-426,T027,共5页

从人寻常疣组织中，在ＣｓＣｌ密度梯度为１．３４ｇ／ｃｍ３区内分离提纯得到的病毒颗粒，经负染后，在透射电镜下观察形态为圆球形，平均直径为５１．８±２．５３ｎｍ，表面布满子粒，排列呈五邻体和六邻体。从电镜所见，推断此... 从人寻常疣组织中，在ＣｓＣｌ密度梯度为１．３４ｇ／ｃｍ３区内分离提纯得到的病毒颗粒，经负染后，在透射电镜下观察形态为圆球形，平均直径为５１．８±２．５３ｎｍ，表面布满子粒，排列呈五邻体和六邻体。从电镜所见，推断此病毒颗粒为二十面体，立体对称，子粒为４２个，Ｔ＝４，分离出的病毒属乳头瘤病毒（ＨＰＶ），这与Ｋｌｕｇ等１９６５年报道的ＨＰＶ不完全相似，后者颗粒表面具有７２个子粒，Ｔ＝７。 展开更多

关键词 疣 乳头瘤病毒 形态特征 密度梯度离心

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