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题名葡萄球菌肠毒素B突变体的构建
被引量：2
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作者
俞红
钱利生
李雪萍
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机构
上海医科大学基础医学院微生物学教研室
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出处
《上海医科大学学报》
CSCD
2000年第4期238-239,244,共3页
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文摘
目的 应用重组和克隆技术在大肠杆菌中表达葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体。方法 利用PCR和PCR致变技术从产SEB的标准株扩增SEB基因 ,与原核表达载体 pTrc99A重组后引入大肠杆菌JM1 0 9。通过序列测定鉴定突变基因 ;用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和单向免疫扩散试验分别检测表达产物和表达量。结果 获得了 3株重组菌NJM1 0 9、M2 3JM1 0 9、M1 5 0JM 1 0 9。测序表明 ,SEB N序列与已报道的天然seb完全一致 ;SEB M 2 3第 2 3位天冬酰胺密码子AAT发生定向突变 ,即由丝氨酸密码子AGT替代 (N2 3S) ;SEB M1 5 0第1 5 0位氨基酸发生非定向突变 ,由苏氨酸密码子ACT突变为丙氨酸密码子GCT(T1 5 0A)。表达SEB M1 5 0和SEB M2 3的重组细菌裂解液经SDS PAGE ,在 2 80 0 0处可见有表达条带 ,非重组菌则无。单向免疫扩散试验和蛋白浓度测定表明 ,重组菌表达目的蛋白量为 5 μg/ml培养液 ,表达量占菌体总蛋白量的 3.5 %。 结论 获得了2株能表达SEB突变体的工程菌 。
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关键词
葡萄球菌肠毒素B
突变体
克隆
细菌超抗原
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Keywords
staphylococcal enterotoxin B
mutant
clone
expression
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分类号
R392.11
[医药卫生—免疫学]
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题名用合成肽为抗原检测戊型肝炎病毒IgG和IgM抗体
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作者
钱利生
闻玉梅
蒋伟伦
李雪萍
顾健人
曲淑敏
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机构
上海医科大学基础医学院微生物学教研室
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出处
《上海医科大学学报》
CSCD
1995年第5期350-354,共5页
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基金
上海市卫生局基金
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文摘
选择并合成戊型肝炎病毒（ＨＥＶ），ＯＲＦ（阅读框架）－１、ＯＲＦ－２及ＯＲＦ－３中的４个肽段。其中合成肽（ＳＰＢ３６）可用于酶联免疫吸附法检测戊型肝炎病毒的ＩｇＧ及ＩｇＭ抗体。对１３４份肝炎患者血清分别以重组抗原及ＳＰＢ３６抗原检测戊肝抗体ＩｇＧ，相对符合率为８５．１％。对比检测戊肝抗体ＩｇＭ（４４份），相对符合率为８８．６％。合成肽因结构组成明确，不需要特殊纯化，特异性较高，用于检测抗体有其优点。
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关键词
合成肽
戊型肝炎病毒
抗体
ELISA
免疫球蛋白
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Keywords
synthetic peptide,hepatitis E virus ELISA,antibody to hepatitis E virus
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分类号
R373.2
[医药卫生—病原生物学]
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