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海绵共生微生物研究中的分子技术 被引量：1
1
作者 胡叶 李志勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第6期56-61,共6页
海绵共生微生物与海绵活性物质有紧密的关系,由于其大多不可培养,分子生物学技术成为海绵微生物研究的有效方法。本文重点介绍了海绵共生微生物研究中经常应用到的FISH、PCR、16S rRNA克隆测序、DGGE、RFLP等各种分子技术,对它们的特点... 海绵共生微生物与海绵活性物质有紧密的关系,由于其大多不可培养,分子生物学技术成为海绵微生物研究的有效方法。本文重点介绍了海绵共生微生物研究中经常应用到的FISH、PCR、16S rRNA克隆测序、DGGE、RFLP等各种分子技术,对它们的特点及缺陷进行了分析与小结,希望有助于海绵共生微生物分子研究的进一步发展。 展开更多
关键词 分子技术 海绵 微生物
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海洋放线菌研究的新进展 被引量：19
2
作者 刘妍 李志勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第6期34-39,共6页
海洋放线菌由于其独特的代谢途径和合成新颖抗生素的能力,已经广泛引起人们的关注。本文就海洋放线菌在海洋环境中的分布、医药领域的应用及其相关研究方法进行了综述。
关键词 海洋放线菌 分布 抗生素 研究方法
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海绵及其共附生微生物的活性物质与化学防御 被引量：13
3
作者 黄奕 李志勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第1期13-17,共5页
海绵及其共附生微生物具有多种化学防御途径,具体表现在能够抵御潜在病原微生物、抗鱼类捕食、阻止污浊生物和降解表面活性剂等方面,这可能与海绵及其共附生微生物产生的活性物质有关。本文对海绵及其共附生微生物的化学防御进行讨论,... 海绵及其共附生微生物具有多种化学防御途径,具体表现在能够抵御潜在病原微生物、抗鱼类捕食、阻止污浊生物和降解表面活性剂等方面,这可能与海绵及其共附生微生物产生的活性物质有关。本文对海绵及其共附生微生物的化学防御进行讨论,希望对相关机制的揭示有所帮助。 展开更多
关键词 海绵 化学防御 活性物质
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海绵共附生微生物基因多态性的RAPD-PCR分析 被引量：1
4
作者 李志勇 秦恩昊 +1 位作者 何丽明 黄艳琴 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期15-20,共6页
采用传统分离手段对中国南海海域的细薄星芒海绵(Stellettatenui(Lindgren,1897))、皱皮软海绵(Halichondriarugosa(Ridley&Dendy))、澳大利亚厚皮海绵(Craniellaaustraliensis(Carter))、贪婪倔海绵(Dysideaavara(Schmidt))4种海... 采用传统分离手段对中国南海海域的细薄星芒海绵(Stellettatenui(Lindgren,1897))、皱皮软海绵(Halichondriarugosa(Ridley&Dendy))、澳大利亚厚皮海绵(Craniellaaustraliensis(Carter))、贪婪倔海绵(Dysideaavara(Schmidt))4种海绵体内的微生物进行了分离培养,随机挑选64株芽孢杆菌属细菌(每种海绵16株)进行了RAPD-PCR基因多态性分析。研究表明,一些海绵微生物是可以通过传统分离手段得到的,来自同一或者不同海绵的微生物均具有丰富的基因多态性。 展开更多
关键词 海绵 芽孢杆菌 RAPD-PCR 聚类分析
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仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.中的环二肽成分的分离和鉴定 被引量：7
5
作者 宫俊 汤华 +5 位作者 耿婉丽 刘宝姝 孙鹏 李玲 李志勇 张文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1284-1287,共4页
目的对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究。方法运用硅胶柱色谱、Seph-adex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波... 目的对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究。方法运用硅胶柱色谱、Seph-adex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱技术及与文献比对的基础上对其结构进行鉴定。结果共分离得到7个环二肽类化合物,分别鉴定为:环-(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(1)、环-(L-脯氨酸-L-甲硫氨酸)(2)、环-(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(3)、环-(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(4)、环-(L-脯氨酸-L-脯氨酸)(5)、环(L-缬氨酸-甘氨酸)(6)、环-(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(7)。结论本研究是对仿刺参共附生微生物次生代谢产物研究的首次报道,这7个化合物均为首次从放线菌Brevi-bacterium sp.中分离得到。 展开更多
关键词 海参 仿刺参 放线菌 环二肽
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海绵宏基因组文库构建及抗菌肽功能基因的初步筛选 被引量：11
6
作者 吴杰 李志勇 张戌升 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第3期95-98,103,共5页
宏基因组文库技术是利用未培养微生物基因资源的有效途径。成功构建澳大利亚厚皮海绵的Fosmid宏基因组文库,插入片段平均大小为36.8kb。利用建立的宏基因组文库,采用PCR技术初步筛选到具有编码抗菌肽的功能基因。这是我国首次尝试构建... 宏基因组文库技术是利用未培养微生物基因资源的有效途径。成功构建澳大利亚厚皮海绵的Fosmid宏基因组文库,插入片段平均大小为36.8kb。利用建立的宏基因组文库,采用PCR技术初步筛选到具有编码抗菌肽的功能基因。这是我国首次尝试构建海绵宏基因组文库,对于今后开发利用海绵丰富的基因资源具有重要的意义。 展开更多
关键词 澳大利亚厚皮海绵 宏基因组文库 抗菌肽 功能基因
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海绵共附生细菌种群组成的PCR-DGGE基因指纹分析 被引量：2
7
作者 李志勇 何丽明 蒋群 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第1期61-64,共4页
采用不依赖于分离培养的16S rDNA的PCR-DGGE基因指纹技术对我国南海的细薄星芒海绵、皱皮软海绵、贪婪倔海绵、澳大利亚厚皮海绵体内的优势细菌的种群组成进行了比较分析。结果显示:每种海绵体内都含有丰富多样的细菌;通过DGGE指纹图的... 采用不依赖于分离培养的16S rDNA的PCR-DGGE基因指纹技术对我国南海的细薄星芒海绵、皱皮软海绵、贪婪倔海绵、澳大利亚厚皮海绵体内的优势细菌的种群组成进行了比较分析。结果显示:每种海绵体内都含有丰富多样的细菌;通过DGGE指纹图的聚类分析发现来自同一海域的不同海绵的共附生细菌的种群组成具有明显不同,即共附生细菌具海绵宿主特异性;同时也发现有相同的细菌存在于不同的海绵体内。 展开更多
关键词 海绵 细菌种群 16S RDNA DGGE基因指纹图 聚类分析
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一株细薄星芒海绵细菌的抗菌活性与分类学研究 被引量：1
8
作者 李志勇 黄艳琴 +4 位作者 何丽明 花卉 胡叶 蒋群 郑学松 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第2期93-96,共4页
采用平板涂布法从我国南海细薄星芒海绵分离得到一株细菌A72,以大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞菌、黑曲霉、白假丝酵母、宛氏拟青霉7种指标菌对A72的抗菌活性进行了研究,同时采用形态学观察、生理生化分析与16... 采用平板涂布法从我国南海细薄星芒海绵分离得到一株细菌A72,以大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞菌、黑曲霉、白假丝酵母、宛氏拟青霉7种指标菌对A72的抗菌活性进行了研究,同时采用形态学观察、生理生化分析与16S rDNA同源性与系统发育分析进行种属鉴定。研究发现A72对于枯草芽孢杆菌等具有显著的活性,初步确认A72为粪产碱杆菌。 展开更多
关键词 细薄星芒海绵 细菌 抗菌活性 16S RDNA序列分析
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具有多重酶活性的澳大利亚厚皮海绵共附生放线菌的研究 被引量：3
9
作者 刘妍 李志勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第5期121-125,共5页
从我国南海澳大利亚厚皮海绵分离得到23株放线菌,并对其蛋白酶、琼胶酶、纤维素酶、几丁质酶和酯酶活性进行了筛选,同时基于16S rDNA序列信息对放线菌进行了分子鉴定。研究发现23株放线菌全部具有较强的生物酶活性,其中21株放线菌具有至... 从我国南海澳大利亚厚皮海绵分离得到23株放线菌,并对其蛋白酶、琼胶酶、纤维素酶、几丁质酶和酯酶活性进行了筛选,同时基于16S rDNA序列信息对放线菌进行了分子鉴定。研究发现23株放线菌全部具有较强的生物酶活性,其中21株放线菌具有至少3种以上的酶活性,17株具有除酯酶活性以外的4种酶活性。通过序列比对与系统发育分析证实12株放线菌属于链霉菌属(Streptomyces)。这些分离自海绵具有多重生物酶活性的放线菌具有较大的潜在应用价值。 展开更多
关键词 澳大利亚厚皮海绵 放线菌 酶活 16S RDNA 系统发育分析
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细薄星芒海绵总萜烯的制备及Stellettin B和Stellettin D的含量测定 被引量：1
10
作者 熊巍 王增蕾 +3 位作者 林厚文 李志勇 童耕雷 陈万生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期787-789,共3页
目的：建立测定细薄星芒海绵Stelletta tenuis Lindgren总萜烯提取物中Stellettin B和D含量的方法。方法：采用HPLC—DAD方法。色谱条件为YMCPack—SIL分析柱（250min×4．6mm，5μm）；流动相为正己烷：乙酸乙酯（75：25），分析时... 目的：建立测定细薄星芒海绵Stelletta tenuis Lindgren总萜烯提取物中Stellettin B和D含量的方法。方法：采用HPLC—DAD方法。色谱条件为YMCPack—SIL分析柱（250min×4．6mm，5μm）；流动相为正己烷：乙酸乙酯（75：25），分析时间30min，流速1．0ml·min^-1；检测波长：360nm；柱温：室温；进样量：20μl。结果：线性回归方程为Stellettin B：Y=52181633X＋957495（r=0．9969），线性范围为2．4～30μg；Stellettin D：Y：62636828X-451022（r=0．9980），线性范围为2．O～32μg。精密度、稳定性和重现性试验的RSD在3．07％～4．76％之间。10批细薄星芒海绵总萜烯中Stellettin B和Stellettin D的平均含量分别为59．93％（RSD=4．48％）和30．98％（RSD=2．97％）。结论：该法为测定细薄星芒海绵总萜烯中有效成分提供了快速、准确、有效的方法。 展开更多
关键词 细薄星芒海绵 总萜烯 色谱法 高效液相
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