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量子点标记与绿色荧光素标记对survivin反义寡核苷酸生物功能影响的比较 被引量:2
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作者 姚航 黄宗海 +3 位作者 厉周 贺蓉 高峰 崔大祥 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期663-666,共4页
目的观察量子点和绿色荧光素分别标记的survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染人乳腺癌细胞株MCF-7后,在标记存在时间、survivin的表达及细胞增殖、凋亡方面有无差异。方法将量子点和绿色荧光素分别标记的survivin ASODN通过脂质体转染MCF-7,... 目的观察量子点和绿色荧光素分别标记的survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染人乳腺癌细胞株MCF-7后,在标记存在时间、survivin的表达及细胞增殖、凋亡方面有无差异。方法将量子点和绿色荧光素分别标记的survivin ASODN通过脂质体转染MCF-7,MTT法检测细胞生长抑制率,RT-PCR检测survivin mRNA,Western blot检测survivin蛋白表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率变化,荧光倒置显微镜观察细胞内荧光物质分布。结果量子点与绿色荧光素分别标记的survivin ASODN作用MCF-7后,survivin mRNA和survivin蛋白表达均下降,但两者间无显著差异(P>0.05)。两者细胞生长抑制率、凋亡率间无显著差异(P>0.05)。转染后4d绿色荧光素标记组细胞内荧光消失,而量子点标记组荧光1周仍存在。结论量子点标记survivin ASODN与绿色荧光素标记比较,对survivin的表达及细胞增殖、凋亡方面无差异,而标记更稳定,存在时间更长。 展开更多
关键词 量子点 绿色荧光素 乳腺肿瘤survivin基因 反义寡核苷酸
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聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸抑制结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 被引量:3
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作者 厉周 黄宗海 +5 位作者 崔大祥 姚航 俞金龙 李强 潘碧峰 高峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1935-1938,共4页
目的探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-A... 目的探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-ASODN混合得到载反义基因转染复合物。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果PAMAM-survivin-ASODN复合物的粒径小于脂质体-survivinASODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-ASODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组无显著差异。PAMAM对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。结论PAMAM能将survivin-ASODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长。 展开更多
关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物 结直肠癌 反义寡核苷酸 SURVIVIN
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聚酰胺树形分子-脂质体介导survivin反义寡核苷酸诱导肝癌细胞的凋亡
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作者 厉周 方素珍 +5 位作者 韩帅 崔大祥 李强 蔡寨 朱卉娟 黄宗海 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期408-413,共6页
目的:评价聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)-脂质体复合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligonucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性,及其对人肝癌SMMC-7721细胞survivin表达、细胞凋亡的影... 目的:评价聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)-脂质体复合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligonucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性,及其对人肝癌SMMC-7721细胞survivin表达、细胞凋亡的影响。方法:制备PAMAM与脂质体的复合物(PAMAM-脂质体),将survivin-asODN与PAMAM-脂质体或PAMAM混合,分别制备PAMAM-脂质体-survivin-asODN和PAMAM-survivin-asODN。透射电镜观察复合物的形态、粒径;zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位;离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率。将PAMAM-脂质体-survivin-asODN和PAM-AM-survivin-asODN转染SMMC-7721细胞,测定其转染率;Western blotting检测转染后SMMC-7721细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测SMMC-7721细胞的凋亡。结果:成功制备PAMAM-脂质体、PAMAM-脂质体-survivin-asODN和PAMAM-survivin-asODN。PAMAM-脂质体-survivin-asODN粒径与PAMAM-survivin-asODN粒径无显著差异[(189.33±15.42)vs(181.83±13.67)nm,P>0.05],包封率和载药率也无显著差异(P>0.05),但zeta电位高于后者[(42.83±7.14)vs(32.33±5.57)mV,P<0.05],PAMAM-脂质体-survivin-asODN转染SMMC-7721细胞的效率高于PAMAM-survivin-asODN[(73.33±9.29)%vs(60.67±7.81)%,P<0.05],转染后SMMC-7721细胞中survivin蛋白的表达较低(24.67±11.74 vs43.17±11.63,P<0.05),但细胞凋亡率高于PAMAM-survivin-asODN组SMMC-7721细胞[(73.31±12.59)%vs(52.67±12.19)%,P<0.05]。结论:PAMAM-脂质体能将survivin-asODN高效递送到人肝癌SMMC-7721细胞,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物-脂质体 反义寡核苷酸 肝癌 SURVIVIN
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聚酰胺树形分子递送survivin反义脱氧寡核苷酸抑制裸鼠肝癌移植瘤 被引量:4
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作者 姚航 岳隧岩 +3 位作者 金跃明 潘碧峰 高峰 崔大祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第1期36-40,共5页
目的:探讨聚酰胺-胺型(polyamidoamine,PAMAM)树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)对肝癌裸鼠移植瘤及其微血管形成的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射... 目的:探讨聚酰胺-胺型(polyamidoamine,PAMAM)树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)对肝癌裸鼠移植瘤及其微血管形成的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立肝癌裸鼠皮下移植瘤模型。将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-asODN混合得到载反义基因复合物,透射电镜观察复合物的形态、粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物分别注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小;免疫组化方法检测瘤组织中微血管密度(microvesseldensity,MVD);Westernblotting检测移植瘤组织中survivin蛋白的表达。结果:PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.6)vs(193.9±32.2)nm,P<0.01],而zeta电位高于脂质体-survivin-asODN复合物[(37.7±3.8)vs(22.6±2.2)mV,P<0.05];基因包封率两组比较无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组裸鼠移植瘤组织survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(26.8±5.6)vs(37.0±5.9),P<0.05];PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组移植瘤重量低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(124.8±25.2)vs(210.2±33.6)mg,P<0.05],其微血管密度低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(2.8±1.5)vs(6.4±2.7),P<0.05]。结论:PAMAM能将survivin-asODN高效递送到肝癌移植瘤细胞,降低瘤组织中survivin蛋白的表达,可通过抑制移植瘤微血管的形成来抑制癌细胞的生长。 展开更多
关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物 SURVIVIN 反义脱氧寡核苷酸 肝癌 抗微血管形成
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Survivin反义寡核苷酸树形分子载体的构建及其对肝癌细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 姚航 岳隧岩 +3 位作者 金跃明 潘碧峰 高峰 崔大祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第6期540-544,共5页
目的:研究聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性以及对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法:将200μg/Lsurvivin-asODN... 目的:研究聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性以及对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法:将200μg/Lsurvivin-asODN和3.66μg/L PAMAM混合制备PAMAM反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照。透射电镜观察复合物的形态、粒径,Zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度。将上述两种基因载体复合物转染肝癌SMMC-7721细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后肿瘤细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率。结果:成功制备PAMAM反义基因载体系统PAMAM-survivin-asODN。该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.60)vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],但zeta电位高于后者[(37.7±3.80)vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];两者基因载药率、包封率无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d。PAMAM-survivin-asODN转染肝癌细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05)。转染后肝癌细胞siurvivin蛋白的表达显著低于脂质体复合物[(26.80±5.65)vs(36.96±5.89),P<0.05],该细胞的凋亡率显著高于脂质体复合物转染细胞[(60.3±8.25)%vs(48.7±9.39)%,P<0.05]。结论:PAMAM作为载体系统能将survivin-asODN高效递送到肝癌SMMC-7221细胞,诱导人肝癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 聚酰胺树形分子高聚合物 反义寡核苷酸 SURVIVIN基因 肝癌 凋亡
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