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亚硝酸盐对焦酚红法检测24 h尿液总蛋白的干扰分析
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作者 杨帆 董丹风 +1 位作者 苏同轩 陆怡德 《临床检验杂志》 CAS 2024年第4期241-245,共5页
目的探讨亚硝酸盐对于焦酚红法检测24 h尿液总蛋白的干扰效应,并评估维生素C纠正干扰的可行性。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP7-A3文件,选取24 h尿液总蛋白定量结果为150 mg/L、500 mg/L和1000 mg/L的新鲜尿液标本作为对照... 目的探讨亚硝酸盐对于焦酚红法检测24 h尿液总蛋白的干扰效应,并评估维生素C纠正干扰的可行性。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP7-A3文件,选取24 h尿液总蛋白定量结果为150 mg/L、500 mg/L和1000 mg/L的新鲜尿液标本作为对照样本,并配制含不同浓度亚硝酸钠的干扰物样本。利用配对差异实验确认亚硝酸盐的干扰作用,并通过剂量效应实验明确亚硝酸盐浓度与干扰程度的关系。在终浓度为200μg/mL亚硝酸钠存在的情况下,评估不同浓度维生素C纠正干扰的效果。同时收集61例亚硝酸盐阳性和40例亚硝酸盐阴性的临床标本,比较两组标本维生素C纠正前后的相对差值,评估其临床应用价值。结果配对差异实验中200μg/mL亚硝酸钠对150 mg/L和500 mg/L两个浓度的尿总蛋白测定分别存在-157.8%和-36.2%的相对干扰,显著大于1/2TEa(22%),而对于高浓度1000 mg/L的尿总蛋白虽存在-20.5%的负干扰,但在可接受范围内。剂量效应实验结果显示随着尿液中亚硝酸盐浓度的增加,尿总蛋白检测所受负干扰作用亦逐渐增大。在终浓度为200μg/mL亚硝酸钠存在的情况下,添加0.2 mg/mL的维生素C可分别将150 mg/L和500 mg/L的尿总蛋白纠正至148 mg/L(-1.1%)和402 mg/L(-19.5%),均处于可接受范围内。临床标本中亚硝酸盐阳性组通过维生素C纠正产生的相对差值显著高于亚硝酸盐阴性组(P<0.01)。结论亚硝酸盐对于焦酚红法检测尿液总蛋白存在负干扰,尤其是在尿总蛋白150 mg/L情况下,需引起临床实验室的关注。添加0.2 mg/mL维生素C可有效纠正低浓度尿总蛋白标本中亚硝酸盐的干扰作用,具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 24 h尿总蛋白 亚硝酸盐 干扰分析 维生素C 纠正试验
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TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中差异表达基因的筛选及生物学功能分析
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作者 陆盈 孙顺昌 《山东医药》 CAS 2024年第9期10-13,共4页
目的筛选TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中的差异表达基因并进行生物学功能分析,探讨TMEM206基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备TMEM206基因敲除小鼠,并通过配殖获得TMEM206基因敲除纯合小鼠。选取3只8周龄雌性TMEM206基因... 目的筛选TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中的差异表达基因并进行生物学功能分析,探讨TMEM206基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备TMEM206基因敲除小鼠,并通过配殖获得TMEM206基因敲除纯合小鼠。选取3只8周龄雌性TMEM206基因敲除纯合小鼠和3只同窝雌性野生小鼠,分离小脑组织并提取总RNA,转录组测序后,使用Cuffdiff(v2.2.1)软件的EBseq算法筛选差异表达基因,并使用DAVID数据库对差异表达基因进行基因属性(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共筛选出474个差异表达基因,与正常小脑组织相比,TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中上调的基因265个、下调的基因209个。GO功能分析结果显示,差异表达基因的表达产物定位于细胞外膜和主要组织相容性复合体Ⅰ类蛋白(MHCⅠ)较多,功能属性主要归类于结合转录因子、脂类分子及抗原分子等;差异表达基因参与的生物学过程众多,如DNA损伤的细胞反应、细胞分化选择、骨质矿化等。KEGG通路富集分析结果显示,差异表达基因在分子属性上多为细胞黏附分子和肿瘤坏死因子路径的分子,功能上主要与细胞吞噬和衰老有关,此外还与人乳头瘤病毒、Ⅰ型人类T淋巴细胞白血病病毒、单纯疱疹病毒、Ⅷ型人疱疹病毒及EB病毒等感染有关。结论TMEM206基因敲除后,小鼠小脑组织中筛选得到474个差异表达基因,差异表达基因与维持细胞外膜结构稳定、细胞黏附、病毒感染有关。 展开更多
关键词 TMEM206基因 小脑组织 转录组测序
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血栓弹力图的临床应用评价 被引量:36
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作者 王学锋 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第12期887-891,共5页
血栓弹力图(thromboelastograph,TEG)是描述因纤维蛋白聚合而导致血液粘弹性(viscoelasticity,VE)变化而产生的图形,通过监测凝血全过程整体评价凝血功能。自1948年德国人Hellmut Harter首次报道以来,TEG已成功应用于对患者出凝血状态... 血栓弹力图(thromboelastograph,TEG)是描述因纤维蛋白聚合而导致血液粘弹性(viscoelasticity,VE)变化而产生的图形,通过监测凝血全过程整体评价凝血功能。自1948年德国人Hellmut Harter首次报道以来,TEG已成功应用于对患者出凝血状态的评估。近年来,TEG除用于指导手术中成分输血外,还广泛应用于检测凝血功能障碍和监测抗栓治疗等。 展开更多
关键词 血栓弹力图 出血 凝血 血栓 围手术期 肝移植 脓毒症
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人近端肾小管上皮细胞黏附分子CD_(146)表达对细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 吴乔木 汪年松 +3 位作者 倪培华 王锋 范瑛 吴恒兰 《中国中西医结合肾病杂志》 2009年第5期396-399,共4页
目的:探讨人近端肾小管上皮细胞(HK-2)黏附分子CD146表达与细胞凋亡的关系。方法:体外培养的HK-2细胞在不同浓度葡萄糖和不同浓度甘露醇刺激下分别作用24h、48h、72h,经流式细胞仪(FCM)检测各组HK-2细胞CD146的表达和凋亡率的变化。结果... 目的:探讨人近端肾小管上皮细胞(HK-2)黏附分子CD146表达与细胞凋亡的关系。方法:体外培养的HK-2细胞在不同浓度葡萄糖和不同浓度甘露醇刺激下分别作用24h、48h、72h,经流式细胞仪(FCM)检测各组HK-2细胞CD146的表达和凋亡率的变化。结果:正常糖浓度下HK-2微弱表达CD146,且延长作用时间对表达无影响;随糖浓度升高,CD146表达上调,细胞凋亡率也增高,延长刺激时间可促进CD146表达和细胞凋亡(P<0.05);当糖浓度达到40mmol/L,刺激时间达到48h,CD146表达显著升高(P<0.05),HK-2细胞凋亡率也显著上升(P<0.05);甘露醇对HK-2细胞CD146表达和细胞凋亡的促进作用较葡萄糖的作用显著降低(P<0.01)。结论:HK-2组成性表达CD146,高糖诱导CD146表达,甘露醇诱导作用较高糖弱;高糖诱导HK-2凋亡,其凋亡作用与CD146表达增高联系密切,提示黏附分子CD146对细胞生存有重要影响。 展开更多
关键词 黏附分子 葡萄糖 甘露醇 人肾小管上皮细胞
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应重视血栓与出血的实验检测 被引量:2
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作者 王学锋 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第12期884-886,共3页
国内实验室目前常规开展的血栓与出血检测项目,多数是基于纤维蛋白形成为终点的检测,对于不同出血病和血栓病诊断的敏感性和特异性有较大差异。血管性血友病因子(v WF)抗原、凝血因子Ⅷ活性、瑞斯托霉辅因子活性的检测可以诊断多数的v ... 国内实验室目前常规开展的血栓与出血检测项目,多数是基于纤维蛋白形成为终点的检测,对于不同出血病和血栓病诊断的敏感性和特异性有较大差异。血管性血友病因子(v WF)抗原、凝血因子Ⅷ活性、瑞斯托霉辅因子活性的检测可以诊断多数的v WD,但精确分型还需结合其他试验加以诊断和鉴别诊断。在凝血因子制剂替代治疗、华法林等药物抗凝治疗、溶栓治疗等方面,实验室检测可以判断药物治疗无效和药物拮抗过度。通过对遗传性出血病或血栓病先证者实施基因检测可以对家族中的疾病发生情况进行筛查。血栓与出血的实验检测可以为血栓病和出血病的诊断、疗效监测、个体化治疗及转化医学研究提供重要依据。 展开更多
关键词 血栓病 出血病 血管性血友病 凝血因子缺乏 抗凝蛋白缺陷 纤溶系统亢进
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黏附分子CD_(146)在人脐静脉内皮细胞的表达
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作者 吴恒兰 汪年松 +3 位作者 倪培华 吴乔木 王锋 范瑛 《中国中西医结合肾病杂志》 2009年第4期303-306,I0003,共5页
目的:观察正常人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上黏附分子CD146的表达及其表达部位,初步探讨CD146与内皮细胞的关系及其生理意义。方法:体外培养的HUVECs连续观察72h,分别收集培养24h、48h、72h细胞,用反转录-聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测CD1... 目的:观察正常人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上黏附分子CD146的表达及其表达部位,初步探讨CD146与内皮细胞的关系及其生理意义。方法:体外培养的HUVECs连续观察72h,分别收集培养24h、48h、72h细胞,用反转录-聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测CD146mRNA的表达;流式细胞仪和免疫荧光法测定CD146蛋白质的表达及其定位。结果:(1)CD146mRNA水平的表达:HUVECs在培养早期(24h)即表达CD146mRNA(0.27±0.0274),但延长细胞的培养时间似乎并没有进一步改变CD146mRNA的表达水平(0.31±0.0466,0.35±0.0249,P>0.05)。(2)CD146蛋白质水平的表达和定位:流式细胞仪检测显示CD146单抗-FITC阳性标记于36.78%的HUVECs,平均荧光强度为45.54;免疫荧光提示CD146主要表达于HUVECs细胞膜上,而在细胞核和胞浆中也有少量表达。体外培养的HUVECs相互融合时,位于细胞膜上的CD146表达增强,呈线性、连续性地表达于细胞-细胞间的连接部位。结论:体外培养的HUVECs连续性的表达黏附分子CD146,主要位于细胞膜上,胞核及胞浆亦有少量表达;CD146在细胞内外的表达强度有赖于细胞间联系的建立和细胞增殖的程度,CD146在促进细胞生长和维持组织完整性等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 CD146 细胞黏附分子 人脐静脉内皮细胞
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1例遗传性异常纤维蛋白原血症的鉴定及分子发病机制研究 被引量:8
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作者 黄丹丹 蔡挺 +5 位作者 张顺 黄左安 郭莳雨 丁秋兰 戴菁 王学锋 《临床检验杂志》 CAS 2019年第9期675-679,共5页
目的对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型、基因型分析,并研究其致病机制。方法采集先证者及其父母的外周血并进行常规出凝血、血浆纤维蛋白原(Fib)活性和抗原检测。对Fib的基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行PCR扩... 目的对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型、基因型分析,并研究其致病机制。方法采集先证者及其父母的外周血并进行常规出凝血、血浆纤维蛋白原(Fib)活性和抗原检测。对Fib的基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行PCR扩增及测序。采用Fib凝固率测定、纤维蛋白聚集曲线和电镜扫描纤维蛋白凝块等方法研究其致病机制。结果先证者活化部分凝血酶原时间、凝血酶原时间正常,凝血酶时间延长,Fib抗原正常、活性降低;其父亲表型与之相似。先证者及其父亲FGA基因第2外显子均存在A1211G杂合碱基置换,导致Fibα链Arg19Gly错义突变。western-blot检测显示,先证者及其父亲血浆Fib无异常条带出现。先证者血浆Fib凝固率为20.8%,凝血酶或爬虫酶诱导的聚集曲线严重受损,纤维蛋白凝块的纤丝直径大于健康人对照(P<0.001),密度小于健康人对照。结论鉴定该病例为遗传性异常纤维蛋白原血症,Fibα链Arg19Gly杂合错义突变导致Fib功能受损,为该病例及相应临床症状的原因。 展开更多
关键词 遗传性异常纤维蛋白原血症 纤维蛋白原 基因突变
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