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静电喷雾法制备微胶囊化乳酸菌及其储存稳定性的研究 被引量:5
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作者 冯琼 李保国 +2 位作者 刘畅 张灼阳 郭晓奎 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期54-57,共4页
采用微孔淀粉吸附乳酸菌,以海藻酸钠和明胶的混合体系为壁材,对其进行静电喷雾包埋,并在模拟胃肠液环境中进行耐酸性和肠溶性实验。得出用6%的微孔淀粉吸附乳酸菌,活菌数最高,当芯壁材比为1∶3时包埋率为85.88%,微胶囊化乳酸菌在经人工... 采用微孔淀粉吸附乳酸菌,以海藻酸钠和明胶的混合体系为壁材,对其进行静电喷雾包埋,并在模拟胃肠液环境中进行耐酸性和肠溶性实验。得出用6%的微孔淀粉吸附乳酸菌,活菌数最高,当芯壁材比为1∶3时包埋率为85.88%,微胶囊化乳酸菌在经人工胃液处理2 h后,活菌数比未经微胶囊化的对照组高出2个数量级;经人工肠液处理40 min后,乳酸菌可全部释放。微胶囊化乳酸菌饮料在4℃冰箱储藏4 w后,其活菌数仅是在同一数量级上有少许下降,而对照组未经包埋的乳酸菌和市售乳酸菌饮料下降了约2个数量级,经微胶囊化的乳酸菌具有较好的储存稳定性。 展开更多
关键词 乳酸菌 微胶囊 静电喷雾 微孔淀粉 储存稳定性
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酵母双杂交技术筛选与CVB3 VP1直接作用的细胞蛋白 被引量:4
2
作者 刘发娣 余克花 +5 位作者 罗达亚 徐秋芳 莫冰 罗军 刘晶星 黄孝天 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期991-995,共5页
目的以CVB3VP1为诱饵蛋白,筛选与CVB3VP1直接作用的人心脏cDNA文库基因,并对阳性cDNA克隆进行初步分析和鉴定。方法酵母双杂交技术筛选人心脏cDNA文库;经阳性克隆的表型确定、PCR扩增cDNA插入片段和Alu I酶切等试验将阳性克隆归类,并进... 目的以CVB3VP1为诱饵蛋白,筛选与CVB3VP1直接作用的人心脏cDNA文库基因,并对阳性cDNA克隆进行初步分析和鉴定。方法酵母双杂交技术筛选人心脏cDNA文库;经阳性克隆的表型确定、PCR扩增cDNA插入片段和Alu I酶切等试验将阳性克隆归类,并进行测序和同源性比对分析;α-半乳糖苷酶活性定量分析VP1与各阳性蛋白之间相互作用的强弱。结果在人心脏cDNA文库中筛选到5个阳性克隆,分别为:MNAT1(CAK装配因子),GOLGA2(高尔基体基质蛋白GM130),PHR1(视网膜PH结构域蛋白1),LDB1(LI M结构域结合蛋白1),NADH脱氢酶亚单位4。将筛选的GOLGA2cDNA新序列提交给NCBI GenBank数据库,获得Accession Number:AY823636;α-半乳糖苷酶定量分析试验进一步证明了MNAT1、GOLGA2、PHR1和LDB1等4个基因与VP1均有较强的相互作用。结论本研究成功地运用了酵母双杂交技术,以CVB3VP1为诱饵蛋白,从人心脏cDNA文库中获得5种不同类别的阳性基因:MNAT1、GOLGA2、PHR1、LDB1和NADH脱氢酶亚单位4。 展开更多
关键词 酵母双杂交 柯萨奇病毒 CVB3 VP1
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问号钩端螺旋体赖株基因组中一个新溶血基因的表达及功能鉴定 被引量:3
3
作者 杨杨 秦金红 +4 位作者 杨宏亮 钟怡 何平 胡宝瑜 郭晓奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期462-465,共4页
目的对问号钩端螺旋体赖株基因组中LA0202基因进行克隆表达并对重组蛋白的溶血活性进行初步鉴定。方法以问号钩端螺旋体赖株基因组DNA为模板,PCR扩增LA0202基因并重组到原核表达载体pET28b(+),重组质粒经限制性核酸内切酶酶切并经测序... 目的对问号钩端螺旋体赖株基因组中LA0202基因进行克隆表达并对重组蛋白的溶血活性进行初步鉴定。方法以问号钩端螺旋体赖株基因组DNA为模板,PCR扩增LA0202基因并重组到原核表达载体pET28b(+),重组质粒经限制性核酸内切酶酶切并经测序鉴定后,在大肠埃希菌BL21中诱导表达重组蛋白。制备绵羊血平板对表达的重组蛋白进行溶血活性鉴定。RT-PCR检测钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因的转录。结果在大肠埃希菌中成功表达LA0202基因,表达的重组蛋白具有溶血活性。RT-PCR结果显示钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因发生了转录。结论问号钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因发生了转录,LA0202可能为一个新的溶血素基因。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体 溶血活性 溶血素基因 蛋白表达
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CAR的表达调节对肝癌基因治疗中腺病毒载体感染效率的影响 被引量:2
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作者 吴赟 郑辉 +3 位作者 陈宏新 黄孝天 沈佐君 刘晶星 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第3期205-209,共5页
目的:通过抑制Raf-MEK-ERK信号转导途径调节肝癌细胞表面柯萨奇病毒和腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor,CAR)的表达,探索肝癌基因治疗中CAR表达与腺病毒(adenovirus,Ad)感染效率之间的关系。方法:选择两株人肝癌细胞株SMMC-772... 目的:通过抑制Raf-MEK-ERK信号转导途径调节肝癌细胞表面柯萨奇病毒和腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor,CAR)的表达,探索肝癌基因治疗中CAR表达与腺病毒(adenovirus,Ad)感染效率之间的关系。方法:选择两株人肝癌细胞株SMMC-7721及HepG2,以Raf-MEK-ERK信号转导抑制剂U0126作用后,应用Western blotting检测细胞表面CAR蛋白的表达水平。选用能表达GFP的非复制型E_1A缺陷的Ad感染人肝癌细胞SMMC-7721及HepG_2,应用FACS分析U0126处理前后Ad感染效率的变化。结果:细胞经MEK抑制剂U0126处理后,细胞膜表面CAR的表达呈明显上调趋势。FACS检测显示,经U0126处理后,在相同感染复数(10 MOI)Ad-GFP的感染下,GFP^+细胞率明显升高,SMMC-7721细胞由(71.65±6.21)%上升至(86.54±5.70)%;HepG_2细胞由(77.53±4.62)%上升至(87.06±2.83)%(均P<0.05)。结论:抑制剂U0126抑制Raf-MEK-ERK信号转导途径后,可上调肝癌细胞膜表面CAR的表达,从而导致Ad在肝癌细胞感染效率的提高。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒和腺病毒受体 U0126 腺病毒 感染效率 肝细胞癌 基因治疗
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脓毒症中的细胞凋亡 被引量:4
5
作者 张彦 姜叙诚 郭晓奎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2068-2072,共5页
Immune cells that undergo increased apoptosis include lymphocytes and macrophages,yet the apoptosis of neutrophils is decreased in sepsis.Increase in apoptosis has also been reported in non-immune cells such as gastro... Immune cells that undergo increased apoptosis include lymphocytes and macrophages,yet the apoptosis of neutrophils is decreased in sepsis.Increase in apoptosis has also been reported in non-immune cells such as gastrointestinal cells,epithelial cells of lung as well as endothelial cells.The altered apoptotic cell death may contribute to the initiation and aggravation of immune and organ dysfunction in sepsis.Elucidating the changes and mechanism of apoptosis and taking measures to control apoptosis may be an effective strategy for the treatment of sepsis. 展开更多
关键词 脓毒症 细胞凋亡 细胞因子类
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LA0301为一新的定位于钩端螺旋体外膜的蛋白 被引量:1
6
作者 赖卫强 赵蔚 +5 位作者 陈春燕 杨宏亮 林玮 肖家祁 郭晓奎 秦金红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期795-798,共4页
目的研究LA0301在钩端螺旋体中的膜定位。方法运用Triton X-114抽提分离钩端螺旋体膜蛋白,以LA0301抗体为一抗进行Western blot。结果Western blot表明,LA0301位于有机相。结论LA0301为定位钩端螺旋体外膜的蛋白,这为开发研究LA0301为... 目的研究LA0301在钩端螺旋体中的膜定位。方法运用Triton X-114抽提分离钩端螺旋体膜蛋白,以LA0301抗体为一抗进行Western blot。结果Western blot表明,LA0301位于有机相。结论LA0301为定位钩端螺旋体外膜的蛋白,这为开发研究LA0301为钩端螺旋体疫苗候选基因打下了基础。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 LA0301 膜暴露蛋白
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问号钩端螺旋体胶原酶在钩体病豚鼠模型的肺组织中的表达 被引量:1
7
作者 徐静 李文俊 +6 位作者 杨宏亮 郑林 胡宝瑜 傅爱芬 赵伶兹 郭晓奎 姜叙诚 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期647-651,共5页
目的通过克隆、表达问号钩端螺旋体赖型赖株的胶原酶基因colA(LA0872),以及制备抗胶原酶的多克隆抗体,观察胶原酶在钩体病豚鼠模型的组织中的表达,为研究其致病机制奠定基础。方法以问号钩端螺旋体赖型赖株基因组DNA为模板,用PCR扩增co... 目的通过克隆、表达问号钩端螺旋体赖型赖株的胶原酶基因colA(LA0872),以及制备抗胶原酶的多克隆抗体,观察胶原酶在钩体病豚鼠模型的组织中的表达,为研究其致病机制奠定基础。方法以问号钩端螺旋体赖型赖株基因组DNA为模板,用PCR扩增colA,产物克隆到表达载体pET-28b(+)中,构建含colA的重组质粒;将重组质粒转入E.coli Rosetta(DE3)菌株内,IPTG诱导表达后用Ni-NTA His-Bind亲和层析柱纯化重组蛋白;用纯化的重组蛋白免疫家兔制备抗胶原酶的多克隆抗体;Max Vision二步法染色检测胶原酶在感染钩端螺旋体的豚鼠肺组织中的分布。结果克隆表达目的基因,并成功制备了抗胶原酶的多克隆抗体。免疫组化显示在出血的肺组织中存在胶原酶。结论钩体病豚鼠模型的肺组织中有胶原酶的表达,并且存在于有钩端螺旋体分布的部位。本研究为进一步探讨胶原酶在钩端螺旋体侵袭和宿主组织出血中所起的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体 胶原酶 致病机制
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不同毒力钩端螺旋体引起的细胞因子表达的差异 被引量:1
8
作者 汤道强 张云怡 +6 位作者 张彦 张湘燕 胡宝瑜 傅爱芬 赵伶兹 郭晓奎 姜叙诚 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期811-815,共5页
目的通过比较不同毒力钩端螺旋体引起豚鼠细胞因子表达的差异,探讨钩端螺旋体病的炎症反应及其发病机制。方法豚鼠腹腔内分别注射致病性钩端螺旋体赖型有毒株Lai株,赖型无毒株IPAV株,以及非致病性钩端螺旋体Patoc型Patoc1株,观察豚鼠各... 目的通过比较不同毒力钩端螺旋体引起豚鼠细胞因子表达的差异,探讨钩端螺旋体病的炎症反应及其发病机制。方法豚鼠腹腔内分别注射致病性钩端螺旋体赖型有毒株Lai株,赖型无毒株IPAV株,以及非致病性钩端螺旋体Patoc型Patoc1株,观察豚鼠各脏器的病理改变;EnVision二步法检测钩端螺旋体在各脏器中的分布;应用Real-ti me RT-PCR法检测豚鼠血液中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1mRNA的表达。结果钩端螺旋体IPAV株和Patoc1株不能引起豚鼠组织病变,但是在感染早期引起细胞因子的高表达;而Lai株可以引起典型的钩端螺旋体病病变,但是在感染早期引起细胞因子较低表达。结论致病性钩端螺旋体赖型毒力株Lai株引起的细胞因子的表达明显低于非致病钩端螺旋体Patoc型Pa-toc1株和赖型无毒株IPAV株,可能与钩端螺旋体病炎症反应轻微有关,有利于钩端螺旋体逃避宿主的免疫反应,在体内繁殖扩散。 展开更多
关键词 钩端螺旋体病 炎症反应 细胞因子 发病机制
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LA0202为钩端螺旋体中一孔形成溶血素蛋白(英文)
9
作者 杨杨 秦金红 +3 位作者 钟怡 何平 胡宝瑜 郭晓奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期831-836,共6页
目的研究LA0202为孔形成溶血素。方法体外克隆表达LA0202蛋白。纯化的LA0202蛋白作用绵羊血细胞观察LA0202的溶血活性并用渗透压保护剂PEG6000添加到作用体系研究渗透压保护剂对LA0202溶血活性的影响。透射电镜及扫描电镜观察LA0202作... 目的研究LA0202为孔形成溶血素。方法体外克隆表达LA0202蛋白。纯化的LA0202蛋白作用绵羊血细胞观察LA0202的溶血活性并用渗透压保护剂PEG6000添加到作用体系研究渗透压保护剂对LA0202溶血活性的影响。透射电镜及扫描电镜观察LA0202作用于体外培养的肝细胞后对细胞的毒性。结果渗透压保护剂PEG6000能够抑制LA0202的溶血活性。LA0202作用于肝细胞后引起肝细胞的毒性损伤。结论LA0202为一孔形成溶血素。 展开更多
关键词 溶血素 钩端螺旋体 蛋白 PEG6000 溶血活性 扫描电镜观察 细胞观察 体外培养
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钩端螺旋体基因组研究进展
10
作者 娄晓丽 蔡成松 +1 位作者 张彦 郭晓奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期902-906,共5页
关键词 钩端螺旋体 基因组时代 人兽共患病 基因组测序 临床表现 感冒症状 病理机制 测序技术
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问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202的溶血机制
11
作者 杨杨 钟怡 +3 位作者 何平 胡宝瑜 郭晓奎 秦金红 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期519-522,共4页
目的对问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202的溶血机制进行研究。方法纯化重组蛋白LA0202并制备多克隆抗体;Western blot验证重组蛋白在问号钩端螺旋体培养过程中的表达;并进行重组蛋白LA0202溶血活性影响因素实验。结果Western blot显... 目的对问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202的溶血机制进行研究。方法纯化重组蛋白LA0202并制备多克隆抗体;Western blot验证重组蛋白在问号钩端螺旋体培养过程中的表达;并进行重组蛋白LA0202溶血活性影响因素实验。结果Western blot显示LA0202在钩体培养过程中可以表达,加入二价金属阳离子对重组蛋白溶血活性亦无明显激活作用,加入蛋白酶抑制剂对溶血活性无明显抑制作用,高温条件致使溶血活性丧失,加入渗透压保护剂PEG6000能抑制溶血活性。结论问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202为在钩体生长过程中表达的一成孔蛋白类溶血素。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体 蛋白表达 成孔溶血素
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两株不同毒力株钩端螺旋体37℃培养条件表达谱的差异
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作者 秦金红 盛跃颖 +4 位作者 张志明 杨宏亮 刘世贵 赵国屏 郭晓奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期897-900,905,共5页
目的钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株毒力株56601(中赖)与钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株减毒株(法赖)在遗传背景上具有很大的相似性,但毒力却差别很大。本研究利用钩端螺旋体的cDNA芯片在全基因组水平上研究毒力差别的机制。方法利用钩端... 目的钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株毒力株56601(中赖)与钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株减毒株(法赖)在遗传背景上具有很大的相似性,但毒力却差别很大。本研究利用钩端螺旋体的cDNA芯片在全基因组水平上研究毒力差别的机制。方法利用钩端螺旋体的cDNA芯片,在37℃培养条件下以钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株毒力株56601(中赖)为测试株,以钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株减毒株(法赖)为对照株,测试了芯片表达谱的变化。结果在37℃培养条件下,毒力株和减毒株的表达谱具有明显的差别。毒力株上调表达的基因有101个,下调表达的有71个。这些差异表达的基因在功能上可分为12类。结论这些差异表达的基因可能在钩端螺旋体毒力株致病力方面发挥一定的作用。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株 芯片 表达谱
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肾移植术后并发卡氏肺孢菌肺炎1例
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作者 秦燕 沈兵 +5 位作者 龚华 范昱 刘永 谭建明 张恩英 孙洪清 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第1期61-62,共2页
本院最近收治1例肾移植术后并发肺部感染患者,支气管镜下肺泡灌洗液染色确诊卡氏肺孢菌肺炎1例,现将该病例的诊治情况报道如下。
关键词 肾移植 卡氏肺孢菌肺炎
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结核分枝杆菌细胞壁糖复合物研究进展 被引量:3
14
作者 邹运 林文锋 张舒林 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1533-1539,共7页
结核病是由感染结核分枝杆菌引起的、以呼吸道发病为主的慢性传染病,目前仍然是单一病原体感染发病致死率最高的感染性疾病,深入了解结核分枝杆菌的生理代谢及其致病机制是防控结核病传播的重要途径。结核分枝杆菌细胞壁上特殊的糖复合... 结核病是由感染结核分枝杆菌引起的、以呼吸道发病为主的慢性传染病,目前仍然是单一病原体感染发病致死率最高的感染性疾病,深入了解结核分枝杆菌的生理代谢及其致病机制是防控结核病传播的重要途径。结核分枝杆菌细胞壁上特殊的糖复合物在维持细胞壁结构和致病过程中发挥着极其重要的作用,因此已成为当今的研究热点。该文仅对结核分枝杆菌细胞壁上糖复合物作一综述,以期为结核分枝杆菌的相关基础研究及临床应用提供参考。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 细胞壁 糖复合物
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双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定 被引量:1
15
作者 钟怡 董珂 +3 位作者 杨杨 冯春燕 Picardeau M 郭晓奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期739-744,共6页
目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b(+),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功... 目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b(+),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。 展开更多
关键词 双曲钩端螺旋体 溶血素 tlyA基因 原核表达
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细菌O抗原基因簇的研究进展 被引量:2
16
作者 蔡成松 郭晓奎 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期64-67,共4页
O抗原是革兰阴性菌外膜的重要组分。它是由多糖的重复单位和一系列寡糖重复单位所组成,即O抗原基本单位,一般包括2~6个糖基。因为多糖中糖的性质不同,连接次序,连接位点都有差异,因而O抗原变异很大。染色体中有关O抗原合成的基因丛集... O抗原是革兰阴性菌外膜的重要组分。它是由多糖的重复单位和一系列寡糖重复单位所组成,即O抗原基本单位,一般包括2~6个糖基。因为多糖中糖的性质不同,连接次序,连接位点都有差异,因而O抗原变异很大。染色体中有关O抗原合成的基因丛集成簇。这些基因簇的变异很大,也反映了O抗原结构的多样性。O抗原的表达受到各种因素的调节。 展开更多
关键词 O抗原 基因簇 O抗原基本单位 糖基转移酶基因
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重组钩端螺旋体病DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32诱导免疫应答反应的研究(英文)
17
作者 冯春燕 李擎天 +3 位作者 董珂 杨宏亮 胡宝瑜 郭晓奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期855-860,共6页
目的选取致病性钩端螺旋体(简称钩体)中高度保守,同时是钩体外膜蛋白中含量最多的两个脂蛋白LipL32和LipL21构建成融合基因DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32 ,观察在BALB/c小鼠中重组DNA疫苗诱导免疫应答反应的能力。方法采用连接引物PCR构... 目的选取致病性钩端螺旋体(简称钩体)中高度保守,同时是钩体外膜蛋白中含量最多的两个脂蛋白LipL32和LipL21构建成融合基因DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32 ,观察在BALB/c小鼠中重组DNA疫苗诱导免疫应答反应的能力。方法采用连接引物PCR构建融合基因LipL21-LipL32 ,并将其插入真核表达载体构成重组DNA疫苗pVAX1/Li-pL21-LipL32 ,脂质体转染人胚肾细胞( HEK293细胞)后Western Blot验证重组DNA疫苗在真核细胞中的表达,并将其肌注BALB/c小鼠,用显微凝集试验( MAT)检测所产生的特异性抗体与问号钩体的凝集效价,用IL-10和TNF-β细胞因子试剂盒检测体液免疫和细胞免疫应答水平。结果 Western Blot分析显示重组DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32在HEK293细胞中得到表达,小鼠动物实验结果显示重组DNA疫苗能有效地诱导机体的体液免疫和细胞免疫应答。结论成功构建钩体融合基因LipL21-LipL32重组DNA疫苗,所表达的融合蛋白能诱导特异的免疫应答反应,为进一步研究和发展新型的钩体病疫苗提供了实验基础。 展开更多
关键词 钩端螺旋体病 LIPL21 LIPL32 DNA疫苗
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钩端螺旋体重组鞭毛蛋白与钩体病患者血清学检测
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作者 于洋 张湘燕 +2 位作者 张怡轩 秦金红 赵蔚 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期438-441,共4页
目的钩端螺旋体鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2、FlaB3和FlaB4与钩体病患者血清反应的研究。方法根据钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株(56601)的基因组序列,对4个编码鞭毛丝状体蛋白基因LA2017、LA2019、LA2417、LA2418进行克隆表达,并纯化得到的重... 目的钩端螺旋体鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2、FlaB3和FlaB4与钩体病患者血清反应的研究。方法根据钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株(56601)的基因组序列,对4个编码鞭毛丝状体蛋白基因LA2017、LA2019、LA2417、LA2418进行克隆表达,并纯化得到的重组蛋白,进一步制备多克隆抗体。Western Blot检测这4个蛋白在体外培养钩体中的表达情况,ELISA检测在钩体病患者血清中抗体的表达情况。结果 FlaB1、FlaB2、FlaB3和FlaB4均在体外培养的钩端螺旋体56601株中表达;FlaB1、FlaB2和FlaB4的相应抗体在钩体病患者血清中检测出、FlaB1和FlaB2的相应抗体在其它致病性钩体感染患者血清中测出、FlaB1和FlaB4的相应抗体在疫苗免疫正常人血清测出,且均与正常对照具有显著性差异。结论 FlaB1、FlaB2和FlaB4可能与钩体的致病有一定的关系,FlaB1和FlaB4,特别是FlaB1可作为疫苗候选蛋白或诊断蛋白,值得进一步研究。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 鞭毛蛋白 钩体感染患者血清
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