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转染中国仓鼠卵巢细胞人TSH受体的功能评价
被引量：
1
1
作者
周亚芹
张洪梅
+2 位作者
李晓永
董艳
苏青
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1224-1227,共4页
目的研究转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞人促甲状腺激素(hTSH)受体(hTSHR)的功能。方法抽提已转染hTSHR的CHO细胞基因组DNA,PCR扩增目的条带,并对产物进行序列测定。采用受体的放射配体结合分析法,以固定量125I的牛促甲状腺激素(125I-bTSH)...
目的研究转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞人促甲状腺激素(hTSH)受体(hTSHR)的功能。方法抽提已转染hTSHR的CHO细胞基因组DNA,PCR扩增目的条带,并对产物进行序列测定。采用受体的放射配体结合分析法,以固定量125I的牛促甲状腺激素(125I-bTSH)和浓度递增的未标记bTSH与hTSHR发生竞争结合反应分析受体的基本功能;通过TSH刺激试验测定细胞环磷酸腺苷(cAMP)含量,评价hTSHR的生物学活性。结果PCR扩增片段长度与预期相符,且序列完全正确。竞争结合反应表明,随着bTSH浓度的递增,125I-bTSH与hTSHR的结合量逐渐下降;TSH刺激试验显示,随着bTSH浓度的递增,细胞cAMP含量亦逐渐升高,当bTSH浓度为10 mIU/mL时,cAMP水平达到峰值。结论cDNA序列整合在CHO细胞基因组内并在细胞膜上表达的hTSHR,具有受体的基本功能特性和良好的生物学活性。该实验为自身免疫性甲状腺疾病患者血清甲状腺刺激性抗体(TSAb)和阻断性抗体(TSBAb)的检测奠定了基础。
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关键词
中国仓鼠卵巢细胞
促甲状腺激素受体
促甲状腺激素受体抗体
环磷酸腺苷
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职称材料
蛋白激酶C抑制剂对发育期甲状腺功能减退大鼠智力的改善作用
2
作者
张洪梅
苏青
+2 位作者
董艳
李晓永
罗敏
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1231-1233,共3页
目的研究发育期甲状腺功能减退(甲减)的大鼠经蛋白激酶C(PKC)抑制剂bisindolylmaleimideⅪ处理后智力的变化,从信号转导途径进一步探讨甲减时鼠脑发育异常的机制。方法2只SD孕鼠自孕第15天起以丙基硫氧嘧啶溶液灌胃,出生的仔鼠即为甲减...
目的研究发育期甲状腺功能减退(甲减)的大鼠经蛋白激酶C(PKC)抑制剂bisindolylmaleimideⅪ处理后智力的变化,从信号转导途径进一步探讨甲减时鼠脑发育异常的机制。方法2只SD孕鼠自孕第15天起以丙基硫氧嘧啶溶液灌胃,出生的仔鼠即为甲减仔鼠。部分甲减仔鼠于出生当日起腹腔注射PKC抑制剂bisindolylmaleimideⅪ0.6μg.g-1.d-1。另外1只未灌注丙基硫氧嘧啶溶液的雌鼠所产仔鼠作为正常对照组。仔鼠龄达1个月时,对正常对照组(n=8)、甲减组(n=8)、PKC抑制剂处理组(n=8)仔鼠行水迷宫实验测试其智力水平。结果三组仔鼠学习记忆过程存在明显差异。PKC抑制剂组及甲减组皆较正常对照组逃避潜伏期长,找到终点的比率低,游速较正常对照组明显降低;且甲减组比PKC抑制剂组的逃避潜伏期更长,找到终点的比率更低,游速更慢,总体变化有显著性差异(P<0.01)。结论蛋白激酶C抑制剂bisindolylmaleimideⅪ对发育期甲状腺功能减退大鼠的智力有改善作用,PKC信号转导系统可能参与了甲减性脑发育障碍的发生。
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关键词
蛋白激酶C
bisindolylmaleimideⅪ
甲状腺功能减退
学习记忆
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职称材料
题名
转染中国仓鼠卵巢细胞人TSH受体的功能评价
被引量：
1
1
作者
周亚芹
张洪梅
李晓永
董艳
苏青
机构
上海交通大学医学院新华医院内分泌代谢科
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1224-1227,共4页
基金
国家自然科学基金(30470819)~~
文摘
目的研究转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞人促甲状腺激素(hTSH)受体(hTSHR)的功能。方法抽提已转染hTSHR的CHO细胞基因组DNA,PCR扩增目的条带,并对产物进行序列测定。采用受体的放射配体结合分析法,以固定量125I的牛促甲状腺激素(125I-bTSH)和浓度递增的未标记bTSH与hTSHR发生竞争结合反应分析受体的基本功能;通过TSH刺激试验测定细胞环磷酸腺苷(cAMP)含量,评价hTSHR的生物学活性。结果PCR扩增片段长度与预期相符,且序列完全正确。竞争结合反应表明,随着bTSH浓度的递增,125I-bTSH与hTSHR的结合量逐渐下降;TSH刺激试验显示,随着bTSH浓度的递增,细胞cAMP含量亦逐渐升高,当bTSH浓度为10 mIU/mL时,cAMP水平达到峰值。结论cDNA序列整合在CHO细胞基因组内并在细胞膜上表达的hTSHR,具有受体的基本功能特性和良好的生物学活性。该实验为自身免疫性甲状腺疾病患者血清甲状腺刺激性抗体(TSAb)和阻断性抗体(TSBAb)的检测奠定了基础。
关键词
中国仓鼠卵巢细胞
促甲状腺激素受体
促甲状腺激素受体抗体
环磷酸腺苷
Keywords
Chinese hamster ovary cell
thyrotropin receptor
thyrotropin receptor antibody
cAMP
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
R593.2 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
蛋白激酶C抑制剂对发育期甲状腺功能减退大鼠智力的改善作用
2
作者
张洪梅
苏青
董艳
李晓永
罗敏
机构
上海交通大学医学院新华医院内分泌代谢科
上海交通大学医学院
瑞金
医院
上海
市
内分泌
代谢
病研究所
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1231-1233,共3页
基金
国家自然科学基金(30200127)~~
文摘
目的研究发育期甲状腺功能减退(甲减)的大鼠经蛋白激酶C(PKC)抑制剂bisindolylmaleimideⅪ处理后智力的变化,从信号转导途径进一步探讨甲减时鼠脑发育异常的机制。方法2只SD孕鼠自孕第15天起以丙基硫氧嘧啶溶液灌胃,出生的仔鼠即为甲减仔鼠。部分甲减仔鼠于出生当日起腹腔注射PKC抑制剂bisindolylmaleimideⅪ0.6μg.g-1.d-1。另外1只未灌注丙基硫氧嘧啶溶液的雌鼠所产仔鼠作为正常对照组。仔鼠龄达1个月时,对正常对照组(n=8)、甲减组(n=8)、PKC抑制剂处理组(n=8)仔鼠行水迷宫实验测试其智力水平。结果三组仔鼠学习记忆过程存在明显差异。PKC抑制剂组及甲减组皆较正常对照组逃避潜伏期长,找到终点的比率低,游速较正常对照组明显降低;且甲减组比PKC抑制剂组的逃避潜伏期更长,找到终点的比率更低,游速更慢,总体变化有显著性差异(P<0.01)。结论蛋白激酶C抑制剂bisindolylmaleimideⅪ对发育期甲状腺功能减退大鼠的智力有改善作用,PKC信号转导系统可能参与了甲减性脑发育障碍的发生。
关键词
蛋白激酶C
bisindolylmaleimideⅪ
甲状腺功能减退
学习记忆
Keywords
protein kinase C
bisindolylmaleimid Ⅺ
hypothyroidism
learning and memory
分类号
R581.2 [医药卫生—内分泌]
R-332 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转染中国仓鼠卵巢细胞人TSH受体的功能评价
周亚芹
张洪梅
李晓永
董艳
苏青
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
蛋白激酶C抑制剂对发育期甲状腺功能减退大鼠智力的改善作用
张洪梅
苏青
董艳
李晓永
罗敏
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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