为了净化福建省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征疾病,该试验对临床发病的猪血清提取核酸后,通过荧光定量PCR、RT-PCR、ORF5基因测序等实验方法进行病原检测,使用DNAStar软件与14种参考序列进行ORF5比对确定毒株类型。采集发病猪血清及...为了净化福建省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征疾病,该试验对临床发病的猪血清提取核酸后,通过荧光定量PCR、RT-PCR、ORF5基因测序等实验方法进行病原检测,使用DNAStar软件与14种参考序列进行ORF5比对确定毒株类型。采集发病猪血清及检测常见病原后,通过敏感性实验和建立标准曲线确定发病猪血清病毒量。将采集的血清按1∶50、1∶100和1∶150比例稀释后分3组对21头试验猪肌注,通过测量肌注后10 d内试验猪的体温和第30、60、90天PRRSV抗体变化后确定血清驯化最佳稀释比例。结果显示:本场分离毒株ORF5序列与参考序列比对后确定感染为JXA1样毒株。病猪血清病原检测PRRSV为阳性,PRV、CSFV、PCV2、ASFV、H1和H3亚型SIV、FMDV阴性。将病毒量为10^(5.4)拷贝/μL的猪血清稀释试验后确定最佳驯化稀释比例为1∶100。将后备母猪转移至新的生产基地、加强生物安全防控、闭群管理、检测淘汰等,同时跟踪母猪血清驯化后35、150、350和420 d PRRSV抗原和抗体,血清驯化后420 d母猪在第2胎时母猪和所产仔猪抗原抗体均为阴性。可见,通过敏感性实验和建立标准曲线确定血清病毒量及通过猪群试验确定血清稀释比例的方法对猪繁殖与呼吸综合征的净化是可行的。展开更多
文摘为了净化福建省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征疾病,该试验对临床发病的猪血清提取核酸后,通过荧光定量PCR、RT-PCR、ORF5基因测序等实验方法进行病原检测,使用DNAStar软件与14种参考序列进行ORF5比对确定毒株类型。采集发病猪血清及检测常见病原后,通过敏感性实验和建立标准曲线确定发病猪血清病毒量。将采集的血清按1∶50、1∶100和1∶150比例稀释后分3组对21头试验猪肌注,通过测量肌注后10 d内试验猪的体温和第30、60、90天PRRSV抗体变化后确定血清驯化最佳稀释比例。结果显示:本场分离毒株ORF5序列与参考序列比对后确定感染为JXA1样毒株。病猪血清病原检测PRRSV为阳性,PRV、CSFV、PCV2、ASFV、H1和H3亚型SIV、FMDV阴性。将病毒量为10^(5.4)拷贝/μL的猪血清稀释试验后确定最佳驯化稀释比例为1∶100。将后备母猪转移至新的生产基地、加强生物安全防控、闭群管理、检测淘汰等,同时跟踪母猪血清驯化后35、150、350和420 d PRRSV抗原和抗体,血清驯化后420 d母猪在第2胎时母猪和所产仔猪抗原抗体均为阴性。可见,通过敏感性实验和建立标准曲线确定血清病毒量及通过猪群试验确定血清稀释比例的方法对猪繁殖与呼吸综合征的净化是可行的。
