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HPV L1保守序列多肽抗血清降解HPV6感染能力的测试
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作者 邓金芳 李志英 +1 位作者 薛冰 肖长义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期78-81,共4页
目的:明确对不同类型人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)具有交叉反应性的HPV L1 C-末端保守序列抗体是否具有降解HPV6感染能力的作用。方法:收集尖锐湿疣标本,从收集的标本中找出HPV6型感染病例,并提取病毒。将多肽抗血清按不同比例稀释... 目的:明确对不同类型人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)具有交叉反应性的HPV L1 C-末端保守序列抗体是否具有降解HPV6感染能力的作用。方法:收集尖锐湿疣标本,从收集的标本中找出HPV6型感染病例,并提取病毒。将多肽抗血清按不同比例稀释,与得到的病毒共同培养并中和,接触单层培养的人永生化角质形成细胞,PCR检验经HPV6病毒接触后人永生化角质形成细胞中HPV6 DNA含量,ELISA检验此细胞中HPV6 L1蛋白存在与否。结果:经不同稀释浓度抗血清中和的HPV6病毒感染的人永生化角质形成细胞,其DNA提取物的PCR产物经电泳,在凝胶280 bp处,HPV6特异性区间呈现不同强度的阳性条带,阳性条带的强度随抗血清浓度的升高逐渐降低。ELISA对经抗血清中和病毒接触的人永生化角质形成细胞提取蛋白进行测试,HPV L1蛋白表达量显示出与上述PCR检测结果同样的梯度变化趋势,变化差异具有统计学意义。结论:初步证明,HPV6 L1保守序列多肽抗血清可部分降解该病毒的感染,该抗血清具有针对更多型HPV进行中和研究的价值。 展开更多
关键词 HPV 多肽抗血清 人永生化角质形成细胞 降解 体外感染
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HPV16E7下调miR-29a促进PC3细胞增殖 被引量:3
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作者 熊焱强 冯晶 +1 位作者 刘朝奇 李志英 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期145-149,共5页
目的探讨人乳头瘤病毒16E7(human papillomavirus V16E7,HPV16E7)能否通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖,从microRNA的角度探讨高危型HPV的致癌机制。方法将HPV16E7基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转... 目的探讨人乳头瘤病毒16E7(human papillomavirus V16E7,HPV16E7)能否通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖,从microRNA的角度探讨高危型HPV的致癌机制。方法将HPV16E7基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转染人前列腺癌细胞PC3,经G418筛选,通过RT-PCR、流式细胞术检测稳定转染效果;用MTT法、流式细胞术检测克隆细胞株的生物学活性,半定量RT-PCR检测E7对PC3细胞中miR-29a表达的影响。结果重组质粒经酶切及测序鉴定显示构建成功,并获得稳定表达E7的PC3克隆细胞株。与阴性对照组PC3-3.1(-)比较,克隆细胞株PC3-E7增殖能力显著增强(P<0.01),G0/G1期细胞明显减少,而S期和G2/M期细胞明显增多(均P<0.05);PC3-E7细胞中miR-29a表达量显著低于对照组(P<0.01)。结论 HPV16E7可以加速细胞周期G1向S期进展,其机制可能与其下调miR-29a有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒16E7 miR-29a 细胞增殖
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HPV16 E7通过调控miR-29a-CDK6信号通路促进肿瘤细胞增殖
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作者 熊焱强 冯晶 +1 位作者 刘朝奇 李志英 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期744-749,共6页
目的探究人乳头瘤病毒16 E7(HPV16 E7)通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖的分子机制,从miRNA的视角探讨高危型HPV的致癌机制。方法将HPV16 E7基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转染人前列腺癌细胞PC3;... 目的探究人乳头瘤病毒16 E7(HPV16 E7)通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖的分子机制,从miRNA的视角探讨高危型HPV的致癌机制。方法将HPV16 E7基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转染人前列腺癌细胞PC3;通过半定量RT-PCR检测细胞周期相关基因及miR-29a潜在靶基因CDK6、HBP1的表达水平,通过荧光素酶报告实验确定miR-29a的靶基因;将miR-29a mimic及inhibitor分别瞬时转染PC3-E7和PC3-3.1细胞,Western blot检测CDK6蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期分布。结果与对照组相比,克隆细胞株PC3-E7中CDK4、CDK6、Cyclin E2、E2F1等细胞周期相关调节因子及miR-29a的潜在靶基因HBP1、CDK6等表达均有不同程度的上调(均P<0.01);而PC3-E7细胞中CDK6蛋白表达水平亦明显高于对照组(P<0.01);miR-29a通过靶向3′-UTR区域调控CDK6基因转录和蛋白表达,E7高表达后下调了miR-29a的表达水平,使得CDK6表达升高,而加速细胞周期G;期向S期进展。上调miR-29a后可以抑制CDK6的表达,并调控下游细胞周期,部分逆转E7的促增殖效应。结论miR-29a与CDK6 mRNA 3′UTR结合并下调其表达,从而抑制细胞的增殖,E7-miR-29a-CDK6信号通路可能是高危型HPV致细胞发生恶性增殖的重要途径。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 E7 miR-29a CDK6 细胞增殖
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微小RNA对肿瘤微环境T细胞免疫调节作用研究的新进展 被引量:5
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作者 杨秋玲 刘朝奇 +2 位作者 汪玉玲 张丽轩 李志英(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期3055-3059,共5页
微小RNA(miRNA)是一类新近发现的小的、内源性的、进化上高度保守的单链非编码RNA,主要在基因表达的转录后水平起作用。自第1个miRNA被发现以来,至今已发现并通过实验验证的与人类遗传信息相关的miRNAs超过500个,这些miRNAs涉及多种细... 微小RNA(miRNA)是一类新近发现的小的、内源性的、进化上高度保守的单链非编码RNA,主要在基因表达的转录后水平起作用。自第1个miRNA被发现以来,至今已发现并通过实验验证的与人类遗传信息相关的miRNAs超过500个,这些miRNAs涉及多种细胞的生理病理过程。尤其是miRNAs对肿瘤微环境中T细胞介导的抗肿瘤免疫应答的调控作用,已成为近年来研究者们关注的焦点。miRNAs的靶网络是庞大且复杂的,涉及多种信号分子和信号通路。本文分别从调节/抑制T细胞、辅助T细胞及细胞毒性T细胞3个T细胞亚群综述了miRNAs对肿瘤微环境中T细胞的免疫调节作用。 展开更多
关键词 微小RNA 肿瘤 调节/抑制T细胞 辅助T细胞 细胞毒性T细胞
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绒毛膜羊膜炎的临床诊断及治疗进展 被引量:13
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作者 余红波 符策岗 王俊杰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第1期109-112,共4页
绒毛膜羊膜炎在孕产妇发病率极高,并伴随严重并发症。在发达国家,通过及时的诊断和适当的治疗,在绒毛膜羊膜炎的治疗上已经取得很大进步。然而在发展中国家,受到医疗设备及诊断技术的限制,绒毛膜羊膜炎常常被漏诊而未得到妥善的处理。... 绒毛膜羊膜炎在孕产妇发病率极高,并伴随严重并发症。在发达国家,通过及时的诊断和适当的治疗,在绒毛膜羊膜炎的治疗上已经取得很大进步。然而在发展中国家,受到医疗设备及诊断技术的限制,绒毛膜羊膜炎常常被漏诊而未得到妥善的处理。这不仅仅影响了孕妇的健康,且一定程度上造成了胎儿发病和死亡。文中就绒毛膜羊膜炎的发病到治疗环境作一简要综述。 展开更多
关键词 绒毛膜羊膜炎 新生儿败血症 抗生素 宫内感染 并发症
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