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HPV L1 C-末端保守序列多肽抗血清对临床标本中不同型别HPV的检测 被引量:1
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作者 马卿莲 肖长义 +4 位作者 李志英 叶红 王雅琴 袁太宁 李红军 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期324-327,335,共5页
目的测试自行制备的HPV L1C-末端保守序列多肽抗血清对外阴及宫颈病变标本中人乳头瘤病毒(HPV)的检出能力。方法收集女性外阴及宫颈病变标本,以MY09/11为通用引物行HPV通用PCR检测,在此基础上以GP5+/6+为内引物行HPV的巢式PCR检测。PCR... 目的测试自行制备的HPV L1C-末端保守序列多肽抗血清对外阴及宫颈病变标本中人乳头瘤病毒(HPV)的检出能力。方法收集女性外阴及宫颈病变标本,以MY09/11为通用引物行HPV通用PCR检测,在此基础上以GP5+/6+为内引物行HPV的巢式PCR检测。PCR扩增产物用微孔板杂交法确定HPV型别。标本同时用多肽抗血清行ELISA检测,并对不同型别HPV阳性的标本行Western bolt检测。结果临床标本的HPV检出率,通用引物PCR为70.3%(64/91),巢式PCR为86.8%(79/91),ELISA检测为84.6%(77/91),ELISA法的检出率与巢式PCR相当,高于通用引物PCR。对7个不同型别HPV阳性标本的Western bolt检测,多肽抗血清显示了良好的多价反应性。结论该HPV L1C-末端保守序列多肽抗血清对外阴及宫颈病变标本中的HPV具有良好的检出能力,对多型HPV具有良好的多价反应能力。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 多肽 抗血清 检测 宫颈病变
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L1C-末端共同序列多肽抗体检测宫颈液基细胞学标本中人乳头瘤病毒 被引量:2
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作者 孙伟 肖长义 +4 位作者 李志英 叶红 王雅琴 袁太宁 李红军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期873-878,共6页
目的确定由人乳头瘤病毒(HPV)主要外壳蛋白L1 C-末端保守序列多肽诱导的多肽抗体对宫颈脱落细胞内的HPV是否具有良好的检测能力。方法收集宫颈脱落细胞,一式两份,一份采用巢氏PCR检测HPV DNA,另一份以兔抗多肽纯化抗体和小鼠抗多肽抗血... 目的确定由人乳头瘤病毒(HPV)主要外壳蛋白L1 C-末端保守序列多肽诱导的多肽抗体对宫颈脱落细胞内的HPV是否具有良好的检测能力。方法收集宫颈脱落细胞,一式两份,一份采用巢氏PCR检测HPV DNA,另一份以兔抗多肽纯化抗体和小鼠抗多肽抗血清为探针做夹心法ELISA检测标本中的HPV L1,比较两种方法对HPV的检出率差异。用多肽抗体对部分标本做免疫细胞化学检测。结果对收集到的269例宫颈脱落细胞标本用MY09/11引物扩增,检出HPV DNA阳性标本30例,检出率为11.15%;对MY09/11扩增后结果为阴性的标本再用引物GP5+/6+进行扩增。又检出阳性标本51例,检出率为21.34%。将两个PCR检测合计,共检测到81例HPV DNA阳性标本,HPV DNA总检出率为30.11%。对263例脱落细胞标本进行ELISA检测,共检出阳性标本91例,HPV阳性检出率为34.60%,与PCR检测结果相比差异无统计学意义。免疫细胞化学检测结果表明多肽抗体能够特异性地显示有HPV感染的宫颈脱落细胞。结论HPV L1多肽抗体对宫颈脱落细胞内HPV的感染具有良好的检出能力,该抗体在开发用于宫颈癌预防性筛查的HPV检测试剂盒方面具有一定的潜力。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 主要外壳蛋白 多肽 抗体 检测 宫颈脱落细胞
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HPVL1在不同宫颈病变组织中的表达规律探讨 被引量:1
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作者 肖长义 时艳梅 +4 位作者 李慧弘 叶红 李志英 王雅琴 李红军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1337-1346,共10页
目的探讨影响HPV L1蛋白在肿瘤组织内表达的因素,寻找HPV L1蛋白在不同宫颈病变中的表达规律。方法收集不同宫颈病变组织,检测标本内HPV16和HPV18基因分型及基因组物理状态;用ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学方法检测标本内HPV L1的表... 目的探讨影响HPV L1蛋白在肿瘤组织内表达的因素,寻找HPV L1蛋白在不同宫颈病变中的表达规律。方法收集不同宫颈病变组织,检测标本内HPV16和HPV18基因分型及基因组物理状态;用ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学方法检测标本内HPV L1的表达情况。结果共收集到48例标本,其中42例HPV16阳性,3例HPV18阳性。HPV16阳性标本中,25例病毒基因组为游离型,7例为混合型,10例为整合型;HPV18阳性标本全部为整合型。ELISA及蛋白质印迹检测显示,随着病变程度的加重,HPV L1的表达量有逐渐降低的趋势。免疫组织化学显示,组织内的HPV L1阳性反应有多种形式,依病变组织内病毒基因组物理状态、病变组织分化程度以及病变进程的不同而不同。结论 HPV L1在宫颈病变组织内的表达有一定的结构基础,其表达量与病毒基因组在病变组织和细胞内的物理状态、肿瘤组织的分化程度、病毒基因组插入宿主基因组基因序列的状态有着非常密切的关系。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 主要外壳蛋白 宫颈肿瘤 基因组 物理状态
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L1C末端共同序列多肽诱导单克隆抗体应用于宫颈脱落细胞HPV的检出
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作者 成帆 李志英 +1 位作者 肖长义 王乐 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期858-862,共5页
目的考察由人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)主要外壳蛋白(L1)C末端保守序列多肽诱导的单克隆抗体对宫颈脱落细胞内的HPV感染是否具有可应用于临床的检测能力。方法收集三峡大学第二临床医学院妇科门诊宫颈脱落细胞标本,一式两份... 目的考察由人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)主要外壳蛋白(L1)C末端保守序列多肽诱导的单克隆抗体对宫颈脱落细胞内的HPV感染是否具有可应用于临床的检测能力。方法收集三峡大学第二临床医学院妇科门诊宫颈脱落细胞标本,一式两份,其中一份标本用于医院检验科HPV分型检测试剂盒检测,另一份以HPV L1C末端保守序列多肽诱导的小鼠单克隆抗体运用免疫组化方法检测标本中的HPV L1,比较两种方法检测结果的差异。结果收集到的384例妇科门诊宫颈脱落细胞标本中,HPV分型检测试剂盒检测出HPV阳性感染63例,阳性率为16.41%(63/384);用免疫组化检测了其中380例标本,共检出阳性标本120例,阳性检出率为31.58%(120/380),与HPV分型检测试剂盒检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论初步证明了HPV L1C末端保守序列多肽诱导的小鼠单克隆抗体对宫颈脱落细胞内HPV的感染具有良好的检出能力,并且检测能力高于现临床所用的市售HPV分型检测试剂盒。该单克隆抗体在开发用于宫颈癌预防性筛查的HPV检测试剂盒方面具有一定的潜力。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 主要外壳蛋白 单克隆抗体 宫颈脱落细胞
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