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题名珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化
被引量：5
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作者
杨敬元
熊丹
梁宏伟
王玉兵
廖明尧
陈发菊
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机构
湖北省神农架自然保护区管理局
三峡大学生物技术中心-湖北省天然产物利用与研究重点实验室
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出处
《浙江林学院学报》
CSCD
北大核心
2007年第3期279-283,共5页
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基金
湖北省宜昌市科学技术重点攻关项目(A06209)
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文摘
以采自湖北省神农架地区的14株香果树Emmenopterys henryi为材料,提取其叶片基因组DNA,并以其基因组DNA为模板进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应条件的优化。RAPD反应条件中的各个因子,包括模板DNA质量浓度、引物浓度、dNTP浓度、DNA聚合酶浓度和Mg2+浓度。结果表明,香果树基因组DNA在以下条件有较好的扩增效果:25μL体系中,Taq酶1.33×10-3kat.L-1;随机引物0.5μmol.L-1;Mg2+2.6 mmol.L-1;dNTP 220μmol.L-1;DNA模板4.40 mg.L-1。聚合酶链式反应(PCR)程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,43℃退火1 min,72℃延伸2 min,经过40个循环,最后72℃延伸8 min。此体系和反应程序可获得比较稳定的扩增结果。
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关键词
植物学
香果树
基因组DNA
随机扩增多态性DNA
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Keywords
botany
Emmenopterys henryi （Henry emmenoterys）
genomic DNA
random amplified polymorphic DNA （RAPD）
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分类号
S718.4
[农业科学—林学]
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