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基于NF-κB/NLRP3信号通路研究高脂饮食对睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的作用及机制
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作者 卯润敏 赵海霞 +6 位作者 段海丽 高子惠 屈亚男 付国庆 毛剑敏 孙建明 张长城 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第11期2134-2142,共9页
目的 基于NF-κB/NLRP3信号通路研究高脂饮食对小鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的作用及机制。方法高脂或普通对照饲料喂养C57BL/6J雄性小鼠5个月,称取小鼠体质量、性腺器官质量并计算其指数,检测精子浓度、精子活率、睾丸组织形态、... 目的 基于NF-κB/NLRP3信号通路研究高脂饮食对小鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的作用及机制。方法高脂或普通对照饲料喂养C57BL/6J雄性小鼠5个月,称取小鼠体质量、性腺器官质量并计算其指数,检测精子浓度、精子活率、睾丸组织形态、紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-11表达水平。棕榈酸(PA)作用于TM4细胞24 h,CCK-8法检测细胞活力,随后将TM4细胞分为不同浓度PA(0、50、100、200和300μmol·L^(-1))处理组,Western blot法检测细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-11表达水平;跨上皮电阻(TEER)和FITC-葡聚糖通透性实验检测TM4细胞紧密连接通透性;RT-qPCR和Western blot法检测NF-κB/NLRP3信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平。结果 动物实验发现,高脂饮食可增加小鼠体质量和精囊腺质量,降低小鼠睾丸指数、附睾指数、精子浓度和精子活率,损伤睾丸组织形态,下调ZO-1和Occludin表达水平,但对Claudin-11表达无明显影响。细胞实验结果发现,PA可明显下调TM4.细胞ZO-1、Occludin和Claudin-11表达水平,增加细胞通透性,明显上调TM4细胞NF-κB/NLRP3通路相关因子mRNA和蛋白表达水平。结论 高脂饮食可损伤睾丸支持细胞紧密连接功能,其机制可能与激活NF-κB/NLRP3信号通路导致细胞炎症有关。 展开更多
关键词 高脂饮食 睾丸 支持细胞 紧密连接功能 炎症 NF-κB/NLRP3信号通路
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淫羊藿苷通过调节mTORC1和mTORC2平衡改善衰老所致小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤
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作者 程窈婷 张长城 +4 位作者 付国庆 王坦 毛剑敏 孙建明 赵海霞 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1091-1098,共8页
目的探究淫羊藿苷对自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤的保护作用及机制。方法将15月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为衰老模型组、淫羊藿苷低剂量(5 mg·kg^(-1))和高剂量(20 mg·kg^(-1))给药组,另设1月龄小鼠为青年对照组,10... 目的探究淫羊藿苷对自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤的保护作用及机制。方法将15月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为衰老模型组、淫羊藿苷低剂量(5 mg·kg^(-1))和高剂量(20 mg·kg^(-1))给药组,另设1月龄小鼠为青年对照组,10只/组。青年对照组与衰老模型组小鼠接受0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃作为溶媒对照,淫羊藿苷给药组小鼠则分别接受不同浓度淫羊藿苷灌胃,连续给药3个月后,检测小鼠睾丸和附睾质量、脏器指数、精子活率和浓度,HE染色观察睾丸组织形态,电镜观察睾丸支持细胞紧密连接超微结构,Western blot检测睾丸支持细胞紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin11表达水平,免疫荧光检测睾丸ZO-1、Occludin、Raptor、Rictor、p-70S6K和p-rps6定位和表达。结果与衰老模型组相比,淫羊藿苷可明显增加衰老小鼠睾丸质量、睾丸指数、附睾指数,提高精子活率和浓度,改善睾丸组织形态及紧密连接超微结构损伤。Western blot结果显示,淫羊藿苷上调ZO-1和Occludin表达,但对Claudin 11的表达无显著影响。免疫荧光结果显示,淫羊藿苷能上调ZO-1、Occludin及Rictord的表达,下调p-70S6K、p-rps6及Raptor的表达。结论淫羊藿苷可改善自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤,其机制可能与恢复mTORC1和mTORC2的平衡有关。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 衰老 睾丸 支持细胞 紧密连接功能 mTORC1和mTORC2平衡
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