光动力疗法在肿瘤治疗中的研究进展 被引量：23

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作者 陈越 郑军 谭潇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第16期2517-2521,共5页

肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下,局部组织细胞异常增殖所形成的具有一定侵袭能力的新生物。肿瘤细胞具有异常的形态、代谢和功能,并在不同程度上失去了分化成熟的能力,是当今医学发展的难题。光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是... 肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下,局部组织细胞异常增殖所形成的具有一定侵袭能力的新生物。肿瘤细胞具有异常的形态、代谢和功能,并在不同程度上失去了分化成熟的能力,是当今医学发展的难题。光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种基于光敏剂、光照等条件,对病灶细胞具有杀伤作用的治疗手段,其在治疗某些疾病、改善患者预后方面具有诸多优点,尤其对于肿瘤患者而言,PDT的出现可能为他们的治疗带来意想不到的效果。在国内外众多研究报告中,PDT显示出了对不同肿瘤的有效性,这无疑为临床上肿瘤的治疗提供了新的思路。本文选取了PDT在几种常见恶性肿瘤的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 光动力疗法 肿瘤 光敏剂

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组织激肽释放酶7小分子抑制剂对卵巢癌的影响

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作者 时鸿娟 刘伟 +1 位作者 胡丽玲 谭潇 《中国医学科学院学报》 北大核心 2025年第3期366-374,共9页

目的探究组织激肽释放酶7(KLK7)小分子抑制剂C42对高表达KLK7卵巢癌的影响,并评估其作为卵巢癌新治疗策略的可行性。方法采用CCK-8法、流式细胞术、细胞划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验以及Western blot检测方法,从细胞水平分析C42... 目的探究组织激肽释放酶7(KLK7)小分子抑制剂C42对高表达KLK7卵巢癌的影响,并评估其作为卵巢癌新治疗策略的可行性。方法采用CCK-8法、流式细胞术、细胞划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验以及Western blot检测方法,从细胞水平分析C42对高表达KLK7卵巢癌SKOV3细胞株的增殖、迁移和侵袭能力的影响;通过构建SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察C42对移植瘤生长和转移的影响,并采用免疫组织化学染色检测转移和侵袭相关蛋白的表达情况。结果细胞实验显示,与对照组比较,C42能够显著抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P均<0.001)。动物模型实验显示,与对照组比较,10.2 mg/kg C42干预后裸鼠肿瘤重量降低(P=0.009),且发生肝脏转移的数量减少。免疫组织化学染色结果显示,10.2 mg/kg C42组肿瘤组织中增殖指标Ki-67蛋白表达较对照组显著降低(P=0.002),肿瘤转移和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶9(P=0.027)和Vimentin(P=0.039)表达水平显著降低。结论KLK7小分子抑制剂C42能够有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 卵巢癌 组织激肽释放酶7 SKOV3细胞 靶向治疗

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大肠杆菌OmpC响应银胁迫初探及生物信息学分析

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作者 沈舒楚 吴钰煌 +5 位作者 蔡丹 安皓月 伍中宝 王君 杜幼芹 邹黎黎 《中国测试》 北大核心 2025年第4期100-108,共9页

通过同源重组技术敲除大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)外膜孔蛋白C(outer membrane porin channel C,OmpC)编码基因ompC、OmpF编码基因ompF和PhoE编码基因phoE。连续监测ompC缺失株的生长及其对银离子的敏感性;运用生物信息学分析Omp... 通过同源重组技术敲除大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)外膜孔蛋白C(outer membrane porin channel C,OmpC)编码基因ompC、OmpF编码基因ompF和PhoE编码基因phoE。连续监测ompC缺失株的生长及其对银离子的敏感性;运用生物信息学分析OmpC的生物学特性。结果显示ompC、ompF和phoE缺失株构建成功,ompC、ompF和phoE缺失并不影响E.coli的生长代谢。相比于其他孔蛋白,OmpC蛋白缺失可显著提高E.coli抵御银离子胁迫的能力,与耐抗生素存在差异。生物信息学分析结果表示,OmpC的分子式为C1795H2676N482O577S4,由367个氨基酸组成,相对分子质量为40368.12,原子总数为5534,等电点为4.58;含有跨膜域,定位于细胞外膜中;二级结构中α-螺旋占比18.80%,β-折叠占比29.16%,β-转角占比6.81%,无规则卷曲占比45.23%;与银离子进行分子对接预测显示无对接位点。这为OmpC主要作为银离子入胞通道提供更多证据,可为解析E.coli应对银离子胁迫的机制奠定基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌 λRed同源重组技术 银离子 OMPC 生物信息学分析

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抑制多胺调节因子-1表达增强地塞米松对人宫颈癌细胞的抗肿瘤活性 被引量：1

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作者 杨建林 李论 +4 位作者 曾子悦 曹春雨 吕亚丰 秦宇 王艳林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期711-715,共5页

目的:探讨在人宫颈癌Caski细胞中抑制多胺调节因子-1(polyamine-modulated factor,PMF-1)表达对糖皮质激素类药物地塞米松(dexamethasone,DEX)抗肿瘤作用的影响。方法:设计合成靶向人PMF-1基因的si RNA,Western blotting法鉴定其对Cask... 目的:探讨在人宫颈癌Caski细胞中抑制多胺调节因子-1(polyamine-modulated factor,PMF-1)表达对糖皮质激素类药物地塞米松(dexamethasone,DEX)抗肿瘤作用的影响。方法:设计合成靶向人PMF-1基因的si RNA,Western blotting法鉴定其对Caski细胞PMF-1中表达的影响。用DEX处理PMF-1表达抑制的Caski细胞和对照细胞,然后分析PMF-1表达下调是否影响瘤细胞对DEX的敏感性。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,Western blotting法测定糖皮质激素受体(glucocorticoids receptor,GR)的表达水平,高效液相色谱法分析细胞内的多胺含量。结果:用靶向PMF-1基因的siRNA瞬时转染Caski细胞能显著性下调细胞中PMF-1蛋白的表达水平。与对照细胞相比,用DEX处理PMF-1表达下调的Caski细胞能更有效地抑制细胞增殖(P<0.01),上调细胞内GR表达水平(P<0.01),并显著抑制细胞分裂导致G2周期阻滞(P<0.01),同时能显著性地降低细胞内的多胺水平(P<0.01)。结论:抑制PMF-1表达可增强DEX对人宫颈癌细胞的抗肿瘤活性,其机制可能与降低细胞内多胺水平和增强细胞周期阻滞相关。 展开更多

关键词 多胺调节因子-1 宫颈癌细胞 CASKI细胞 地塞米松 药物敏感性

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KLKs促进肿瘤增殖、迁移与侵袭的分子机制 被引量：8

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作者 谢珂 郑卫红 谭潇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期935-941,共7页

组织激肽释放酶家族(kallikrein-related peptidases,KLKs)是一类具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶活性的分泌型丝氨酸蛋白酶,由15个成员(KLK1~15)组成。虽然发现较早,但关于其在肿瘤的发生与发展中所扮演的角色研究相对较少。KLKs作为肿瘤... 组织激肽释放酶家族(kallikrein-related peptidases,KLKs)是一类具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶活性的分泌型丝氨酸蛋白酶,由15个成员(KLK1~15)组成。虽然发现较早,但关于其在肿瘤的发生与发展中所扮演的角色研究相对较少。KLKs作为肿瘤标志物在临床上的应用也有相应报道,如KLK3(PSA)作为前列腺特异性抗原用于前列腺癌的筛查。近年研究发现,KLKs家族在肿瘤进程中发挥重要作用,被认为是调节肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的关键因素。本文概述了在肿瘤进展过程中KLKs作用机制的最新进展,为其作为抗肿瘤治疗靶点的研究提供理论基础。 展开更多

关键词 组织激肽释放酶家族 肿瘤 增殖 迁移 侵袭

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天花粉蛋白抗肿瘤作用及其机制的研究进展 被引量：16

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作者 李格 孙雨沛 黄益玲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期2037-2039,共3页

天花粉蛋白是从栝楼块根中提取出的一种Ⅰ型核糖体灭活蛋白,临床上用于异位妊娠、葡萄胎等疾病的治疗。近年来,关于天花粉蛋白抗肿瘤作用的研究日益增多,并且发现它对肺癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌等多种肿瘤细胞的生长有明显抑制作用... 天花粉蛋白是从栝楼块根中提取出的一种Ⅰ型核糖体灭活蛋白,临床上用于异位妊娠、葡萄胎等疾病的治疗。近年来,关于天花粉蛋白抗肿瘤作用的研究日益增多,并且发现它对肺癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌等多种肿瘤细胞的生长有明显抑制作用。本文将对天花粉蛋白抗肿瘤作用及其机制进行概述。 展开更多

关键词 天花粉蛋白 抗肿瘤作用 机制

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OAZI-1蛋白复合物在小鼠体内诱导特异性抗肿瘤效应的研究

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作者 吕亚丰 杨建林 +3 位作者 曹春雨 秦宇 王发玲 王艳林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1819-1823,共5页

目的:在实验动物的水平上分析来源于肿瘤细胞的鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)蛋白复合物能否在小鼠体内诱导特异性抗肿瘤效应。方法:用包被有OAZI-1抗体的免疫磁珠从B16-F1小鼠黑... 目的:在实验动物的水平上分析来源于肿瘤细胞的鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)蛋白复合物能否在小鼠体内诱导特异性抗肿瘤效应。方法:用包被有OAZI-1抗体的免疫磁珠从B16-F1小鼠黑色素瘤细胞中分离OAZI-1蛋白复合物,用此复合物免疫小鼠后,再在小鼠皮下接种B16-F1活细胞,然后观察接种瘤在小鼠体内的成瘤及生长状况。ELISA法用于检测免疫小鼠血清中IFN-γ含量。乳酸脱氢酶释放实验(LDH)检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞对B16-F1细胞的杀伤效应。上述动物实验用原核表达纯化的OAZI-1蛋白和PBS免疫的小鼠作为对照。结果:与对照小鼠相比,接种OAZI-1蛋白复合物的小鼠脾淋巴细胞(效应细胞)对B16-F1黑素瘤细胞(靶细胞)具有更强的杀伤能力。在三种不同的效∶靶比下(10∶1、50∶1、100∶1),该组小鼠脾淋巴细胞对靶细胞的杀伤活性分别为46.2%、59.5%和92.5%,显著性高于接种纯化OAZI-1蛋白组(36.1%、26.8%和45.9%)和接种PBS组(24.6%、24.0%和27.2%)小鼠脾淋巴细胞。此外,接种OAZI-1蛋白复合物的小鼠血清中抗肿瘤细胞因子IFN-γ含量(538.3 pg/ml)也显著性高于接种纯化OAZI-1蛋白组(256.2 pg/ml)和接种PBS组(131.0 pg/ml)小鼠。上述方法免疫的小鼠在皮下再接种B16-F1活细胞后,免疫OAZI-1蛋白复合物组小鼠成瘤率为40%,而PBS组和纯化OAZI-1蛋白组小鼠成瘤率为100%,且接种瘤在OAZI-1蛋白复合物免疫小鼠体内生长更为缓慢。结论:从B16-F1肿瘤细胞中分离的OAZI-1蛋白复合物中可能含有肿瘤抗原,用此复合物接种小鼠能在实验动物体内诱导抗肿瘤免疫杀伤活性。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子1(OAZI-1) 黑素瘤 免疫治疗 小鼠

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新型纳米递送系统在药物诱导肿瘤细胞焦亡中的应用 被引量：3

8

作者 杨梓萌 程文静 余祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期391-398,共8页

随着纳米递送系统(NDS)研发的快速发展和对于细胞焦亡机制的深入认识,将两者巧妙结合而形成的肿瘤治疗新策略已经在部分肿瘤的实验性治疗中取得一定效果。基于NDS的药物诱导肿瘤细胞焦亡的策略,能够克服单独使用小分子焦亡诱导剂的缺陷... 随着纳米递送系统(NDS)研发的快速发展和对于细胞焦亡机制的深入认识,将两者巧妙结合而形成的肿瘤治疗新策略已经在部分肿瘤的实验性治疗中取得一定效果。基于NDS的药物诱导肿瘤细胞焦亡的策略,能够克服单独使用小分子焦亡诱导剂的缺陷,如体内清除快、全身不良反应严重及肿瘤靶向能力弱等。现已有脂质体、水凝胶、聚合物胶束、金属-有机框架(MOF)和仿生细胞膜的纳米载体等多种NDS被用于构建诱导肿瘤细胞焦亡的纳米药物复合体。在此基础上,目前已发展了多种基于NDS药物诱导肿瘤细胞焦亡的策略,包括靶向肿瘤干细胞、干扰离子稳态、促进ROS产生、诱导表观遗传学改变及递送gasdermin(GSDM)家族蛋白等。然而,这些策略要应用于临床治疗,还面临对纳米生物相互作用机制认知不够等问题。未来研究中,在全面了解纳米材料与生物系统的相互作用的基础上,如能开发新型、安全的NDS并结合有效的焦亡诱导剂,靶向诱导肿瘤细胞焦亡从而克服凋亡逃逸及多药耐药,则有望为肿瘤患者带来福音。 展开更多

关键词 焦亡 纳米递送系统 肿瘤靶向 多药耐药

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酵母抽提物与姜黄素复合对急性酒精性肝损伤小鼠肠道菌群的调节作用 被引量：1

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作者 黄晓英 余海立 +2 位作者 郑明山 刘晓雯 张彦 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第15期25-33,共9页

目的:研究酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤的预防保护作用及其对肠道菌群的调节作用,并探讨其保护作用机制。方法:建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,分别给予酵母抽提物和姜黄素+酵母抽提物复合物,检测小鼠血... 目的:研究酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤的预防保护作用及其对肠道菌群的调节作用,并探讨其保护作用机制。方法:建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,分别给予酵母抽提物和姜黄素+酵母抽提物复合物,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotrans-ferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)和肝组织中总谷胱甘肽(Toal glutathione,T-GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(Malonicdialdehyde,MDA)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)的变化,观察肝组织病理切片损伤情况,分析肠道菌群等指标。结果:与模型组相比,酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物能够降低小鼠ALT、AST、MDA、TC和TG的水平,提高GSH-Px、TGSH的水平;肝组织切片表明,受试物明显改善酒精引起的肝细胞脂肪浸润和炎症浸润;肠道菌群分析表明,酒精性肝损伤小鼠肠道菌群结构发生变化,姜黄素+酵母抽提物复合物能有效恢复因酒精改变的不动杆菌属、普雷沃菌属、瘤胃球菌属的相对丰度,效果优于酵母抽提物。结论:酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能与调节氧化应激、脂质代谢、肠道菌群有关。 展开更多

关键词 酵母抽提物 姜黄素 急性酒精性肝损伤 肠道菌群

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DZNep通过下调EZH2蛋白表达抑制人前列腺癌PC3细胞增殖 被引量：2

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作者 李倩 王清 +2 位作者 杨建林 王艳林 曹春雨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第22期3689-3693,共5页

目的研究EZH2蛋白抑制剂DZNep对前列腺癌PC3细胞增殖的影响及其用于人前列腺癌治疗的潜在价值。方法 MTT分析DZNep处理、siRNA敲低EZH2和EZH2过表达对PC3细胞增殖的影响,Western blot检测EZH2和Bax/Bcl-2的表达。结果 DZNep抑制PC-3细... 目的研究EZH2蛋白抑制剂DZNep对前列腺癌PC3细胞增殖的影响及其用于人前列腺癌治疗的潜在价值。方法 MTT分析DZNep处理、siRNA敲低EZH2和EZH2过表达对PC3细胞增殖的影响,Western blot检测EZH2和Bax/Bcl-2的表达。结果 DZNep抑制PC-3细胞增殖、诱导细胞凋亡,上调Bax基因表达并下调Bcl-2基因表达。敲低EZH2抑制PC3细胞增殖,过表达EZH2则拮抗DZNep对PC3细胞的增殖抑制。结论 DZNep通过下调EZH2表达、诱导细胞凋亡发生从而抑制PC3细胞增殖。DZNep具有抗人前列腺癌治疗的潜在应用前景。 展开更多

关键词 EZH2 前列腺癌 细胞凋亡 DZNep PC3细胞

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新型SMO抑制剂SI-4650对人神经胶质瘤U87MG细胞增殖、凋亡和自噬能力的影响 被引量：4

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作者 周游 孙丽丹 +3 位作者 杨建林 秦宇 曹春雨 王艳林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期63-70,共8页

目的研究新型精胺氧化酶(spermine oxidase, SMO)小分子抑制剂SI-4650对人胶质瘤U87MG细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其分子机制。方法 MTT法检测细胞增殖情况;化学发光法检测SMO和乙酰多胺氧化酶(N^1-acetylpolyamine oxidase, APAO)的... 目的研究新型精胺氧化酶(spermine oxidase, SMO)小分子抑制剂SI-4650对人胶质瘤U87MG细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其分子机制。方法 MTT法检测细胞增殖情况;化学发光法检测SMO和乙酰多胺氧化酶(N^1-acetylpolyamine oxidase, APAO)的酶活性;高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内多胺含量;Transwell法分析U87MG细胞的迁移能力;PI单染后结合流式细胞术分析细胞周期;PI/FITC-Annexin V双染后结合流式细胞术、Western blot分析细胞凋亡;激光共聚焦显微镜(LSCM)和Western blot分析细胞自噬。结果 SI-4650可明显抑制U87MG细胞内SMO和APAO的酶活性,干扰多胺代谢,并降低U87MG细胞内总多胺含量。用SI-4650处理能抑制U87MG细胞的增殖和迁移能力,使细胞发生G_0/G_1周期阻滞,并诱导U87MG细胞发生凋亡和自噬性死亡。结论 SI-4650具有杀伤神经胶质瘤U87MG细胞的药理活性,其机制可能与干扰多胺代谢和诱导细胞凋亡和自噬相关。 展开更多

关键词 多胺代谢 SMO抑制剂 神经胶质瘤细胞 细胞增殖 凋亡 自噬

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外泌体与Wnt3a联合诱导间充质干细胞归巢及定向分化 被引量：4

12

作者 叶涛 李永忠 +5 位作者 付爱华 曹华平 喻璐 胡华明 刘晓雯 林华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期637-643,共7页

目的观察外泌体(exosome)联合Wnt3a蛋白刺激机体内源性干细胞归巢并定向分化后促进大鼠皮肤软组织缺损修复的过程。方法常规提取大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体,将外泌体联合Wnt3a蛋白作用于间充质干细胞,运用Western blot及qRT... 目的观察外泌体(exosome)联合Wnt3a蛋白刺激机体内源性干细胞归巢并定向分化后促进大鼠皮肤软组织缺损修复的过程。方法常规提取大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体,将外泌体联合Wnt3a蛋白作用于间充质干细胞,运用Western blot及qRT-PCR方法检测血管形成相关细胞表面标志物的表达,明确外泌体联合Wnt3a蛋白在体外对BMSCs的诱导分化作用。随后,制作大鼠大面积皮肤软组织缺损模型,组织创面注射外泌体和Wnt3a蛋白,采用免疫荧光染色、Western blot及qRT-PCR方法观察外泌体联合Wnt3a刺激机体内源性干细胞后产生的干细胞归巢效应,并对创面愈合率进行分析,以观察该联合方案对组织创面的修复效果。结果 qRT-PCR检测结果显示,与对照组BMSCs比较,Exosome+Wnt3a组中Klf4、Oct4表达明显下降(均P<0.01),周细胞标记物NG2、血管内皮细胞标志物VEGF和CD31、血管平滑肌细胞标志物α-SMA的mRNA表达均升高,证实BMSCs产生分化。在大鼠大面积皮肤软组织缺损模型中,Exosome+Wnt3a组大鼠伤口创面在第16天愈合率达(93.05±2.72)%,明显高于其它组(P<0.01)。肉芽组织和伤口成熟度评分结果显示,Exosome+Wnt3a组在术后第11天的评分高于假手术组(P<0.01),而且第9天出现了大量的新生血管,与假手术组比较差异有统计学意义[(48.260±1.821)个/mm^2 vs.(8.484±1.291)个/mm^2,P<0.01]。免疫荧光染色结果显示,大鼠组织创面成熟血管数量在外泌体联合Wnt3a治疗后明显多于假手术组[(28.536±1.882)个/mm^2vs.(4.712±1.883)个/mm^2,P<0.01]。结论外泌体及Wnt3a蛋白可定向诱导BMSCs分化,促进成熟肉芽组织沉积,加速创面血管形成,进一步促进组织创面修复,为临床上慢性创面的细胞治疗提供了新的思路。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 WNT3A 归巢 定向分化 创面再生

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人抗酶抑制因子-1的原核表达纯化及多克隆抗体的制备 被引量：5

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作者 吕亚丰 杨建林 +1 位作者 秦宇 王艳林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期193-198,共6页

原核表达纯化人抗酶抑制因子-1((antizyme inhibition factor-1,AZIN1),制备并鉴定抗AZIN1多克隆抗体。p ET-28a/AZIN1表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导蛋白表达,利用Ni-NTA树脂于变性条件下亲和层析纯化人AZIN1蛋白。将重组AZ... 原核表达纯化人抗酶抑制因子-1((antizyme inhibition factor-1,AZIN1),制备并鉴定抗AZIN1多克隆抗体。p ET-28a/AZIN1表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导蛋白表达,利用Ni-NTA树脂于变性条件下亲和层析纯化人AZIN1蛋白。将重组AZIN1蛋白用作抗原免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体,ELISA检测抗AZIN1抗体效价,Western bloting、细胞免疫荧光、细胞免疫化学方法检测抗体的应用。结果显示,重组p ET-28a/AZIN1表达质粒经酶切及测序鉴定构建正确。细菌内重组AZIN1蛋白可被IPTG诱导表达并以包涵体的形式存在。用亲和层析法能有效纯化原核表达的AZIN1蛋白,该蛋白在小鼠体内能够诱导抗AZIN1特异性抗体产生,血清效价达到1640 000。制备抗体能够特异性识别和结合人及小鼠瘤细胞中表达的AZIN1蛋白,并可有效用于AZIN1的Western blotting、细胞免疫荧光和细胞免疫化学分析。成功原核表达和纯化了人AZIN1蛋白并制备了抗AZIN1多克隆抗体,为深入研究AZIN1在调控细胞增殖及在疾病防治中的作用提供了研究基础。 展开更多

关键词 抗酶抑制因子 原核表达 抗体

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力达霉素对人宫颈癌Hela细胞周期、凋亡、自噬和上皮细胞间质转化能力的影响 被引量：2

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作者 徐珊 周游 +4 位作者 刘钰妮 王世恩 杨建林 王艳林 曹春雨 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1406-1415,共10页

目的研究力达霉素(LDM)对Hela细胞的细胞周期、凋亡、自噬和上皮细胞间质转化(EMT)的影响及其分子机制。方法MTT法分析LDM对Hela细胞增殖的影响;流式细胞术检测LDM对Hela细胞的细胞周期、细胞凋亡的影响;Westernblot检测细胞内相关蛋白... 目的研究力达霉素(LDM)对Hela细胞的细胞周期、凋亡、自噬和上皮细胞间质转化(EMT)的影响及其分子机制。方法MTT法分析LDM对Hela细胞增殖的影响;流式细胞术检测LDM对Hela细胞的细胞周期、细胞凋亡的影响;Westernblot检测细胞内相关蛋白的表达水平;Transwell法分析LDM对Hela细胞迁移、侵袭能力的影响;QT-PCR分析LDM对Hela细胞赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)表达的影响。结果LDM明显抑制Hela细胞增殖,其不同处理时间的IC50值分别为19.24ng·mL^-1(24h)、6.678ng·mL^-1(48h)和3.221ng·mL^-1(72h)。LDM可诱导Hela细胞发生G2/M期阻滞和细胞凋亡。低浓度LDM(5ng·mL^-1)可诱导Hela细胞发生自噬,但高浓度LDM(20ng·mL^-1)则抑制Hela细胞的自噬水平。LDM抑制Hela细胞迁移和侵袭,改变EMT相关因子的蛋白表达水平,且这一过程与LSD1无关。结论LDM能抑制宫颈癌Hela细胞增殖和侵袭转移,其作用机制可能与阻遏细胞周期、诱导细胞凋亡、干扰细胞自噬和抑制EMT密切相关。 展开更多

关键词 力达霉素 宫颈癌 HELA细胞 细胞凋亡 细胞自噬 上皮细胞间质转化

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天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗增敏作用 被引量：1

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作者 谭顺梓 向珺昱 +3 位作者 夏玉桦 尤程程 黄利鸣 黄益玲 《医药导报》 CAS 北大核心 2023年第7期953-958,共6页

目的观察天花粉(TCS)联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化学治疗(化疗)增敏作用,并探讨其作用机制。方法细胞计数检测试剂盒(CCK8)法检测TCS、顺铂单独或联合用药对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;CompuSyn软件分析TCS联合顺铂的联合用药指数(CI值)... 目的观察天花粉(TCS)联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化学治疗(化疗)增敏作用,并探讨其作用机制。方法细胞计数检测试剂盒(CCK8)法检测TCS、顺铂单独或联合用药对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;CompuSyn软件分析TCS联合顺铂的联合用药指数(CI值);细胞划痕实验与Transwell法检测药物对细胞迁移的影响;流式细胞术检测药物对细胞凋亡的影响;蛋白印迹法检测药物对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果TCS与顺铂均能抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,TCS+顺铂抑制作用更强,TCS对顺铂增敏指数为3.04;不同浓度TCS联合顺铂作用HeLa细胞48 h后,CI值均<1,且具有浓度依赖性(P<0.05);细胞划痕实验与Transwell法实验中,TCS+顺铂较TCS或顺铂单独给药能更明显抑制HeLa细胞迁移(P<0.05);流式细胞术中,与TCS或顺铂单独给药相比,TCS+顺铂可增加HeLa细胞凋亡比例(P<0.05);蛋白印迹实验中,与TCS或顺铂相比,TCS+顺铂可上调促凋亡蛋白Bax、c-PARP表达,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<0.05)。结论TCS+顺铂对抑制宫颈癌HeLa细胞生长具有协同效应,TCS对顺铂化疗有增敏作用,其机制可能与TCS联用后促进HeLa细胞凋亡及抑制细胞迁移有关。 展开更多

关键词 天花粉蛋白 顺铂 宫颈癌 化学治疗增敏

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优降宁与多柔比星协同抑制小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞的增殖和迁移 被引量：7

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作者 任雪 王世恩 +5 位作者 汪湘 陈倩影 张浩 谈恒星 夏燕 曹春雨 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期571-578,共8页

目的研究赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine-specifc demethylase 1,LSD1)抑制剂优降宁(Pargyline)与化疗药物多柔比星(Doxorubicin)联合应用对小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法体外实验以小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞... 目的研究赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine-specifc demethylase 1,LSD1)抑制剂优降宁(Pargyline)与化疗药物多柔比星(Doxorubicin)联合应用对小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法体外实验以小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞为模型,以CCK-8法、乳酸脱氢酶释放实验、Chou-Talay法、划痕实验、Transwell实验、Western blot等试验方法检测两药联合对4T-1细胞增殖、侵袭、迁移的影响;构建荷瘤小鼠模型研究两药联用对4T-1细胞体内增殖的影响。结果优降宁和多柔比星可有效抑制4T-1细胞增殖、迁移和侵袭,两药联用具有协同效应,且无明显细胞毒性。体内实验证明,与单用药组相比,两药联用可明显抑制乳腺癌的体内增殖并延长三阴性乳腺癌4T-1细胞荷瘤小鼠的生存期。结论优降宁与多柔比星联合应用对小鼠乳腺癌4T-1细胞的增殖、迁移和侵袭具有协同抑制效应,具有用于临床三阴性乳腺癌治疗的潜在价值。 展开更多

关键词 优降宁 多柔比星 联合用药 三阴性乳腺癌 4T-1细胞 上皮间质转化

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AAV9衣壳蛋白VP的原核表达、纯化及多克隆抗体制备 被引量：1

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作者 张浩 李舒月 +4 位作者 张雄洲 谈恒星 杨建林 曹春雨(指导) 吕亚丰(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期833-837,共5页

目的:表达腺相关病毒(AAV)9型衣壳蛋白VP,制备抗VP蛋白的多克隆抗体。方法:使用PCR技术从AAV9病毒包装质粒中扩增AAV9衣壳蛋白VP,同源重组法构建衣壳蛋白表达质粒pET30a-AAV9-VP。质粒转化表达菌E.coli BL21(DE3)后,IPTG诱导目的蛋白VP... 目的:表达腺相关病毒(AAV)9型衣壳蛋白VP,制备抗VP蛋白的多克隆抗体。方法:使用PCR技术从AAV9病毒包装质粒中扩增AAV9衣壳蛋白VP,同源重组法构建衣壳蛋白表达质粒pET30a-AAV9-VP。质粒转化表达菌E.coli BL21(DE3)后,IPTG诱导目的蛋白VP表达,亲和层析法纯化VP蛋白,将纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔,3次免疫后获得针对VP蛋白的兔多克隆抗体。以Western blot和细胞免疫荧光法检测抗体的应用,ELISA检测所得抗体的效价。结果:成功构建pET30a-AAV9-VP表达质粒,在大肠杆菌BL21中,IPTG可诱导VP蛋白表达。亲和层析法纯化获得高纯度的VP蛋白。该蛋白在日本大耳兔体内能够诱导产生多克隆抗体,ELISA检测抗血清效价达到1∶512 000。结论:成功原核表达和纯化AAV9衣壳蛋白VP并制备了兔多克隆抗体。制备的抗AAV9 VP抗体能够特异性识别和结合AAV衣壳蛋白,并可有效用于Western blot和细胞免疫荧光分析,为后续深入研究AAV9在基因治疗中的作用及AAV9载体开发提供了研究基础。 展开更多

关键词 原核蛋白纯化 腺相关病毒9 多克隆抗体

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布拉迪酵母源后生元的研究进展与应用前景

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作者 袁雪梅 王虎 +2 位作者 余海立 刘晓雯 张彦 《中国酿造》 2025年第8期15-21,共7页

布拉迪酵母(Saccharomyces boulardii)是一种非致病的酵母菌,也是为人所熟知的具有益生特性的酵母。自发现以来,布拉迪酵母已在全球范围内被广泛用于保健品和医疗产品中,是一种具有多种生物活性的酵母菌。临床研究证明布拉迪酵母可改善... 布拉迪酵母(Saccharomyces boulardii)是一种非致病的酵母菌,也是为人所熟知的具有益生特性的酵母。自发现以来,布拉迪酵母已在全球范围内被广泛用于保健品和医疗产品中,是一种具有多种生物活性的酵母菌。临床研究证明布拉迪酵母可改善肠道疾病、肠易激综合征和幽门螺杆菌感染,在体内具有抗癌、免疫调节、抗菌、抗病毒和抗氧化等功能。近年来,随着微生物生态学和营养学的发展,布拉迪酵母源后生元的研究引起了科研界的广泛关注,但对布拉迪酵母源后生元的研究仍处于起步阶段,该文从此角度综述布拉迪酵母的生物学特性及其在机体内的作用机制,以及布拉迪酵母源后生元在食品和药物上的应用前景,以期为布拉迪酵母源后生元的广泛应用提供理论基础。 展开更多

关键词 布拉迪酵母 后生元 应用 食品 药物

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