肿瘤细胞免疫原性死亡相关分子的研究进展 被引量：6

1

作者 王清 王艳林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期109-111,共3页

用多种化学药物和放射线治疗肿瘤时,肿瘤细胞可发生免疫原性细胞死亡,即肿瘤细胞在发生凋亡的同时,由非免疫原性的细胞转变为具有免疫原性的细胞,并在机体内激发抗肿瘤免疫效应。肿瘤细胞的免疫原性死亡是一种有多种信号分子和细胞因子... 用多种化学药物和放射线治疗肿瘤时,肿瘤细胞可发生免疫原性细胞死亡,即肿瘤细胞在发生凋亡的同时,由非免疫原性的细胞转变为具有免疫原性的细胞,并在机体内激发抗肿瘤免疫效应。肿瘤细胞的免疫原性死亡是一种有多种信号分子和细胞因子参与的复杂过程,这些分子的细胞定位和表达水平的改变直接影响死亡肿瘤细胞与免疫细胞之间的相互作用。对肿瘤细胞免疫原性死亡机制的深入研究可为肿瘤的免疫治疗提供新的依据和手段。本文简要综述了与肿瘤细胞免疫原性死亡相关分子的研究进展。 展开更多

关键词 免疫原性细胞死亡 树突状细胞 钙网蛋白 热休克蛋白 高迁移率族蛋白B 三磷酸腺苷

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小鼠可溶性PD1的克隆、真核表达及生物学活性检测 被引量：2

2

作者 覃晓琳 刘朝奇 +2 位作者 唐国慧 金羽 孙俪 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期121-125,共5页

旨在克隆小鼠PD1胞外区(简称mPD-1)基因,利用真核表达系统表达有活性的分泌型mPD-1蛋白,初步研究其生物学活性。克隆mPD-1基因,将其连入pcDNA3.1(+)/Fc中获得pcDNA3.1(+)-Fc/mPD-1重组表达质粒,转化至大肠杆菌DH5α,进行PCR和双酶切鉴定... 旨在克隆小鼠PD1胞外区(简称mPD-1)基因,利用真核表达系统表达有活性的分泌型mPD-1蛋白,初步研究其生物学活性。克隆mPD-1基因,将其连入pcDNA3.1(+)/Fc中获得pcDNA3.1(+)-Fc/mPD-1重组表达质粒,转化至大肠杆菌DH5α,进行PCR和双酶切鉴定,并送测序。将阳性质粒转染L929细胞,利用RT-PCR和Western blotting方法鉴定mPD-1/L929稳定表达株。利用Alamar Blue法检测分泌的mPD-l蛋白对淋巴细胞增殖的影响,评价其生物学活性。结果显示,成功构建重组质粒pcDNA3.1(+)-Fc/mPD-1,转染了pcDNA3.1(+)-Fc/mPD-1的L929细胞可将mPD-l蛋白分泌至胞外。A lamar Blue检测结果显示,真核细胞分泌的mPD-1蛋白作用于混合淋巴细胞,与阴性对照相比,可明显促进淋巴细胞的增殖。本试验成功地克隆mPD-1胞外区蛋白,并在L929细胞中得到了分泌型表达。分泌的重组蛋白可有效促进淋巴细胞增殖,为进一步研究其功能和临床应用提供了条件。 展开更多

关键词 Fc-PD-1 真核表达 淋巴细胞增殖

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人IL-6基因的克隆及其在原核生物中表达及条件的优化 被引量：6

3

作者 史继静 刘朝奇 +1 位作者 杨凡 杨祖伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期135-140,共6页

构建人白细胞介素6(IL-6)的原核表达载体并优化其表达条件,为IL-6的高效表达提供试验依据。以人T细胞cDNA为模板通过PCR方法扩增IL-6基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌BL21... 构建人白细胞介素6(IL-6)的原核表达载体并优化其表达条件,为IL-6的高效表达提供试验依据。以人T细胞cDNA为模板通过PCR方法扩增IL-6基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,产物用Western blotting及人IL-6检测试剂盒分析鉴定。在保持菌种不改变的前提下,分别改变IPTG的浓度、培养时间、卡那霉素浓度、培养温度等来优化IL-6表达条件。结果显示,原核表达载体pET28 a(+)-IL-6成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约22 kD的IL-6蛋白,经Western blotting鉴定正确,经人IL-6试剂盒检测显示具有较高的免疫活性。在IPTG浓度400μmol/mL,卡那霉素浓度50μg/mL,40℃培养6 h的条件下,目的蛋白表达量最高,可占总蛋白表达量的40%。成功构建人IL-6原核表达载体且获高效表达,为研究IL-6生物学活性及产品开发提供了试验基础。 展开更多

关键词 IL-6 原核表达 条件优化

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HIV-1 Nef通过Erk/Mapk途径调节内皮细胞黏附分子ICAM-1的表达 被引量：3

4

作者 杨凡 刘朝奇 +1 位作者 覃晓琳 史继静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期44-46,共3页

目的:研究HIV-1Nef基因对内皮细胞ECV304细胞ICAM-1表达的影响及其信号途径。方法:选用Nef基因稳定表达细胞株ECV304-Nef和对照细胞株ECV304pcDNA3.1(+),应用Westernblot分析ECV304-Nef细胞ERK的磷酸化水平,利用ERK磷酸化抑制剂通过West... 目的:研究HIV-1Nef基因对内皮细胞ECV304细胞ICAM-1表达的影响及其信号途径。方法:选用Nef基因稳定表达细胞株ECV304-Nef和对照细胞株ECV304pcDNA3.1(+),应用Westernblot分析ECV304-Nef细胞ERK的磷酸化水平,利用ERK磷酸化抑制剂通过Westernblot、流式细胞术分析ECV304-Nef细胞ICAM-1的表达水平与信号分子ERK磷酸化的相关性。结果:Westernblot显示ECV304-Nef细胞ICAM-1和p-ERK蛋白的表达水平均高于对照组;流式细胞术检测结果表明ECV304-Nef细胞和对照组ICAM-1阳性细胞百分率分别为(35.3±2.2)%和(12.5±0.8)%(P<0.01)。加入p-ERK抑制剂PD98059后,ECV304-Nef细胞p-ERK水平被显著抑制,ICAM-1降至对照组水平,ECV304-Nef细胞和对照组细胞ICAM-1阳性细胞百分率分别为(11.4±1.1)%和(10.4±1.5)%(P>0.05)。结论:HIV-1Nef基因上调血管内皮细胞细胞黏附分子ICAM-1的表达与ERK信号分子磷酸化有关,为HIV-1感染的致病机制及临床治疗提供实验基础。 展开更多

关键词 HIV-1 NEF ICAM-1 血管内皮细胞 信号转导

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脓毒症免疫干预措施的研究进展 被引量：8

5

作者 汤超 刘朝奇 韩强 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1020-1022,共3页

脓毒症的发生与机体免疫功能紊乱密切相关。脓毒症早期机体可能表现为失控的持久性炎症反应,晚期则出现免疫抑制,表现为淋巴细胞凋亡,使机体的易感性增加。深入探讨脓毒症免疫干预措施,可为其预防与治疗开拓更广阔的思路与更合理的方案。

关键词 脓毒症 免疫 综述

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Toll样受体调控适应性免疫应答的研究进展 被引量：7

6

作者 刘晓艳 盛德乔 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1137-1140,共4页

Toll样受体(TLR)属于天然免疫受体,可通过模式识别受体识别病原相关分子模式的识别分子激活固有免疫应答。TLR在适应性免疫应答调控过程中也发挥重要作用,是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁。TLR信号通路不仅可通过调控树突状细胞的发... Toll样受体(TLR)属于天然免疫受体,可通过模式识别受体识别病原相关分子模式的识别分子激活固有免疫应答。TLR在适应性免疫应答调控过程中也发挥重要作用,是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁。TLR信号通路不仅可通过调控树突状细胞的发育和成熟影响抗原提呈,还可调控抗原提呈细胞表面共刺激分子的表达来调控适应性免疫应答;而且,TLR信号通路可调控多种细胞因子的分泌,从而影响T细胞发育和成熟,调控适应性免疫应答。本文将就TLR信号通路调控适应性免疫应答的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 TOLL受体 树突状细胞 共刺激分子 细胞因子 适应性免疫反应 综述

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多胺类似物双乙基去甲精胺联合阿司匹林高效杀伤宫颈癌Caski细胞的研究 被引量：2

7

作者 杨建林 韩钰 +1 位作者 王艳林 张伟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第15期2443-2447,共5页

目的:研究多胺类似物双乙基去甲精胺(BENS)与阿司匹林联用对宫颈癌Caski细胞的生长影响以及可能的细胞学机制。方法:多胺类似物BENS联用阿司匹林孵育体外培养的人宫颈癌Caski细胞,采用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞存活率,DNA Ladder以及流... 目的:研究多胺类似物双乙基去甲精胺(BENS)与阿司匹林联用对宫颈癌Caski细胞的生长影响以及可能的细胞学机制。方法:多胺类似物BENS联用阿司匹林孵育体外培养的人宫颈癌Caski细胞,采用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞存活率,DNA Ladder以及流式细胞术观察各组细胞周期和凋亡率变化,Western blot检测Bcl-2、Bax和cyt-C凋亡相关基因的表达情况,化学发光法测定精胺氧化酶(SMO)活性。结果:BENS与阿司匹林联用能显著降低单用BENS的细胞存活率(P<0.05),同时低剂量阿司匹林就能显著增强BENS诱导细胞凋亡作用(P<0.01)。联合用药组与单独用药组相比较,细胞G0/G1期比例明显升高,S期和G2/M期比例下降;诱导细胞凋亡发生;胞浆中Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,cyt-C由线粒体释放。且SMO活性无明显改变。结论:联用低剂量阿司匹林能有效增强BENS诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用,但与多胺代谢过程无关。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 癌多胺类似物 BENS 阿司匹林 CASKI细胞 细胞凋亡

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Nrf2及其相关抗氧化基因的miRNA调控研究进展 被引量：4

8

作者 覃玉娥 刘朝奇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期34-37,共4页

Nrf2在机体抗氧化、维护机体正常生理功能具有重要作用。MicroRNAs(miRNAs)是真核生物中调控基因表达的一类内源性非编码RNA,其大小长约20-25个核苷酸。围绕机体抗氧化相关基因调控的miRNA最新研究进展作一综述。

关键词 MIRNAS NRF2 抗氧化基因 基因调节

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钙网蛋白通过内质网应激介导细胞凋亡的分子机制 被引量：3

9

作者 吴薇 刘朝奇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期24-27,共4页

钙网蛋白(Calreticulin,CRT)是46 kD大小的内质网管腔蛋白,具有分子伴侣活性、调节内钙稳态以及细胞凋亡等多种生物学功能。内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)是内质网生理功能发生紊乱的一种亚细胞器病理过程,早期反应是... 钙网蛋白(Calreticulin,CRT)是46 kD大小的内质网管腔蛋白,具有分子伴侣活性、调节内钙稳态以及细胞凋亡等多种生物学功能。内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)是内质网生理功能发生紊乱的一种亚细胞器病理过程,早期反应是可逆的,但随着细胞损伤加重将会导致细胞的凋亡,即为内质网应激启动的细胞凋亡。新的研究显示,CRT在该凋亡途径中扮演着重要角色。从三方面综述两者间的相互关系,以期为该方向的研究人员提供一些参考。 展开更多

关键词 钙网蛋白 分子伴侣蛋白 内质网应激 细胞凋亡

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EZH2作为抗肿瘤免疫治疗靶点研究进展 被引量：3

10

作者 李倩 王艳林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期29-32,共4页

多梳蛋白复合体(PcG)的核心亚基zeste基因增强子同源物2(Enhancer of zeste homolog2,EZH2)是一种组蛋白甲基转移酶,参与维持细胞密度、干细胞多能性、细胞周期调节等重要的生理作用。研究发现,EZH2在多种肿瘤组织中高表达,是促进肿瘤... 多梳蛋白复合体(PcG)的核心亚基zeste基因增强子同源物2(Enhancer of zeste homolog2,EZH2)是一种组蛋白甲基转移酶,参与维持细胞密度、干细胞多能性、细胞周期调节等重要的生理作用。研究发现,EZH2在多种肿瘤组织中高表达,是促进肿瘤发生和发展的致癌因子。由于EZH2在正常组织中低表达或者不表达,使其新近被鉴定为一种肿瘤相关抗原。已经在EZH2蛋白分子中鉴定出多条特异性抗原肽,这些抗原肽能激发机体免疫细胞对EZH2表达异常增高肿瘤细胞的杀伤活性。上述研究提示,EZH2可能是一种新的抗肿瘤治疗分子靶点,并在肿瘤免疫治疗中具有潜在的应用价值。就该领域的最新研究进展作一简要综述。 展开更多

关键词 EZH2 分子靶点 抗肿瘤免疫 肿瘤相关抗原

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mPD-1/mPD-L1体外分子结合模型的建立 被引量：2

11

作者 覃晓琳 刘朝奇 +1 位作者 杨凡 郑兰英 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期385-389,共5页

目的建立小鼠PD-1/PD-L1(mPD-1/mPD-L1)体外分子结合模型,为研究PD-1/PD-L1生物学活性及建立高通量药物筛选分子模型奠定基础。方法重组质粒在原核细胞表达mPD-1和mPD-L1蛋白,利用亲和层析及切胶方法纯化相应蛋白;应用ELISA和GSTPull-d... 目的建立小鼠PD-1/PD-L1(mPD-1/mPD-L1)体外分子结合模型,为研究PD-1/PD-L1生物学活性及建立高通量药物筛选分子模型奠定基础。方法重组质粒在原核细胞表达mPD-1和mPD-L1蛋白,利用亲和层析及切胶方法纯化相应蛋白;应用ELISA和GSTPull-down方法验证mPD-1与其配体mPD-L1蛋白的结合活性;以Alamar blue法检测纯化mPD-1和mPD-L1蛋白混合物对混合淋巴细胞增殖的影响。结果SDS-PAGE和Western印迹结果显示原核表达的重组蛋白与预期基本一致,经过亲和层析和切胶、复性等方式获得了纯化的mPD-1和mPD-L1蛋白。ELISA和GSTpull-down结果表明,mPD-1和mPD-L1蛋白具有体外结合的活性。淋巴细胞增殖试验进一步说明两蛋白的结合可一定程度上降低单独蛋白对淋巴细胞增殖的影响(P<0.05)。结论利用原核细胞高效表达并纯化的mPD-1、mPD-L1蛋白成功建立体外mPD-1/mPD-L1分子结合模型,为高通量药物初筛奠定了基础。 展开更多

关键词 mPD-1 mPD-L1 分子模型 淋巴细胞增殖

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非酒精性脂肪性肝病中Toll样受体活化与microRNA调控的研究进展 被引量：1

12

作者 田慧群 刘朝奇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期428-431,共4页

小RNA(miRNA)作为细胞内一类非编码RNA参与了细胞内多种生物功能的调节。研究发现,与正常人相比,非酒精性脂肪性肝病患者体内的多种miRNA表达异常,并且发现这种异常表达会促使患者由单纯的肝脏脂肪变性向非酒精脂肪性肝炎转变。在这个... 小RNA(miRNA)作为细胞内一类非编码RNA参与了细胞内多种生物功能的调节。研究发现,与正常人相比,非酒精性脂肪性肝病患者体内的多种miRNA表达异常,并且发现这种异常表达会促使患者由单纯的肝脏脂肪变性向非酒精脂肪性肝炎转变。在这个转变过程中,作为启动机体免疫应答的一类模式识别受体,Toll样受体(TLR)的激活以及其介导的下游炎性因子的表达促使非酒精性肝炎的发生,而持续的炎性反应会引起肝脏发生纤维化,继而导致肝脏功能障碍,甚至发展成肝癌。本文简述了miRNA在非酒精性脂肪性肝病患者体内的差异性表达,及其与TLR信号通路的激活以及疾病恶化的关系。 展开更多

关键词 小RNA TOLL样受体 非酒精性脂肪性肝炎 综述

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miRs调节HIV-1与机体相互作用的研究进展

13

作者 田慧群 刘朝奇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1433-1435,共3页

miRs是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它参与细胞内多种基因表达的调节继而影响细胞功能。研究表明肝脏内丰富的miR-122是丙型肝炎病毒HCV的复制是所需的,目前用于治疗丙型肝炎的miR-122抑制剂已处于Ⅱ期... miRs是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它参与细胞内多种基因表达的调节继而影响细胞功能。研究表明肝脏内丰富的miR-122是丙型肝炎病毒HCV的复制是所需的,目前用于治疗丙型肝炎的miR-122抑制剂已处于Ⅱ期临床实验,而HIV-1感染患者常合并HCV感染,由此有许多研究者开始研究miRs在HIV-1的入侵及复制过程中是否具有调节作用,本文综述了这方面的最新研究进展。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 MIRS 基因表达 内源基因 复制过程 RNA 病毒基因 转染 DICER 疱疹病毒

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MicroRNA与HPV相关性在宫颈癌中研究进展

14

作者 冯晶 李志英 刘朝奇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第20期3429-3430,共2页

MicroRNAs（miRNAs）是一类大小21～25bp非编码调节性RNA，通过完全或不完全碱基互补结合于靶mRNA3’非翻译区（3’UTR），导致靶mRNA降解或抑制其翻译，在转录后水平调节基因表达。miRNA异常表达在人类肿瘤十分常见．是当前肿瘤领域的... MicroRNAs（miRNAs）是一类大小21～25bp非编码调节性RNA，通过完全或不完全碱基互补结合于靶mRNA3’非翻译区（3’UTR），导致靶mRNA降解或抑制其翻译，在转录后水平调节基因表达。miRNA异常表达在人类肿瘤十分常见．是当前肿瘤领域的研究热点。宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，其发病率以全球每年新增50万病例位，曝第2位，严重威胁广大妇女的身心健康.高危型HPV（HPVl6、HPVl8）感染是宫颈癌发生的主要原因。 展开更多

关键词 MICRORNA HPV 相关性 宫颈癌

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多胺类似物CPENSpm通过干扰多胺代谢抑制肺癌细胞的增殖 被引量：15

15

作者 王艳林 韩钰 +2 位作者 袁太宁 曹春雨 周永琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期132-135,共4页

目的研究多胺类似物CPENSpm对肺癌细胞株A549增殖和细胞凋亡的影响,以探讨CPENSpm抗肿瘤的作用机制。方法MTS法分析细胞的增殖速度,化学分析法测定多胺代谢酶的活性,HPLC法分析细胞内的多胺含量,亚凋亡峰测定法和DNA片段化分析法鉴定细... 目的研究多胺类似物CPENSpm对肺癌细胞株A549增殖和细胞凋亡的影响,以探讨CPENSpm抗肿瘤的作用机制。方法MTS法分析细胞的增殖速度,化学分析法测定多胺代谢酶的活性,HPLC法分析细胞内的多胺含量,亚凋亡峰测定法和DNA片段化分析法鉴定细胞程序性凋亡。结果CPENSpm处理A549肺癌细胞可导致:①癌细胞生长抑制并激发细胞凋亡;②抑制多胺合成关键酶ODC的活性,活化多胺降解代谢关键酶SSAT和SMO的活性;③耗竭细胞内多胺含量。SMO抑制剂MDL72527可拮抗CPENSpm对A549细胞的生长抑制作用。结论CPENSpm通过干扰A549细胞的多胺代谢途径,耗竭肿瘤快速生长必需的多胺成分,诱导产生活性氧H2O2从而抑制癌细胞生长并激发细胞程序性凋亡。 展开更多

关键词 CPENSpm 肺癌细胞 多胺代谢 多胺类似物

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四丁基丙二胺对人MG63骨髓瘤细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响 被引量：6

16

作者 张贺吉 王凯 +2 位作者 韩钰 杨建林 王艳林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期974-977,共4页

目的分析新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutylpropanediamine,TBP)对人骨髓瘤MG63细胞生长的影响及其机制。方法 MTT法用于分析细胞增殖,流式细胞分析用于细胞周期和凋亡细胞鉴定,琼脂糖凝胶电泳用于分析DNA片段化,Western blot用于分... 目的分析新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutylpropanediamine,TBP)对人骨髓瘤MG63细胞生长的影响及其机制。方法 MTT法用于分析细胞增殖,流式细胞分析用于细胞周期和凋亡细胞鉴定,琼脂糖凝胶电泳用于分析DNA片段化,Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白的表达水平,Transwell技术用于分析细胞的迁移能力。结果TBP明显抑制MG63细胞的增殖和迁移能力,抑制效应呈时间和剂量依赖性。流式细胞分析发现,TBP干扰细胞周期,导致G1和G2期细胞比例升高,但S期细胞比例明显下降,同时凋亡细胞数量大幅增加。TBP处理后,细胞染色体DNA出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象,细胞质中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。结论 TBP具有抑制人骨髓瘤MG63细胞增殖的药理活性,其机制与抑制细胞周期和诱导细胞凋亡有关,提示TBP具有用于临床骨髓瘤治疗的潜在价值。 展开更多

关键词 多胺 多胺类似物 骨髓瘤细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移

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木瓜对小鼠非酒精性脂肪肝形成的预防作用 被引量：6

17

作者 李斌 刘朝奇 +5 位作者 史继静 董满满 李梦培 刘茜 覃晓琳 吕佰瑞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期258-261,共4页

目的:复制小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,观察木瓜对此模型的影响。方法:高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制小鼠非酒精性脂肪肝模型,在高脂饮食中添加木瓜对其进行干预,与正常饮食组对照。喂养5周后检测血清肝脏酶学(ALT、AST)、血... 目的:复制小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,观察木瓜对此模型的影响。方法:高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制小鼠非酒精性脂肪肝模型,在高脂饮食中添加木瓜对其进行干预,与正常饮食组对照。喂养5周后检测血清肝脏酶学(ALT、AST)、血脂(TG、CHO)水平;肝组织切片染色,显微镜观察肝组织病理变化;提取肝脏总RNA检测TLR-2、TLR-4、IL-1β、TGF-β、PD-L1等基因的表达情况,并进行统计学分析。结果:与正常组相比,模型组血清的肝功能和脂质水平上升,肝细胞形态明显改变,肝索消失或不清晰,相应基因表达水平上调;与模型组相比,木瓜干预组血清肝功能指标和脂质水平均显著下降,肝细胞气球样变较少,无明显肝细胞坏死,肝索存在,肝组织TLR和炎性因子表达水平明显下调。结论:木瓜对高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝有一定预防效果,该效应的发挥可能是通过调节TLR受体及死亡配受体表达,炎性因子的分泌而实现的。 展开更多

关键词 木瓜 非酒精性脂肪肝 预防 基因表达

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木瓜发酵液对小鼠四氯化碳诱发肝损伤的防护作用 被引量：7

18

作者 汤超 汤文凡 +5 位作者 黄玉琴 李亚坤 赵超 沈雪莲 韩强 刘朝奇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第13期271-274,共4页

目的:建立四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤模型,在组织形态学和分子水平观察木瓜发酵液对小鼠肝脏损伤的预防和保护作用。方法:普通昆明小鼠随机分组,CCl4注射昆明种小鼠制备急性肝损伤模型,应用木瓜发酵液进行小鼠灌胃,然后测定各组血... 目的:建立四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤模型,在组织形态学和分子水平观察木瓜发酵液对小鼠肝脏损伤的预防和保护作用。方法:普通昆明小鼠随机分组,CCl4注射昆明种小鼠制备急性肝损伤模型,应用木瓜发酵液进行小鼠灌胃,然后测定各组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,HE染色观察肝组织病理变化,RT-PCR法检测肝组织炎性因子TGF-β、IL-1β和TLR4 mRNA水平变化。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠血清ALT和AST活性升高(P<0.05),提示肝损伤模型成功。与模型组比较,药物干预后小鼠血清ALT和AST活性显著降低(P<0.05),肝组织TGF-β、TLR4、IL-1βmRNA水平均有所降低。HE染色显示,药物组小鼠肝组织学得到明显改善,尤其是在高剂量组。结论:木瓜发酵液对CCl4诱导的急性肝损伤有一定的防护作用,其可能开发为肝毒性损伤治疗的新药物。 展开更多

关键词 急性肝损伤 四氯化碳 木瓜发酵液 免疫保护

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miRNA在宫颈癌早期诊断中的应用及其价值探讨 被引量：11

19

作者 汤文凡 刘朝奇 佐满珍 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期30-32,共3页

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，在世界女性癌症发病率中排第2位，病死率排第5位。宫颈癌的发生、发展和转归是一个极其复杂的多阶段、多基因调控异常的过程。研究表明miRNA在细胞代谢、增殖、分化和凋亡等生物学过程中发挥着重要... 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，在世界女性癌症发病率中排第2位，病死率排第5位。宫颈癌的发生、发展和转归是一个极其复杂的多阶段、多基因调控异常的过程。研究表明miRNA在细胞代谢、增殖、分化和凋亡等生物学过程中发挥着重要的调节作用，miRNA能够识别特定的目标mRNA． 展开更多

关键词 MIRNA 宫颈癌 早期诊断 价值 应用 妇科恶性肿瘤 基因调控异常 癌症发病率

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HIV-1病毒Nef基因克隆、表达、纯化及其抗体的制备 被引量：4

20

作者 杨凡 刘朝奇 +2 位作者 柳发勇 张伟 王磊黎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期703-705,共3页

目的:运用基因工程方法制备HIV-1 Nef重组蛋白及其抗体。方法:用PCR技术从HIV-1H×B2质粒中扩增HIV-1 Nef基因,将测序鉴定过的HIV-1 Nef基因克隆到原核表达载体pET28a(+)上,应用酶切鉴定、测序、SDS-PAGE及Western blot等方法鉴定... 目的:运用基因工程方法制备HIV-1 Nef重组蛋白及其抗体。方法:用PCR技术从HIV-1H×B2质粒中扩增HIV-1 Nef基因,将测序鉴定过的HIV-1 Nef基因克隆到原核表达载体pET28a(+)上,应用酶切鉴定、测序、SDS-PAGE及Western blot等方法鉴定基因片段的正确性及表达蛋白的特异性。纯化的重组蛋白免疫兔3次后,ELISA法测定兔多克隆抗体滴度。用其制备的多克隆抗体通过免疫组织化学方法测定表达Nef基因的内皮细胞。结果:成功地构建了Nef基因的原核表达质粒,测序证明HIV-1Nef基因全长为621bp,编码206个氨基酸。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白为包涵体的形式。HIV-1 Nef蛋白N端融合6×His标签便于纯化及鉴定。获得的高纯度HIV-1 Nef融合蛋白,免疫动物后,可产生特异的高滴度抗体(ELISA滴度达1∶10000)。将转染Nef基因的内皮细胞,应用免疫组化的方法证明其抗体有高度的特异性。结论:构建了高表达HIV-1 Nef蛋白的原核表达系统,制备的Nef重组蛋白免疫动物,获得了特异、高效价的抗体,为研究Nef基因的生物学活性提供了实验材料和依据。 展开更多

关键词 HIV-1 NEF 基因表达 抗体 病毒

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