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泥蚶(Tegillarca granosa)cDNA文库的构建及铁结合蛋白基因(Ferritin)序列分析
被引量：
14
1
作者
贺静静
李晔
+6 位作者
李太武
苏秀榕
王孟前
李松伟
周军
马斌
李强芳
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期289-295,共7页
取正常泥蚶肌肉组织获得总RNA,纯化mRNA后,利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物逆转录合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成cDNA双链,经胶回收除去短片段,与pDNR-LIB载体进行连接,电转化到大肠杆菌DH10B中,构建形成原始文库,进行滴度测试和重组率...
取正常泥蚶肌肉组织获得总RNA,纯化mRNA后,利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物逆转录合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成cDNA双链,经胶回收除去短片段,与pDNR-LIB载体进行连接,电转化到大肠杆菌DH10B中,构建形成原始文库,进行滴度测试和重组率鉴定。结果表明原始文库的滴度为3.17×105cfu/ml,重组率为86.3%,插入片段多在500—2500bp间。随机挑选458个克隆测序,经分析获得94种已知基因及87种未知基因。其中包括铁结合蛋白(Ferritin)的全长cDNA序列。该基因序列全长895bp,5'-端非编码区为163bp,3'-非编码区为213bp,开放阅读框为519bp,编码172个氨基酸。推测其蛋白分子量和等电点分别为20kDa和4.89。氨基酸序列与皱纹盘鲍、太平洋牡蛎、血红扇头蜱、文昌鱼、中华蟾蜍、非洲爪蟾、小家鼠以及人等的同源性有62%—82%。比对结果表明,铁结合蛋白基因在动物进化中高度保守。
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关键词
CDNA文库
序列分析
泥蚶
铁结合蛋白基因
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职称材料
可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)卵子发生的组织学研究
被引量：
15
2
作者
顾晓英
竺俊全
+2 位作者
许式见
尤仲杰
王伟
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期283-288,共6页
采用组织学方法研究了可口革囊星虫卵巢结构及卵子发生过程的形态学变化,以探究可口革囊星虫卵子发生过程及特征。结果表明,可口革囊星虫的卵巢位于收吻肌基部,由小叶组成的带状或块状组织。卵原细胞在卵巢中发育至早期卵母细胞时期单...
采用组织学方法研究了可口革囊星虫卵巢结构及卵子发生过程的形态学变化,以探究可口革囊星虫卵子发生过程及特征。结果表明,可口革囊星虫的卵巢位于收吻肌基部,由小叶组成的带状或块状组织。卵原细胞在卵巢中发育至早期卵母细胞时期单个或成团脱离卵巢入体腔液中,卵母细胞团细胞很快分离为单个细胞;卵母细胞在体腔液中发育成熟后进入肾管;生发泡破裂是卵母细胞成熟的标志;体腔中卵母细胞无滤泡膜,卵黄膜的形成与发育靠卵母细胞本身;卵径小于60μm的卵母细胞呈圆形,卵径大于60μm的卵母细胞为卵圆形,形态上成熟的卵母细胞短径约115—120μm、长径约140—145μm、卵黄膜厚7—9μm。以卵原细胞与卵母细胞发育的形态学特征为依据,将可口革囊星虫的卵子发生过程划分为:卵原细胞增殖期(卵径<10μm)、卵母细胞小生长期(卵径10—20μm)、卵母细胞大生长期Ⅰ(卵径20—60μm)、卵母细胞大生长期Ⅱ[大小为(60μm×70μm)—(120μm×145μm)]、卵母细胞成熟期及退化期6个阶段,反映了可口革囊星虫卵子发生过程的动态变化。
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关键词
可口革囊星虫
卵子发生
组织学
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职称材料
题名
泥蚶(Tegillarca granosa)cDNA文库的构建及铁结合蛋白基因(Ferritin)序列分析
被引量：
14
1
作者
贺静静
李晔
李太武
苏秀榕
王孟前
李松伟
周军
马斌
李强芳
机构
“应用
海洋生物
技术
”教育部
重点
实验室
(
宁波大学
)
宁波大学
生命科学
与生物工程
学院
广东省阳江市
海洋
与渔业局
出处
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期289-295,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目,30771665号
长江学者和创新团队发展计划资助项目,2007-2009
浙江省科技厅重点科研社会发展项目,2005C23083号
文摘
取正常泥蚶肌肉组织获得总RNA,纯化mRNA后,利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物逆转录合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成cDNA双链,经胶回收除去短片段,与pDNR-LIB载体进行连接,电转化到大肠杆菌DH10B中,构建形成原始文库,进行滴度测试和重组率鉴定。结果表明原始文库的滴度为3.17×105cfu/ml,重组率为86.3%,插入片段多在500—2500bp间。随机挑选458个克隆测序,经分析获得94种已知基因及87种未知基因。其中包括铁结合蛋白(Ferritin)的全长cDNA序列。该基因序列全长895bp,5'-端非编码区为163bp,3'-非编码区为213bp,开放阅读框为519bp,编码172个氨基酸。推测其蛋白分子量和等电点分别为20kDa和4.89。氨基酸序列与皱纹盘鲍、太平洋牡蛎、血红扇头蜱、文昌鱼、中华蟾蜍、非洲爪蟾、小家鼠以及人等的同源性有62%—82%。比对结果表明,铁结合蛋白基因在动物进化中高度保守。
关键词
CDNA文库
序列分析
泥蚶
铁结合蛋白基因
Keywords
cDNA library, Sequence analysis, Tegillarca granosa, Ferritin gene
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)卵子发生的组织学研究
被引量：
15
2
作者
顾晓英
竺俊全
许式见
尤仲杰
王伟
机构
“应用
海洋生物
技术
”教育部
重点
实验室
(
宁波大学
)
宁波大学
生命科学
与生物工程
学院
宁波
市
海洋
与渔业研究院
出处
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期283-288,共6页
基金
浙江省自然科学基金资助项目,Y304096号
浙江省教育厅项目,20040889号
浙江省科技计划项目,2004C33095号
文摘
采用组织学方法研究了可口革囊星虫卵巢结构及卵子发生过程的形态学变化,以探究可口革囊星虫卵子发生过程及特征。结果表明,可口革囊星虫的卵巢位于收吻肌基部,由小叶组成的带状或块状组织。卵原细胞在卵巢中发育至早期卵母细胞时期单个或成团脱离卵巢入体腔液中,卵母细胞团细胞很快分离为单个细胞;卵母细胞在体腔液中发育成熟后进入肾管;生发泡破裂是卵母细胞成熟的标志;体腔中卵母细胞无滤泡膜,卵黄膜的形成与发育靠卵母细胞本身;卵径小于60μm的卵母细胞呈圆形,卵径大于60μm的卵母细胞为卵圆形,形态上成熟的卵母细胞短径约115—120μm、长径约140—145μm、卵黄膜厚7—9μm。以卵原细胞与卵母细胞发育的形态学特征为依据,将可口革囊星虫的卵子发生过程划分为:卵原细胞增殖期(卵径<10μm)、卵母细胞小生长期(卵径10—20μm)、卵母细胞大生长期Ⅰ(卵径20—60μm)、卵母细胞大生长期Ⅱ[大小为(60μm×70μm)—(120μm×145μm)]、卵母细胞成熟期及退化期6个阶段,反映了可口革囊星虫卵子发生过程的动态变化。
关键词
可口革囊星虫
卵子发生
组织学
Keywords
Phascolosoma esculenta, Oogenesis, Histology
分类号
Q253 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
泥蚶(Tegillarca granosa)cDNA文库的构建及铁结合蛋白基因(Ferritin)序列分析
贺静静
李晔
李太武
苏秀榕
王孟前
李松伟
周军
马斌
李强芳
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2009
14
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)卵子发生的组织学研究
顾晓英
竺俊全
许式见
尤仲杰
王伟
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2009
15
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