使用数学模型对髁突颈骨折愈合过程中骨与软骨组织变化的研究

1

作者 谢春 邬琼辉 +1 位作者 祁峰 沈振宇 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期86-89,共4页

目的 使用数学模型模拟大鼠髁突颈骨折愈合过程中成骨与成软骨的动态变化过程,探索髁突颈骨折的愈合模式。方法 构建模拟大鼠髁突颈骨折愈合的数学模型,并统计该数学模型28 d内不同时间点生成的各参数(mb, mc, cb和cc)的数值,进而拟合... 目的 使用数学模型模拟大鼠髁突颈骨折愈合过程中成骨与成软骨的动态变化过程,探索髁突颈骨折的愈合模式。方法 构建模拟大鼠髁突颈骨折愈合的数学模型,并统计该数学模型28 d内不同时间点生成的各参数(mb, mc, cb和cc)的数值,进而拟合骨、软骨、成骨细胞及成软骨细胞的密度云图和生长曲线并推算成骨方式。结果 数学模型模拟的骨面积比与大鼠骨折实验所测接近(P>0.05)。数学模型模拟的密度云图显示,在骨折后第3天至第7天成骨集中在骨膜周围,在第7天至第21天成骨集中在软骨所在区域并逐渐替代软骨。骨生长曲线与软骨生长曲线在骨折后第5至第8天与第21至第28天正相关,与第8至第14天呈负相关。成骨细胞生长曲线和成软骨细胞生长曲线均呈现先升后降的趋势,成软骨细胞在第6天达到最大密度,成骨细胞则在第13天达到最大密度。结论 数学模型能有效模拟大鼠髁突颈骨折愈合过程,可动态展示该过程中成骨与成软骨的动态变化,为研究髁突颈骨折的愈合方法提供了新思路。 展开更多

关键词 数学模型 髁突颈骨折 骨折愈合 骨组织 软骨组织

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幽门螺杆菌分离培养技术的改进 被引量：16

2

作者 黄庆华 佟素香 +5 位作者 廖方 余振东 彭颖 许迪 叶嗣颖 谢小平 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期145-147,共3页

探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基 ,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌 ( Hp)的检出率。结果表明 :66例粘膜标本中分离出 Hp5 4株 ( 81.8% ) ,4 4株 Hp滤液有 2 4株 ( 5 4 .5 % )具有细胞毒活性 ,其中 2 6例消化性... 探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基 ,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌 ( Hp)的检出率。结果表明 :66例粘膜标本中分离出 Hp5 4株 ( 81.8% ) ,4 4株 Hp滤液有 2 4株 ( 5 4 .5 % )具有细胞毒活性 ,其中 2 6例消化性溃疡患者有 18例 ( 69.2 % ) ,18例慢性胃炎患者有 6例 ( 3 3 .3 % )为 Hp( Toxin+ )感染。结果提示 :通过对 Hp生物学性状和毒素的检测结果证实 ,该法可用于临床粘膜标本 展开更多

关键词 培养基 厌氧罐蜡烛培养 幽门螺杆菌 分离 培养

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抗神经元抗体对副肿瘤综合征早期诊断的临床意义 被引量：13

3

作者 谢俊丽 崔天盆 +1 位作者 王小梅 王涛 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期97-99,共3页

目的 探讨抗神经元抗体抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体的检测与副肿瘤综合征早期诊断的关系。方法 采用蛋白免疫印迹分析(Western Blot)法对12例确诊为副肿瘤综合症(PNS)的患者血清及32例非PNS血清进行检测。结果 12例确诊患者血清中检测到一... 目的 探讨抗神经元抗体抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体的检测与副肿瘤综合征早期诊断的关系。方法 采用蛋白免疫印迹分析(Western Blot)法对12例确诊为副肿瘤综合症(PNS)的患者血清及32例非PNS血清进行检测。结果 12例确诊患者血清中检测到一项或多项抗体阳性;PNS患者血清中抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体的阳性率高于非PNS对照组,差异有极显著性意义(P<0.01);正常对照组血清抗-Hu,抗-Yo,抗-Ri抗体全部为阴性。结论 抗神经元抗体抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体可作为PNS早期诊断及确诊的指标。 展开更多

关键词 抗神经元抗体 副肿瘤综合征 诊断 抗-Yo 抗-Ri抗体

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补肾法对去卵巢大鼠骨髓细胞OPG、RANKL和TNF-α基因表达的影响 被引量：11

4

作者 曾天舒 陈璐璐 +1 位作者 潘世秀 夏文芳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第4期323-326,共4页

目的观察补肾中药对大鼠去卵巢后骨髓细胞表达核因子κB受体活化子配体(RANKL)、核因子κB受体活化子(RANK)、护骨素(OPG)和肿瘤坏死因子α(TNFα)基因的影响。方法健康3月龄雌性SD大鼠72只,其中24只为假手术对照组,48只去卵巢后随机分... 目的观察补肾中药对大鼠去卵巢后骨髓细胞表达核因子κB受体活化子配体(RANKL)、核因子κB受体活化子(RANK)、护骨素(OPG)和肿瘤坏死因子α(TNFα)基因的影响。方法健康3月龄雌性SD大鼠72只,其中24只为假手术对照组,48只去卵巢后随机分为去卵巢组和中药组,每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12周每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA,RTPCR半定量分析其表达。结果与对照组比较,去卵巢后2周,去卵巢组骨髓细胞TNFα和RANKL的mRNA表达显著升高(P<0.05～0.01),第4～6周,上述改变达高峰,至第12周TNFα仍呈有意义增高;而去卵巢组OPG表达在第2～6周则明显降低,2～4周为最低点。中药组TNFα和RANKL表达低于去卵巢组(P<0.05,P<0.01),而OPG表达明显高于去卵巢组。但是中药治疗未能使以上基因表达完全恢复正常。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论补肾中药在一定程度上抑制去卵巢大鼠骨髓细胞过度表达TNFα和RANKL,同时增加OPG的表达。 展开更多

关键词 补肾法 骨髓 护骨素 肿瘤坏死因子α 核因子κB受体活化子配体

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地塞米松对实验性哮喘小鼠T_H1/T_H2细胞因子的影响及其机制的探讨 被引量：6

5

作者 潘世秀 曾天舒 +2 位作者 崔天盆 胡丽华 吴健民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1141-1144,共4页

目的:初步探讨地塞米松对小鼠哮喘模型哮喘进展过程中TH细胞因子的影响及其机制。方法:18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和地塞米松处理组,每组各6只。运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白细胞介素-4和干扰素-γ的表达... 目的:初步探讨地塞米松对小鼠哮喘模型哮喘进展过程中TH细胞因子的影响及其机制。方法:18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和地塞米松处理组,每组各6只。运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白细胞介素-4和干扰素-γ的表达,用Western blotting方法检测各组小鼠肺组织转录因子T-bet和GATA-3的表达,用组织学观察肺组织炎症程度。结果:哮喘鼠T细胞内IL-4/IFN-γ比值明显高于正常组(P(0.01);地塞米松组细胞内IL-4/IFN-γ比值明显低于哮喘组(P(0.01)。哮喘组肺组织T-bet的表达明显低于正常对照组(P(0.01),GATA-3明显高于正常对照组(P(0.01);地塞米松组的小鼠肺组织T-bet和GATA-3的表达均明显低于哮喘组(P(0.01),GATA-3降低更为明显。结论:调控TH1和TH2细胞转化过程中重要转录因子T-bet和GATA-3的表达,可以改变IL-4/IFN-γ比值,纠正哮喘的TH2漂移,从而改善相应的炎性症状,这可能是地塞米松抑制哮喘的重要机制之一。 展开更多

关键词 哮喘 白细胞介素-4 干扰素Ⅱ型 地塞米松 GATA-3 T—bet

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siRNA沉默G6PD对人结肠癌细胞HIF-1α表达的影响 被引量：7

6

作者 张德太 张科 +1 位作者 杨文 胡丽华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1544-1548,共5页

目的:研究siRNA干扰葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因表达的LoVo细胞在低氧环境中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)水平的变化及其对低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。方法:构建靶向G6PD基因的siRNA干扰质粒载体,并转染人结肠... 目的:研究siRNA干扰葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因表达的LoVo细胞在低氧环境中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)水平的变化及其对低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。方法:构建靶向G6PD基因的siRNA干扰质粒载体,并转染人结肠癌细胞株(LoVo),用限制性内切酶法结合DNA测序鉴定特异重组子,RT-PCR检测G6PD mRNA表达,结合G6PD活性测定判断其干扰效率;以未转染LoVo细胞为对照,进一步观察G6PD沉默的瘤细胞在低氧环境下NADPH水平的变化,RT-PCR检测HIF-1αmRNA表达水平,West-ern blotting检测HIF-1α蛋白水平。结果:成功构建靶向G6PD的siRNA重组质粒载体并稳定转染LoVo细胞。与未转染组细胞相比,RNA干扰G6PD使mRNA表达下降43%,酶活性下降63.5%,细胞内NADPH水平显著下降(41%vs 100%,P<0.05),但HIF-1αmRNA表达水平无明显变化,而HIF-1α蛋白显著降低。结论:低氧环境下,G6PD基因可能通过下调NADPH水平从而降低HIF-1α的稳定性,导致其水平下降,进而影响肿瘤细胞的低氧反应。 展开更多

关键词 siRNA 低氧诱导因子1Α 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 LOVO细胞

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白细胞介素4及肿瘤坏死因子-α基因多态性与湖北汉族儿童哮喘相关性研究 被引量：4

7

作者 刘东方 刘日明 +1 位作者 崔天盆 吴健民 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期196-198,共3页

目的　探讨白细胞介素 (IL) 4基因启动子区C +33T及肿瘤坏死因子 α (TNF α) 30 8位基因多态性与湖北汉族儿童哮喘的易感性的关系。方法　用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR/RFLP)的方法对湖北汉族115例哮喘患儿及 75例健康... 目的　探讨白细胞介素 (IL) 4基因启动子区C +33T及肿瘤坏死因子 α (TNF α) 30 8位基因多态性与湖北汉族儿童哮喘的易感性的关系。方法　用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR/RFLP)的方法对湖北汉族115例哮喘患儿及 75例健康儿童进行IL 4启动子的 +33位点多态性分析 ,对 113例哮喘患儿及 12 6例健康儿童进行TNF α的 30 8位点多态性分析。结果　哮喘患儿与健康对照组IL 4基因启动子C +33T位点的基因型频率和等位基因频率CC、CT、TT之间有显著性差异 (P <0 0 0 1)。TNF α的 30 8位点的基因型频率和等位基因频率在两组的比较中无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IL 4启动子 +33位点基因多态性与湖北汉族儿童哮喘易感性相关 ,TNF α 30 展开更多

关键词 白细胞介素4 肿瘤坏死因子-Α 基因多态性 湖北 汉族 儿童 哮喘 易感性

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siRNA沉默转酮醇酶样基因1下调人宫颈癌细胞HIF-1α表达及糖酵解关键酶活性 被引量：6

8

作者 张德太 左曙蓉 +4 位作者 杨文 石伍和 涂启明 梁涛 张科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期72-76,共5页

目的:通过siRNA技术沉默宫颈癌细胞转酮醇酶样基因-1(TKTL1)后观察其在缺氧条件下低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平及糖酵解途径中2个关键酶己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化情况,旨在探讨肿瘤细胞TKTL1表达与糖酵解途径... 目的:通过siRNA技术沉默宫颈癌细胞转酮醇酶样基因-1(TKTL1)后观察其在缺氧条件下低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平及糖酵解途径中2个关键酶己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化情况,旨在探讨肿瘤细胞TKTL1表达与糖酵解途径的关系。方法:用构建的靶向TKTL1基因siRNA干扰质粒载体转染HeLa细胞株,RT-PCR检测TKTL1 mRNA表达并结合转酮醇酶(TKT)活性测定判断其干扰效率;以未转染HeLa细胞为对照,进一步观察TKTL1沉默的癌细胞在缺氧条件下HIF-1α和HK-Ⅱ表达水平,以及HK-Ⅱ和LDH活性的变化。结果:siRNA沉默HeLa细胞TKTL1基因后TKTL1 mRNA表达下降,TKT活性显著降低(P<0.01),HIF-1α和HK-Ⅱ表达水平及HK-Ⅱ和LDH活性较对照组细胞均显著降低(P<0.01)。结论:沉默肿瘤细胞TKTL1基因能下调HIF-1α表达并降低糖酵解代谢关键酶活性,从而影响肿瘤细胞的恶性表型。 展开更多

关键词 转酮醇酶样基因1 低氧诱导因子lα 糖酵解

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多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用 被引量：4

9

作者 尚丹 熊俊 +2 位作者 郑启昌 胡俊华 郭兴军 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期220-221,228,共3页

目的　研究多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用。方法　对60 例梗阻性黄疸患者于手术前采集静脉血2 ml进行多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测。经手术及病理学证实, 其中胆管癌32 例、胆管良性病变28例。结果　60例患者中, ... 目的　研究多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用。方法　对60 例梗阻性黄疸患者于手术前采集静脉血2 ml进行多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测。经手术及病理学证实, 其中胆管癌32 例、胆管良性病变28例。结果　60例患者中, 糖类抗原19 -9 (CA19- 9) 和糖类抗原242 (CA242) 同时阳性者31 例, 其中胆管癌患者26例, 其CA19- 9大于500 U/ml者23 例; 胆管良性病变者5 例, 其中1 例CA19- 9 大于500 U/ml。当CA19- 9 和CA242同时阳性时, 诊断胆管癌敏感性为81. 3%, 特异性为82. 1%。结论　应用多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测胆管癌, 当CA19 -9和CA242同时阳性时, 敏感性和特异性均较好, 可作为临床诊断胆管癌的筛查指标。关键词　多肿瘤标志物; 　胆管癌; 展开更多

关键词 多肿瘤标志物 胆管癌 蛋白质芯片 胆管良性病变

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人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4基因真核表达载体的构建和生物信息学分析 被引量：4

10

作者 陈治中 王琳 +4 位作者 王晓蓓 毛晓露 陈凤花 刘峰 胡丽华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期104-108,113,共6页

目的:构建人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4(TIM-4)基因的真核表达载体,用生物信息学分析了解TIM-4蛋白的特性。方法:采用Trizol法从人外周血单个核细胞提取总mRNA,逆转录合成cDNA,以此为模版,两步法RT-PCR扩增TIM-4,将其克隆至表达载体pcDNA3... 目的:构建人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4(TIM-4)基因的真核表达载体,用生物信息学分析了解TIM-4蛋白的特性。方法:采用Trizol法从人外周血单个核细胞提取总mRNA,逆转录合成cDNA,以此为模版,两步法RT-PCR扩增TIM-4,将其克隆至表达载体pcDNA3.1(+)中,构建FTIM-4质粒,通过PCR及测序进行鉴定。同时,我们构建pEGFP-N1-TIM-4真核表达载体,并测序鉴定其准确性;将pEGFP-N1-TIM-4质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和荧光显微镜证实其表达。应用生物信息学初步分析TIM-4蛋白的物理化学性质、结构域和功能。结果:从逆转录的cDNA扩增出TIM-4;经PCR、酶切鉴定、测序分析表明扩增产物与GenBank提供的序列完全相同。真核表达载体pEGFP-N1-TIM-4在CHO细胞中稳定表达,表达蛋白主要位于细胞质和细胞膜上。生物信息学分析表明TIM-4蛋白为不稳定亲水性蛋白,有1个跨膜螺旋结构,含约10.32%的α-螺旋,29.89%的延伸链,59.79%的不规则卷曲,有1段由24个氨基酸组成的信号肽。亚细胞主要定位于细胞质、细胞核、分泌系统的小囊泡、线粒体、内质网、高尔基体上。功能分析预测该蛋白具有受体和信号转导功能。结论:成功构建TIM-4基因真核表达载体,利用生物信息学分析洞察了TIM-4蛋白的性质,为进一步研究该基因的免疫调节机制奠定了基础。 展开更多

关键词 T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4基因 生物信息学分析 克隆

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雌激素调节大鼠去卵巢后骨髓细胞OPG、RANKL、RANK基因表达 被引量：4

11

作者 曾天舒 潘世秀 +1 位作者 陈璐璐 夏文芳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第2期138-141,共4页

目的观察大鼠去卵巢后骨髓细胞核因子κB受体活化子配体(RANKL)、核因子κB受体活化子(RANK)、护骨素(OPG)以及TNFα基因表达的改变和雌激素的影响。方法健康3m龄雌性SD大鼠72只,24只为假手术对照组,48只去卵巢,随机分为去卵巢组和雌激... 目的观察大鼠去卵巢后骨髓细胞核因子κB受体活化子配体(RANKL)、核因子κB受体活化子(RANK)、护骨素(OPG)以及TNFα基因表达的改变和雌激素的影响。方法健康3m龄雌性SD大鼠72只,24只为假手术对照组,48只去卵巢,随机分为去卵巢组和雌激素组,每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12w每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA,RTPCR半定量分析其表达。结果与对照组相比,去卵巢后2w,去卵巢组骨髓细胞TNFα和RANKLmRNA表达显著升高(P<0.05～0.01),第4～6w,上述改变达高峰,至第12wTNFα仍呈有意义增高;而OPG表达在第2～6w则明显降低(P<0.01),2～4w为最低点;OPGRANKL比值2～6w为最低(P<0.01),12w仍低于对照组。雌激素组以上各时间TNFα和RANKL表达低于去卵巢组(P<0.05,P<0.01)而OPG表达和OPGRANKL比值明显高于去卵巢组(P<0.01)。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论雌激素抑制大鼠去卵巢后骨髓细胞过度表达RANKL和TNFα而增加OPG的表达。 展开更多

关键词 雌激素 骨髓 护骨素 肿瘤坏死因子α 核因子 κB受体活化子配体

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pEGFP-BMI-1真核表达载体的构建、鉴定及其表达 被引量：3

12

作者 陈凤花 胡丽华 +1 位作者 王琳 李一荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期1056-1060,共5页

本研究构建真核表达载体pEGFP-BMI-1并观察其在HeLa细胞中的表达。将BMI-1逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)产物克隆入pEGFP-N1,经酶切、PCR鉴定及测序分析,构建pEGFP-BMI-1真核表达载体;采用脂质体转染法,将融合基因pEGFP-BMI-1转入HeLa细胞... 本研究构建真核表达载体pEGFP-BMI-1并观察其在HeLa细胞中的表达。将BMI-1逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)产物克隆入pEGFP-N1,经酶切、PCR鉴定及测序分析,构建pEGFP-BMI-1真核表达载体;采用脂质体转染法,将融合基因pEGFP-BMI-1转入HeLa细胞,用荧光显微镜和Western blot检测其表达,SYBR Green I实时定量RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞中P16INK4a mRNA的表达变化。结果表明:重组后的pEGFP-N1质粒已成功载入BMI-1的全长编码基因,序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜下可见在转染pEGFP-BMI-1的HeLa细胞中存在荧光分布;Western blot检测发现存在外源性融合蛋白BMI-1-EGFP的表达。在HeLa细胞中过表达BMI-1显著下调P16INK4a mRNA的表达为对照组的9.2%(P<0.01)。结论:成功构建了真核表达质粒pEGFPBMI-1,转染HeLa细胞后可表达融合蛋白BMI-1-EGFP。这为今后研究BMI-1在肿瘤发生发展中的机制奠定了基础。 展开更多

关键词 pEGFP—BMI-1 BMI-1 基因转染 HELA细胞 P16^INK4A

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转酮醇酶1在人结肠癌细胞株LoVo增殖中的作用 被引量：3

13

作者 杨菊红 胡丽华 +1 位作者 张德太 蔡鹏程 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期347-350,共4页

目的探讨转酮醇酶1(TKTL1)在体外培养的人类结肠癌细胞株(LoVo)生长增殖中的作用。方法构建针对TKTL1 mRNA的小干扰RNA(siRNA)质粒,将该质粒转染LoVo细胞;采用实时定量RT-PCR检测转染前后LoVo细胞转酮醇酶基因家族中转酮醇酶(TKT)、TKTL... 目的探讨转酮醇酶1(TKTL1)在体外培养的人类结肠癌细胞株(LoVo)生长增殖中的作用。方法构建针对TKTL1 mRNA的小干扰RNA(siRNA)质粒,将该质粒转染LoVo细胞;采用实时定量RT-PCR检测转染前后LoVo细胞转酮醇酶基因家族中转酮醇酶(TKT)、TKTL1、转酮醇酶2(TKTL2)mRNA表达水平的变化,通过流式细胞术和MTT法检测转染前后LoVo细胞周期和细胞增殖的改变。结果转染组(携带有pEGFP-C1-U6/TKTL1)、质粒对照组(携带有pEGFP-C1-U6/UC)和未转染组(未转染细胞)中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无显著性意义(P>0.05)。转染组细胞中TKTL1的表达水平与质粒对照组和未转染组相比,明显下调,且转染组LoVo细胞总转酮醇酶活性明显下降,细胞增殖明显被抑制,LoVo细胞被阻滞在G0/G1期。结论TKTL1在人类结肠癌细胞(LoVo细胞系)的生长增殖中起重要作用,TKTL1可能成为肿瘤治疗的新靶点。 展开更多

关键词 转酮醇酶 转酮醇酶1 小干扰RNA 转酮醇酶活性 LOVO细胞

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AML患者端粒酶逆转录酶mRNA的表达与端粒酶活性的检测 被引量：4

14

作者 李一荣 吴健民 胡丽华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期868-872,共5页

目的:建立一种实时荧光RT-PCR方法,定量检测急性髓细胞白血病(AML)患者外周血单个核细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达水平,观察其与AML发生及复发的关系,探讨hTERT mRNA的表达水平与端粒酶活性的相关关系。方法:采用实时荧光RT-PCR... 目的:建立一种实时荧光RT-PCR方法,定量检测急性髓细胞白血病(AML)患者外周血单个核细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达水平,观察其与AML发生及复发的关系,探讨hTERT mRNA的表达水平与端粒酶活性的相关关系。方法:采用实时荧光RT-PCR与Lightcycler荧光PCR仪定量检测hTERT mRNA的表达水平,采用PCR-ELISA检测端粒酶活性。结果:①AML首治患者、复发患者、完全缓解期患者以及健康体检者NhTERT分别为299.2±292.8、550.1±441.3、14.0±9.2和12.3±6.7,与健康体检者和完全缓解期患者比较,AML首治患者、复发患者hTERT mRNA表达水平显著升高,而且AML复发患者hTERT mRNA的表达水平显著高于首治患者;②AML首治患者、AML复发患者、AML完全缓解期患者以及健康体检者端粒酶的活性分别为32.8%±24.3%4、8.6%±31.4%、7.4%±5.1%和7.6%±3.6%,AML首治患者、复发患者端粒酶活性显著升高,而且AML复发患者端粒酶活性显著高于首治患者;③hTERT mRNA表达水平与端粒酶的活性呈现良好的相关性,相关系数为0.78。结论:hTERT mRNA表达水平与端粒酶活性的上调是AML发生与复发的一个重要因素,且hTERT mRNA表达水平与端粒酶活性呈良好的正相关。 展开更多

关键词 急性髓细胞性白血病 实时 端粒酶 逆转录酶 聚合酶链反应

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白介素13基因多态性与湖北汉族人群哮喘的关系 被引量：3

15

作者 习东 潘世秀 +1 位作者 崔天盆 吴健民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期757-760,764,共5页

目的 :为了探讨IL 13基因编码区精氨酸 (Arg) 110谷氨酰胺 (Gln)多态性是否与湖北地区汉族人群哮喘及血浆总IgE水平升高相关。方法 :采用PCR RFLP方法 ,检测湖北地区 4 3名哮喘患儿、4 5名成人哮喘患者、31名非哮喘儿童和 4 6名体检健... 目的 :为了探讨IL 13基因编码区精氨酸 (Arg) 110谷氨酰胺 (Gln)多态性是否与湖北地区汉族人群哮喘及血浆总IgE水平升高相关。方法 :采用PCR RFLP方法 ,检测湖北地区 4 3名哮喘患儿、4 5名成人哮喘患者、31名非哮喘儿童和 4 6名体检健康成人的IL 13外显子 4Arg110Gln的等位基因频率和基因型频率。用化学发光法测定血浆总IgE。结果 :IL 13基因4 2 5 7位等位基因a在儿童、成人中的频率分别为 0 39、0 32。IL 13基因Arg110Gln多态性的GlnGln型与儿童哮喘和血浆总IgE升高相关 (P分别为 0 0 30、0 0 0 0 9) ,但与成人哮喘、血浆总IgE水平之间无统计学意义 (P分别为 0 2 19、0 174 )。结论 :研究显示IL 13外显子 4Arg110Glng a单核苷酸多态性与湖北汉族儿童哮喘和血浆总IgE水平相关 ,但与成人哮喘、血浆总IgE水平之间无统计学意义。 展开更多

关键词 哮喘 免疫球蛋白E 白细胞介素13 Arg110Gln多态性 IL-13基因

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加味四逆散对肝郁脾虚者可溶性细胞粘附分子-1水平和单核细胞功能的影响 被引量：3

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作者 彭汉光 邱明义 +3 位作者 张茂林 崔天盆 刘玉茂 邱荣元 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期634-636,共3页

目的　观察加味四逆散对肝郁脾虚者血清可溶性细胞粘附分子 1(sICAM 1)和单核细胞功能的影响。方法　采用酶联免疫吸附法和改良噻唑蓝法对 60例肝郁脾虚者血清sICAM 1和白细胞介素 15(IL 15)及单核细胞抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应... 目的　观察加味四逆散对肝郁脾虚者血清可溶性细胞粘附分子 1(sICAM 1)和单核细胞功能的影响。方法　采用酶联免疫吸附法和改良噻唑蓝法对 60例肝郁脾虚者血清sICAM 1和白细胞介素 15(IL 15)及单核细胞抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应 (ADCC)进行检测。结果　肝郁脾虚者血清sICAM 1水平升高 ,IL 15分泌减少 ,ADCC功能下降 ,表现为免疫功能低下。经加味四逆散治疗后 ,上述指标恢复正常。结论　加味四逆散健脾舒肝 。 展开更多

关键词 加味四逆散 肝郁脾虚 可溶性细胞粘附分子-1 单核细胞功能

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BALB/c小鼠哮喘进展过程中T-bet和GATA3的表达变化 被引量：2

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作者 潘世秀 曾天舒 +2 位作者 崔天盆 胡丽华 吴健民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期932-935,共4页

目的:初步探讨转录因子T-bet和GATA3在小鼠哮喘模型哮喘进展过程中的改变及其意义。方法:18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组(地塞米松组),每组各6只。采用Western blot法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达,同时运... 目的:初步探讨转录因子T-bet和GATA3在小鼠哮喘模型哮喘进展过程中的改变及其意义。方法:18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组(地塞米松组),每组各6只。采用Western blot法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达,同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达。结果:哮喘组与正常对照组相比,药物组与哮喘组相比,肺组织T-bet和GATA3均有明显改变(P<0.01)。哮喘组T-bet明显减低,而GATA3明显升高;地塞米松治疗后,T-bet和GATA3均明显减低,后者减低更为明显。流式细胞仪分析显示:哮喘组CD4+T细胞细胞内IL-4/IFN-γ的比值显著高于对照组(P<0.01);经地塞米松处理后的哮喘小鼠CD4+T细胞细胞内IL-4/IFN-γ的比值显著降低(P<0.01)。结论:转录因子T-bet和GATA3与哮喘进展密切相关,调控它们的表达,可以改变IL-4/IFN-γ比值,纠正哮喘的Th2漂移,可能成为哮喘治疗的新靶点。 展开更多

关键词 哮喘 白介素4 干扰素Γ 地塞米松 GATA3 T-BET

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自身免疫调节因子促进THP-1细胞的自噬性凋亡 被引量：4

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作者 石亮 李一荣 胡丽华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期461-465,共5页

目的探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染。免疫荧光和Western blot法检测转染效率。通过AnnexinⅤ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过... 目的探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染。免疫荧光和Western blot法检测转染效率。通过AnnexinⅤ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过表达AIRE的THP-1细胞凋亡率。通过间接免疫荧光染色和Western blot检测自噬蛋白LC3B的表达。结果 PMA诱导后,THP-1细胞贴壁生长,形态多样,胞质内可见空泡、吞噬细胞碎片等典型成熟分化形态。转染48 h后,THP-1细胞的AIRE蛋白呈现明显高表达。对比空载体转染和阴性对照,过表达AIRE使THP-1细胞的凋亡率上升;同时,Western blot显示LC3B-Ⅱ的蛋白水平也较空载体转染组增高,且间接免疫荧光染色提示单个细胞的阳性LC3B-Ⅱ斑点数目较空载体转染组明显增加(P<0.05)。结论 AIRE可能通过上调THP-1细胞的自噬促进其凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 自噬 自身免疫调节因子 LC3B蛋白

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脱氢表雄酮对体外培养Burkit淋巴瘤细胞抗氧化能力影响的研究 被引量：7

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作者 张德太 胡丽华 杨渝珍 《医学研究生学报》 CAS 2005年第9期776-778,783,共4页

目的:观察脱氢表雄酮(DHEA)对体外培养的Burk it淋巴瘤(Raji)细胞抗氧化能力的影响。方法:用一定浓度的DHEA作用于体外培养的Raji细胞,同时观察Raji在加用吩嗪硫酸甲酯(PMS)作用前后细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、谷光甘肽过氧化... 目的:观察脱氢表雄酮(DHEA)对体外培养的Burk it淋巴瘤(Raji)细胞抗氧化能力的影响。方法:用一定浓度的DHEA作用于体外培养的Raji细胞,同时观察Raji在加用吩嗪硫酸甲酯(PMS)作用前后细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、谷光甘肽过氧化物酶(GPX)、谷光甘肽还原酶(GR)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)浓度的变化,并与未加DHEA作用的Raji细胞作对照。结果:DHEA浓度≥5.0μmol/L时能明显抑制Raji细胞G-6-PD活性,而对GPX、GR及GSH无明显影响;在氧化压力下(PMS作用)经DHEA处理后Raji细胞G-6-PD、GPX、GR活性无明显升高,细胞内GSH浓度显著降低(P<0.01),并明显低于未经DHEA处理的Raji细胞(P<0.05)。结论:一定浓度的DHEA能抑制Raji细胞G-6-PD活性,并降低其氧化应激能力。 展开更多

关键词 脱氢表雄酮 Burkit淋巴瘤细胞 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶

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β-连环素在白血病细胞株的异常定位研究 被引量：3

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作者 时杰 王琳 胡丽华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1096-1100,共5页

β-连环素是Wnt信号通路关键的信号传递子,其在细胞的异常定位引起下游靶基因的转录是多种实体肿瘤发生的原因之一。由于造血细胞缺少典型的黏着连接(adherens junction,AJ),因此对β-连环素在血液肿瘤的表达及定位并无较多的研究。本... β-连环素是Wnt信号通路关键的信号传递子,其在细胞的异常定位引起下游靶基因的转录是多种实体肿瘤发生的原因之一。由于造血细胞缺少典型的黏着连接(adherens junction,AJ),因此对β-连环素在血液肿瘤的表达及定位并无较多的研究。本研究探讨4种常见的白血病细胞株(Daudi, Jurkat, K562和Thp-1)中β-连环素蛋白的定位及β-连环素基因mRNA的表达水平,了解血液肿瘤中是否有β-连环素蛋白的定位异常,以期发现白血病新的发生机制,为寻找新的特异治疗靶点提供线索。用免疫细胞化学法检测β-连环素在白血病细胞系中的定位,用实时定量RT-PCR法测定β-连环素mRNA表达水平。结果表明4种白血病细胞株有两种(Jurkat、Thp-1)存在β-连环素的异常定位,且β-连环素mRNA表达增高,但在Jurkat和Thp-1细胞中的β-连环素mRNA低于Daudi和K562细胞。这4种白血病细胞株中β-连环素基因的mRNA表达水平与其异常定位无相关性。结论β-连环素定位异常可能参与部分血液肿瘤的发生,引起β-连环素定位异常的机制并不是发生在转录水平。 展开更多

关键词 Β-连环素 白血病细胞株 DAUDI K562 JURKAT THP-1

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