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鸡源Bursin-ScFv噬菌体展示文库的构建及初步筛选被引量：1: 1; 作者邬向东曲悦 +2 位作者谌南辉王萍何后军《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期488-493,共6页; 本研究利用抗三肽囊素(Bursin)单克隆抗体免疫SPF来航鸡,获得产生抗独特型抗体的脾细胞,从中提取总RNA,经反转录合成cDNA第一链。以cDNA第一链为模板,根据来航鸡IgG抗体重链(VH)、轻链(VL)可变区基因FR设计引物,进行PCR扩增。在体外扩... 展开更多; 关键词三肽囊素抗独特型抗体可变区重链轻链单链抗体单克隆抗体噬菌体抗体库; 在线阅读下载PDF 职称材料

三肽囊素抗独特型ScFv噬菌体展示文库的构建被引量：1: 2; 作者邬向东谌南辉 +3 位作者李麟何后军袁汉英王萍《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期482-485,共4页; 利用在体外构建的三肽囊素抗独特型抗体可变区VH和VL基因,通过重叠延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH和VL基因连接成为VH-Linker-VLScFv,且ScFvDNA与噬菌粒载体pHEN1的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13K07感染后,获得... 展开更多; 关键词三肽囊素抗独特型抗体可变区重链和轻链基因单链抗体噬菌体抗体库; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗癌胚抗原单区抗体的质粒构建及表达被引量：1: 3; 作者李彪朱承谟吴祥甫《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第2期99-102,109,共5页; 目的对抗癌胚抗原单区抗体进行表达研究。方法采用PCR技术将已获得的抗癌胚抗原（CEA）鼠源单克隆抗体E7B10重、轻链可变区基因（VH、VK）进行改造后分别克隆进大肠杆菌表达质粒pET－24α（＋）中，并进行表达。结果显示重、轻链可变区... 展开更多; 关键词癌胚抗原 PCR 基因表达肿瘤诊断治疗抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体轻链可变区基因的克隆和序列分析被引量：1: 4; 作者杨西川王大章 +3 位作者郑光勇程云李伯安李静《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期195-197,I011,共3页; 为构建和表达抗人血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）工程抗体奠定基础，从分泌抗人ＶＥＧＦ抗体的杂交瘤细胞株中提取总ＲＮＡ，利用反转录－聚合酶链反应方法，克隆抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体轻链可变区基因，将其重组入ｐＥＧＭＲ－ＴＶｅｃ... 展开更多; 关键词血管内皮生长因子单克隆抗体轻链可变区; 在线阅读下载PDF 职称材料

用聚合酶链反应制备抗端粒酶蛋白重链和轻链可变区基因: 5; 作者张徽张波 +1 位作者韩继生侯琳《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第2期132-134,138,共4页; 目的：为了制备抗端粒酶蛋白hTERT可变区基因。方法：采用Ni-NTA树脂层析法从PBKTRT转染的 E.coli JM109阳性菌中分离纯化端粒酶蛋白hTERT，并免疫小鼠。从免疫的小鼠脾脏中提取淋巴细胞中总RNA，逆转录成cDNA，以逆转录合成的cDNA第一... 展开更多; 关键词端粒酶重链可变区轻链可变区聚合酶链反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗BAFF单克隆抗体轻链和重链可变区基因的克隆及鉴定: 6; 作者肖黎明龚玖瑜 +4 位作者王畅陈恒悦栗向东金伯泉陈丽华《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期49-52,共4页; 目的:在本实验室成功制备小鼠抗人BAFF单克隆抗体的基础上,通过分子克隆方法获得该抗体可变区基因序列。方法:从1株小鼠抗人BAFF单克隆抗体杂交瘤细胞FMMUB4中提取总RNA,以此为模版反转录成cDNA,用针对小鼠单克隆抗体重链和轻链可变区... 展开更多; 关键词 BAFF 单克隆抗体轻重链可变区基因基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗bFGF鼠单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及序列分析: 7; 作者刘纯杰王德文 +3 位作者张兆山高亚兵熊呈琦郑兆荣《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第5期359-362,共4页; 我们采用基因工程抗体制备技术，从分泌抗人ｂＦＧＦ单抗的鼠杂交瘤细胞成功地克隆了其轻链可变区基因，并对其进行了序列测定及抗体基因结构分析。这为构建ｂＦＧＦ单链抗体，防止ｂＦＧＦ引起的副作用及进行体内定位诊断... 展开更多; 关键词轻链可变区基因克隆序列分析 BFGF; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析: 8; 作者马兰刘爱平 +1 位作者王佳王小红《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2064-2070,共7页; 【目的】克隆构建黄曲霉毒素B1(AFB1)单链抗体(scFv)基因,并对其编码蛋白序列和结构进行分析预测,为scFv分子修饰改造及在免疫学检测中的应用提供参考依据。【方法】以抗AFB1单克隆抗体杂交瘤细胞株为原料,通过PCR扩增重链可变区(VH)和... 展开更多; 关键词黄曲霉毒素B1(AFB1) 单链抗体(scFv) 重链可变区(VH) 轻链可变区(vl) 沟槽结构; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡源Bursin-ScFv噬菌体展示文库的构建及初步筛选被引量：1: 1; 作者邬向东曲悦谌南辉王萍何后军; 机构江西农业大学动物科学技术学院辽宁医学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期488-493,共6页; 基金江西省自然科学基金项目资助(0130023) 国家自然科学基金项目资助(30560107); 文摘本研究利用抗三肽囊素(Bursin)单克隆抗体免疫SPF来航鸡,获得产生抗独特型抗体的脾细胞,从中提取总RNA,经反转录合成cDNA第一链。以cDNA第一链为模板,根据来航鸡IgG抗体重链(VH)、轻链(VL)可变区基因FR设计引物,进行PCR扩增。在体外扩增出该抗体的可变区VH和VL基因(大小分别约为370和320 bp)。通过重叠延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH和VL基因连接成为VH-Linker-VLScFv,将ScFv DNA与噬菌粒载体pHEN1的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13K07感染后,获得重组的鸡源抗三肽囊素独特型抗体全套单链噬菌体抗体库。并测得该库容量约为5×105,噬菌体中ScFv基因的插入率为80%,用辅助噬菌体援救后,得到滴度为1011PFU/mL的初级噬菌体抗体库。用抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的淘筛,出现特异性富集。经ELISA、动物试验表明所筛选的5个阳性克隆可与抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)特异性结合,并能促进抗体的生产。; 关键词三肽囊素抗独特型抗体可变区重链轻链单链抗体单克隆抗体噬菌体抗体库; Keywords bursin anti-idiotype antibody variable region heavy chain light chain ScFv McAb phage display library; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三肽囊素抗独特型ScFv噬菌体展示文库的构建被引量：1: 2; 作者邬向东谌南辉李麟何后军袁汉英王萍; 机构江西农业大学动物科学技术学院复旦大学遗传研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期482-485,共4页; 基金江西省自然科学基金项目(0130023) 国家自然科学基金项目(30560107); 文摘利用在体外构建的三肽囊素抗独特型抗体可变区VH和VL基因,通过重叠延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH和VL基因连接成为VH-Linker-VLScFv,且ScFvDNA与噬菌粒载体pHEN1的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13K07感染后,获得重组的鸡源抗三肽囊素抗独特型抗体全套单链噬菌体抗体库,并将该抗体库展示在噬菌体表面,以利用噬菌体展示技术的强大筛选能力筛选出与三肽囊素同功能单链抗体(Bursin-ScFv)。; 关键词三肽囊素抗独特型抗体可变区重链和轻链基因单链抗体噬菌体抗体库; Keywords bursin anti-idiotype antibody variable region gene of heavy chain and light chain ScFv phage display library; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗癌胚抗原单区抗体的质粒构建及表达被引量：1: 3; 作者李彪朱承谟吴祥甫; 机构上海第二医科大学附属瑞金医院核医学科中科院上海生物化学研究所; 出处《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第2期99-102,109,共5页; 基金国家自然科学基金!39770231 上海市启明星计划资助项目!98QB14011; 文摘目的对抗癌胚抗原单区抗体进行表达研究。方法采用PCR技术将已获得的抗癌胚抗原（CEA）鼠源单克隆抗体E7B10重、轻链可变区基因（VH、VK）进行改造后分别克隆进大肠杆菌表达质粒pET－24α（＋）中，并进行表达。结果显示重、轻链可变区在大肠杆菌中获得了高效表达，其表达量达到菌体总蛋白的20％与25％，SDS－PAGE和Westernblot图谱显示表达产物分子量为13KD、12KD，与其基因编码蛋白的理论推算值相符。表达产物在胞内主要以不溶性包含体存在。结论经变性和复性处理后，RIA表明重链可变区基因表达产物具有结合其特异性抗原CEA的能力。; 关键词癌胚抗原 PCR 基因表达肿瘤诊断治疗抗体; Keywords carcinoembryonic antigen heavy chain variable region gene light chain variable region gene PCR gene expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R730.3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体轻链可变区基因的克隆和序列分析被引量：1: 4; 作者杨西川王大章郑光勇程云李伯安李静; 机构华西医科大学口腔医学院颌面外科学教研室北京; 出处《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期195-197,I011,共3页; 基金国家自然科学基金; 文摘为构建和表达抗人血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）工程抗体奠定基础，从分泌抗人ＶＥＧＦ抗体的杂交瘤细胞株中提取总ＲＮＡ，利用反转录－聚合酶链反应方法，克隆抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体轻链可变区基因，将其重组入ｐＥＧＭＲ－ＴＶｅｃｔｏｒ测序载体测序。结果表明轻链可变区序列全长３３３ｂｐ，编码１１１个氨基酸，通过国际联机检索及Ｋａｂａｔ库扫描证实，该轻链可变区符合小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因特征，同源性高达８９．３％，归属小鼠轻链可变区基因第Ⅲ亚组。; 关键词血管内皮生长因子单克隆抗体轻链可变区; Keywords vasoendothelial growth factor\ \ monoclonal antibody\ \ variable region of light chain\ \ retropolymerase chain reaction\ \ sequence analysis; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用聚合酶链反应制备抗端粒酶蛋白重链和轻链可变区基因: 5; 作者张徽张波韩继生侯琳; 机构重庆医科大学基础医学院病理学教研室北京医科大学病理学教研室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第2期132-134,138,共4页; 文摘目的：为了制备抗端粒酶蛋白hTERT可变区基因。方法：采用Ni-NTA树脂层析法从PBKTRT转染的 E.coli JM109阳性菌中分离纯化端粒酶蛋白hTERT，并免疫小鼠。从免疫的小鼠脾脏中提取淋巴细胞中总RNA，逆转录成cDNA，以逆转录合成的cDNA第一条链为模板，分别用VH和VL引物，通过PCR进行扩增。结果：PCR扩增反应产生350bp大小的抗hTERT重链和轻链可变区基因。VH和VL基因片段的获得为进一步制备抗hTERT单功能区抗体（dABs）和单链抗体ScFv奠定了实验基础。结论：提示该方法具有稳定性好，易于重复，扩增后VH和VL量较高的优点。; 关键词端粒酶重链可变区轻链可变区聚合酶链反应; Keywords Telomerase；Heavy chain variable region；light chain variable region；Polymerase chain reaction; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗BAFF单克隆抗体轻链和重链可变区基因的克隆及鉴定: 6; 作者肖黎明龚玖瑜王畅陈恒悦栗向东金伯泉陈丽华; 机构第四军医大学基础医学院免疫学教研室第四军医大学西京医院西京骨科医院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期49-52,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30972683) 陕西省攻关计划(2010K12-02-06) 第四军医大学学员课外科研课题(08865-01); 文摘目的:在本实验室成功制备小鼠抗人BAFF单克隆抗体的基础上,通过分子克隆方法获得该抗体可变区基因序列。方法:从1株小鼠抗人BAFF单克隆抗体杂交瘤细胞FMMUB4中提取总RNA,以此为模版反转录成cDNA,用针对小鼠单克隆抗体重链和轻链可变区基因序列的特异性引物分别进行PCR反应,PCR产物连接入载体,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后送测序,测序结果进行生物信息学分析。结果:成功克隆了抗BAFF单克隆抗体FMMUB4重链和轻链可变区基因,测序结果证实序列正确。结论:获得了抗BAFF单克隆抗体FMMUB4重链和轻链可变区基因序列,为下一步构建相关基因工程抗体打下良好基础。; 关键词 BAFF 单克隆抗体轻重链可变区基因基因克隆; Keywords BAFF mAb variable region of heavy and light chain gene cloning; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗bFGF鼠单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及序列分析: 7; 作者刘纯杰王德文张兆山高亚兵熊呈琦郑兆荣; 机构解放军农牧大学动物医学系军事医学科学院放射医学研究所军事医学科学院生物工程研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第5期359-362,共4页; 文摘我们采用基因工程抗体制备技术，从分泌抗人ｂＦＧＦ单抗的鼠杂交瘤细胞成功地克隆了其轻链可变区基因，并对其进行了序列测定及抗体基因结构分析。这为构建ｂＦＧＦ单链抗体，防止ｂＦＧＦ引起的副作用及进行体内定位诊断等研究打下了基础。; 关键词轻链可变区基因克隆序列分析 BFGF; Keywords Basic fibroblast growth factor(bFGF) light chain variable region gene Clone and sequence; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析: 8; 作者马兰刘爱平王佳王小红; 机构华中农业大学食品科技学院四川农业大学食品学院; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2064-2070,共7页; 基金国家自然科学基金项目(31601539) 湖北省自然科学基金项目(2016CFB143) 华中农业大学自主科技创新基金项目(2662015QD027); 文摘【目的】克隆构建黄曲霉毒素B1(AFB1)单链抗体(scFv)基因,并对其编码蛋白序列和结构进行分析预测,为scFv分子修饰改造及在免疫学检测中的应用提供参考依据。【方法】以抗AFB1单克隆抗体杂交瘤细胞株为原料,通过PCR扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),以(Gly4Ser)3为柔性接头(Linker)拼接构建抗AFB1 scFv基因,并采用在线生物信息学分析软件对其氨基酸序列、理化性质及蛋白结构进行分析预测。【结果】抗AFB1 scFv基因全长744 bp,编码248个氨基酸,分子量为26312.05 Da,理论等电点(pI)5.70,其二级结构中含有35个α-螺旋(占14.11%)、28个β-折叠(占11.29%)、85个延伸链(占34.28%)和100个随机卷曲(占40.32%),在三级结构中连接肽卷曲将VH和VL区域牵拉而相互靠近,形成典型的抗体结构——沟槽结构,是scFv的抗原结合区域。【结论】构建的抗AFB1 scFv其VH含有117个氨基酸、VL含有116个氨基酸,具备典型抗体结构——沟槽结构,能与抗原特异性结合。; 关键词黄曲霉毒素B1(AFB1) 单链抗体(scFv) 重链可变区(VH) 轻链可变区(vl) 沟槽结构; Keywords aflatoxin B1(AFB1) single chain antibody(scFv) variable region of heavy chain(VH) variable region of light chain(vl) groove structure; 分类号 S859.87 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鸡源Bursin-ScFv噬菌体展示文库的构建及初步筛选	邬向东曲悦谌南辉王萍何后军	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	三肽囊素抗独特型ScFv噬菌体展示文库的构建	邬向东谌南辉李麟何后军袁汉英王萍	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗癌胚抗原单区抗体的质粒构建及表达	李彪朱承谟吴祥甫	《上海第二医科大学学报》 CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	抗人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体轻链可变区基因的克隆和序列分析	杨西川王大章郑光勇程云李伯安李静	《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	1998	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	用聚合酶链反应制备抗端粒酶蛋白重链和轻链可变区基因	张徽张波韩继生侯琳	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗BAFF单克隆抗体轻链和重链可变区基因的克隆及鉴定	肖黎明龚玖瑜王畅陈恒悦栗向东金伯泉陈丽华	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	抗bFGF鼠单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及序列分析	刘纯杰王德文张兆山高亚兵熊呈琦郑兆荣	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析	马兰刘爱平王佳王小红	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料