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甘草提取物对Staphylococcus aureus的抑菌活性及作用机理 被引量:5
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作者 张舒涵 梁海运 +2 位作者 孙佳慧 周瑾 宋丽雅 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期259-265,共7页
食源性病菌为食品安全带来了巨大挑战,甘草提取物作为食品添加剂对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有良好的抑菌作用,可作为天然食品防腐剂的候选原料,但目前对其抑菌机理的研究还不深入,影响了其应用。为探究甘草提取物对S.au... 食源性病菌为食品安全带来了巨大挑战,甘草提取物作为食品添加剂对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有良好的抑菌作用,可作为天然食品防腐剂的候选原料,但目前对其抑菌机理的研究还不深入,影响了其应用。为探究甘草提取物对S.aureus的抑菌机理,该研究通过生长曲线、氧化损伤实验、细胞膜壁分析、蛋白质分析和DNA分析,评价了甘草提取物对S.aureus的抑菌作用机制。结果表明,甘草提取物导致S.aureus核酸渗漏,说明其膜完整性被破坏;同时,甘草提取物降低了几种能量代谢酶:琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)和总ATP酶的活力;此外,光谱和竞争分析表明,甘草提取物与DNA发生了静电结合和凹槽结合。总之,甘草提取物主要是通过对S.aureus细胞壁膜、蛋白质合成、细菌代谢活力和遗传物质发挥作用,从而抑制其生长。该研究为甘草提取物在食品防腐方面的应用提供了理论基础。 展开更多
关键词 抑菌机理 防腐剂 甘草提取物 staphylococcus aureus
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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)液体增菌培养基的优化
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作者 李明阳 吴文章 +1 位作者 杨洋 何艳玲 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第7期190-195,共6页
为研发一种金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)选择性增菌液,选用针对革兰氏阴性菌及非葡萄球菌属菌株具有选择抑制作用的7.5%氯化钠肉汤作为基础培养基,探索氨基酸、丙酮酸钠、甘露醇对金黄色葡萄球菌的促生长能力,通过正交试验确... 为研发一种金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)选择性增菌液,选用针对革兰氏阴性菌及非葡萄球菌属菌株具有选择抑制作用的7.5%氯化钠肉汤作为基础培养基,探索氨基酸、丙酮酸钠、甘露醇对金黄色葡萄球菌的促生长能力,通过正交试验确定培养基的最优配方,并使用优化后的培养基与原始培养基作用于来源不同的四株金黄色葡萄球菌标准菌株,对其增菌效果和抑制大肠杆菌(Escherichia coli)的效果进行对比。结果表明,最佳培养基配方为在基础培养基上添加L-丙氨酸1.0 g/L、甘露醇6.0 g/L、丙酮酸钠1.2 g/L。菌株在优化后培养基上增菌浊度及转接至Baird-Parker的菌落数上均有促进效果,最终菌株的OD550 nm值有0.28~0.34的增长,转接Baird-Parker后的菌落数也有10~100倍的增长,且在促进目标菌生长的同时对大肠杆菌的抑制性也没有受到影响,表明该增菌培养基选择性良好。 展开更多
关键词 氯化钠肉汤 金黄色葡萄球菌 培养基优化 增菌培养基
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基于全基因组重测序技术的浙江近岸海域耐盐金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)耐药机制解析
3
作者 张旨轩 王子言 +7 位作者 王泽 刘岩 刘松怡 钱鹏宇 叶欢 韩姣姣 周君 苏秀榕 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期394-404,共11页
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是近岸海域海水中的主要病原菌,严重威胁接触者的安全。抗生素处理是治疗金黄色葡萄球菌感染的重要手段,其耐药性的发生受到了高度重视。采用全基因组重测序与KEGG富集分析结合的方法,对红霉素(er... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是近岸海域海水中的主要病原菌,严重威胁接触者的安全。抗生素处理是治疗金黄色葡萄球菌感染的重要手段,其耐药性的发生受到了高度重视。采用全基因组重测序与KEGG富集分析结合的方法,对红霉素(erythromycin)、氯霉素(chloramphenicol)和万古霉素(vancomycin)处理后的耐盐金黄色葡萄球菌(S.aureus ZS01)和不耐盐金黄色葡萄球菌(S.aureus 502A)进行耐药机制研究。结果表明,S.aureus 502A经抗生素处理后发生突变的程度大于S.aureus ZS01,二者在经过氯霉素处理发生了更大程度的突变。红霉素、氯霉素和万古霉素处理主要影响了金黄色葡萄球菌的致病能力;红霉素和氯霉素可能通过影响金黄色葡萄球菌脂类的代谢引起其耐药性的变化。除此之外,三种抗生素处理均出现了较多TIGR01741家族蛋白和假设蛋白基因的突变,推测与菌株的耐药性和致病性相关。耐盐金黄色葡萄球菌可通过外排系统作用产生红霉素耐药性,不耐盐菌株因细胞壁成分相关基因的突变提高了对万古霉素的耐受性。研究结果可为耐盐和不耐盐金黄色葡萄球菌的耐药机制及抗生素对金黄色葡萄球菌致病性影响的研究提供基础数据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus) 全基因组重测序 KEGG富集分析 耐药机制 致病性
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Predictive Modeling for Growth and Enterotoxin Production of Staphylococcus aureus in Milk 被引量:1
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作者 Dang Fang-fang Jiang Yu-jun +7 位作者 Pan Rui-li Zhuang Ke-jin Wang Hui Sun Lu-hong Wang Rui Zhao Feng Li Tie-jing Man Chao-xin 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2018年第3期81-89,共9页
Predictive microbiology was utilized to model Staphylococcus aureus (S. aureus) growth and staphylococcal enterotoxin A (SEA) production in milk in this study. The modifed logistic model, modifed Gompertz model an... Predictive microbiology was utilized to model Staphylococcus aureus (S. aureus) growth and staphylococcal enterotoxin A (SEA) production in milk in this study. The modifed logistic model, modifed Gompertz model and Baranyi model were applied to model growth data of S. aureus between 15℃ and 37℃. Model comparisons indicated that Baranyi model described the growth data more accurately than two others with a mean square error of 0.0129. Growth rates generated from Baranyi model matched the observed ones with a bias factor of 0.999 and an accuracy factor of 1.01, and ft a square root model with respect to temperature; other two modifed models both overestimated the observed ones. SEA amount began to be detected when the cell number reached106.4 cfu ? mL-1, and showed the linear correlation with time. Besides, the rate of SEA production ftted an exponential relationship as a function of temperature. Predictions based on the study could be applied to indicate possible growth of S. aureus and prevent the occurrence of staphylococcal food poisoning. 展开更多
关键词 staphylococcus aureus staphylococcal enterotoxin A MILK predictive model
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葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的生理特性及快速鉴定法
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作者 锐方 《食品工业科技》 CAS 1988年第6期61-52,共2页
葡萄球菌在自然界中普遍存在,故通常最初存在于原料中,污染食品的机会最多。所污染的食品以内制品、乳制品为最多。在被污染的食品上,葡萄球菌繁殖到相当大数量,即能致使葡萄球菌肠毒素的蓄积而引起食物中毒。由葡萄球菌所产生的核酸酶... 葡萄球菌在自然界中普遍存在,故通常最初存在于原料中,污染食品的机会最多。所污染的食品以内制品、乳制品为最多。在被污染的食品上,葡萄球菌繁殖到相当大数量,即能致使葡萄球菌肠毒素的蓄积而引起食物中毒。由葡萄球菌所产生的核酸酶,由于几乎遍仔于产生肠毒素的葡萄球菌菌株中, 展开更多
关键词 葡萄球菌 鉴定法 staphylococcus aureus
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水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜及其毒力因子的影响 被引量:2
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作者 王嘉康 唐浩国 +2 位作者 陈静 司启贺 申茹晓 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第3期26-32,43,共8页
目的:探究水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜及其毒力因子的影响。方法:采用结晶紫染色法检测水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜形成的抑制及清除作用,MTT染色法探究水飞蓟素对其生物膜代谢的影响,冻干血浆和无菌脱纤维羊血探究水... 目的:探究水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜及其毒力因子的影响。方法:采用结晶紫染色法检测水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜形成的抑制及清除作用,MTT染色法探究水飞蓟素对其生物膜代谢的影响,冻干血浆和无菌脱纤维羊血探究水飞蓟素对其凝固酶表达和溶血活性的影响,同时用光学显微镜观察不同浓度水飞蓟素对其生物膜影响及傅里叶红外分析细菌成分变化。结果:水飞蓟素对S.aureus ATCC25923的最小抑菌质量浓度(MIC)为0.5 mg/mL,MIC浓度下的水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜的抑制率达到90%,清除率达到89.2%,且低剂量的水飞蓟素能够显著抑制其溶血活性和凝固酶的表达。结论:水飞蓟素对金黄色葡萄球菌的生物膜形成具有很好的抑制以及清除作用,同时能够显著抑制其毒力因子的表达。 展开更多
关键词 水飞蓟素 金黄色葡萄球菌 生物膜 毒力因子
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利用Fura-2/AM荧光探针法和LCSM法研究受磁场处理S.aureus细胞Ca^(2+)的跨膜行为 被引量:9
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作者 马海乐 许审时 +1 位作者 何荣海 段玉清 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期407-410,共4页
研究受脉冲磁场处理金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞Ca2+的跨膜行为,为此研究了表征S.aureus胞内Ca2+浓度变化Fura-2/AM荧光探针检测法,并检测了不同脉冲数下经脉冲磁场处理后S.aureus细胞荧光强度的变化,采用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)... 研究受脉冲磁场处理金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞Ca2+的跨膜行为,为此研究了表征S.aureus胞内Ca2+浓度变化Fura-2/AM荧光探针检测法,并检测了不同脉冲数下经脉冲磁场处理后S.aureus细胞荧光强度的变化,采用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)观察了经脉冲磁场处理前后S.aureus胞内Ca2+浓度的变化。研究结果表明,Fura-2/AM可成功的负载于S.aureus中,可以应用于S.aureus胞内游离钙离子浓度变化的测定。经脉冲磁场处理后,S.aureus胞内钙离子浓度显著上升,且与活菌数的减少高度相关,相关度达到-0.989 15;胞内光点显著增多,光点荧光强度明显增大,说明大量胞外钙离子跨膜进入胞内。因此,可以判断微生物细胞膜通透性的改变和胞内Ca2+浓度的上升是高强度脉冲磁场具有杀菌作用的重要原因。 展开更多
关键词 Fura-2/AM荧光探针 激光共聚焦显微镜 金黄色葡萄球菌 钙离子 脉冲磁场
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Garvicin LG6对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的抗菌活性
8
作者 唐伟 翁胜男 +4 位作者 王亚武 姚杰 李昕 周强 徐元宏 《中国感染控制杂志》 北大核心 2025年第1期23-29,共7页
目的探索格氏乳球菌SHAMU-LG6所分泌的细菌素(初步命名为garvicin LG6)对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法收集分离自2021—2023年安徽某医院临床患者的金黄色葡萄球菌,三点接种法检测金黄色葡萄球菌的溶血表型,并根据药敏... 目的探索格氏乳球菌SHAMU-LG6所分泌的细菌素(初步命名为garvicin LG6)对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法收集分离自2021—2023年安徽某医院临床患者的金黄色葡萄球菌,三点接种法检测金黄色葡萄球菌的溶血表型,并根据药敏检测结果将各溶血表型金黄色葡萄球菌进一步划分为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。牛津杯法抑菌试验检测格氏乳球菌SHAMU-LG6对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的拮抗活性。对格氏乳球菌SHAMU-LG6进行全基因组测序,使用antiSMASH 7.0和BAGEL4在线数据库,寻找garvicin LG6的生物合成基因簇。经过大孔树脂吸附、梯度乙醇洗脱、旋转蒸发干燥和旋干物复溶,牛津杯法抑菌试验检测garvicin LG6粗提物对金黄色葡萄球菌的抗菌活性。结果格氏乳球菌SHAMU-LG6能够明显拮抗不同溶血表型的MSSA和MRSA。格氏乳球菌SHAMU-LG6的染色体基因组上存在garvicin LG6生物合成基因簇。格氏乳球菌SHAMU-LG6单个菌落或6 mL发酵液所分泌的garvicin LG6抗菌活性至少相当于30μg头孢西丁药敏纸片。结论Garvicin LG6能够高效杀伤不同溶血表型MSSA和MRSA,具有开发成新型抗菌药物的潜力,临床应用前景很大。 展开更多
关键词 格氏乳球菌 细菌素 金黄色葡萄球菌 溶血表型 抗菌活性
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啮齿类实验动物4种常见病原菌多重巢式PCR检测方法的建立与初步应用
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作者 席晓霞 孙婧 +3 位作者 郭家熙 张丽娟 刘晓玲 段天林 《中兽医医药杂志》 2025年第4期18-25,共8页
建立一种检测啮齿类实验动物鼠伤寒沙门菌、鼠棒状杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等4种常见致病菌的多重巢式PCR检测方法,在此基础上,采用咽拭子和肛拭子等采样方法优化检测流程。试验针对病原菌16S rDNA序列保守区和可变区,通过... 建立一种检测啮齿类实验动物鼠伤寒沙门菌、鼠棒状杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等4种常见致病菌的多重巢式PCR检测方法,在此基础上,采用咽拭子和肛拭子等采样方法优化检测流程。试验针对病原菌16S rDNA序列保守区和可变区,通过引物长短差异分别设计通用引物和特异性引物,通过巢式PCR检测各种样本中的病原菌。结果显示,优化后的四重巢式PCR方法可对同一样品中的4种致病菌模板进行特异性扩增,无交叉反应;多重巢式PCR方法可从标准菌株DNA模板中扩增出待检病原菌DNA片段,而阴性对照组均未能检出;多重巢式PCR方法的检测灵敏度明显高于普通多重PCR方法(≤10-2pg/μL vs≤1 pg/μL);多重巢式PCR方法可从混合感染的样本中特异性地检测出4种致病菌;在实际应用中,多重巢式PCR可检测出病原菌感染的阳性样本,且检出率高于普通多重PCR方法。本试验建立的4种病原菌多重巢式PCR检测方法可同时检测动物咽拭子或肛拭子等临床样本中的多种病原菌,与普通多重PCR方法相比,该方法具有省时省力、灵敏性高、特异性强等优点。 展开更多
关键词 多重巢式PCR 鼠伤寒沙门菌 鼠棒状杆菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌
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九三某牛场奶牛临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药物敏感性分析
10
作者 李鹤 潘顺圆 +2 位作者 宋军 王超 韩齐 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第3期31-36,52,共7页
为了对患有乳房炎的病牛进行病原菌的分离与鉴定、分析其致病性、评估药物敏感性以及提供临床用药指导,研究从黑龙江省嫩江市九三管理局某牧场的3头乳房炎病牛的奶样中分离纯化病原菌。采用PCR法、细菌生化反应试验、细菌鉴定仪鉴定、... 为了对患有乳房炎的病牛进行病原菌的分离与鉴定、分析其致病性、评估药物敏感性以及提供临床用药指导,研究从黑龙江省嫩江市九三管理局某牧场的3头乳房炎病牛的奶样中分离纯化病原菌。采用PCR法、细菌生化反应试验、细菌鉴定仪鉴定、小鼠致病性试验、病理组织学鉴定及药敏试验等多种方法,对病原菌进行了菌株分离鉴定、致病性分析及药物敏感性研究。实验结果显示,成功分离的9株金黄色葡萄球菌经鉴定对小鼠表现出明确致病性。此外,这些病原菌对临床常用药物如阿莫西林、氨苄西林和青霉素显示出高度的敏感性。同时,苯唑西林、头孢西丁和利福平等药物也能够有效地抑制这些分离出的金黄色葡萄球菌的生长。将药敏实验的结果反馈给相关牛场后,采用阿莫西林和青霉素对患病奶牛进行治疗,观察到乳房炎症状有显著改善。这些实验结果为临床上治疗奶牛乳房炎提供了有价值的参考依据。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 分离鉴定 药敏试验
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万古霉素耐药菌流行率及耐药机制研究进展 被引量:1
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作者 沈瑶 李志宇 +4 位作者 缪丰诚 肖英平 杨华 党亚丽 马剑钢 《遗传》 北大核心 2025年第6期650-659,共10页
万古霉素是一种糖肽类抗生素,是临床治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌和艰难梭菌等细菌感染的最后一道防线,但目前全球多个国家和地区已发现了多种万古霉素耐药菌。基于“One health”理念,本文统计了近15年国内外40个地区的人源... 万古霉素是一种糖肽类抗生素,是临床治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌和艰难梭菌等细菌感染的最后一道防线,但目前全球多个国家和地区已发现了多种万古霉素耐药菌。基于“One health”理念,本文统计了近15年国内外40个地区的人源、动物源、环境来源及食品来源的万古霉素耐药菌流行率。统计结果显示,万古霉素耐药菌主要集中于医院及周围环境。南非部分医院废水中的检出率高达96.77%;其次是巴基斯坦和中国台湾医院患者,检出率分别是56.5%和29.02%;国内人源细菌万古霉素平均耐药率(1.41%)要高于国外人源(0.47%);各地区儿童患者中耐药菌的检出率较低(<1%)。值得注意的是尽管万古霉素禁止在畜禽养殖中使用,但是其耐药菌在畜禽、畜禽产品以及相关环境中都有一定的检出率,对人类健康造成一定威胁。基于统计分析结果,本文对万古霉素耐药菌的耐药及传播机制进行了综述,明确了耐药菌在“人-动物-食品-环境”流行率差异,以期解析万古霉素耐药菌在全球不同宿主中的分布和传播风险,为耐药菌的防控提供参考。 展开更多
关键词 万古霉素耐药率 肠球菌 金黄色葡萄球菌 传播机制
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乳酸菌细菌素及其对金黄色葡萄球菌生物膜抑制作用研究进展 被引量:1
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作者 薛小格 刘园园 +5 位作者 张丽纳 樊睿 辛宇 马佳歌 于微 刘丽波 《食品工业科技》 北大核心 2025年第4期414-424,共11页
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种能在食品表面形成生物膜的革兰氏阳性条件致病菌,其生物膜的形成对食品加工和食品安全造成了严重威胁。乳酸菌细菌素是由乳酸菌在代谢过程中产生的一类具有抗菌活性的多肽,可抑制... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种能在食品表面形成生物膜的革兰氏阳性条件致病菌,其生物膜的形成对食品加工和食品安全造成了严重威胁。乳酸菌细菌素是由乳酸菌在代谢过程中产生的一类具有抗菌活性的多肽,可抑制多种食源性致病菌及其生物膜的形成。本文针对乳酸菌细菌素的分类、作用方式及其在群体感应调控下的合成机制进行了综述,基于培养条件和培养基成分简述了提高乳酸菌细菌素合成量的常规方法,总结了不同来源乳酸菌细菌素的纯化方式,系统综述了乳酸菌细菌素对S.aureus生物膜的抑制作用,从Agr系统和LuxS/AI-2群体感应系统的角度简要阐述了乳酸菌细菌素对S.aureus生物膜的调控机制,并展望了乳酸菌细菌素对S.aureus生物膜抑制机制的未来研究方向,为乳酸菌细菌素作为生物防腐剂的开发和广泛使用提供科学依据。 展开更多
关键词 乳酸菌细菌素 金黄色葡萄球菌 生物膜 抑菌机制 分离纯化
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昭苏地区马源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:1
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作者 杨洋 张致远 +7 位作者 李佳欣 王笑笑 马小娟 邓海峰 徐文慧 马玉辉 李建龙 郭庆勇 《现代畜牧科技》 2025年第1期7-10,共4页
为了解新疆昭苏地区患呼吸道疾病马携带的细菌性病原,该研究从昭苏某规模化马场采集呼吸道症状鼻拭子样品11份,进行细菌的分离纯化,通过革兰氏染色、形态特征观察、生化试验、PCR鉴定,并进行药敏试验,共分离出7株金黄色葡萄球菌。采用K-... 为了解新疆昭苏地区患呼吸道疾病马携带的细菌性病原,该研究从昭苏某规模化马场采集呼吸道症状鼻拭子样品11份,进行细菌的分离纯化,通过革兰氏染色、形态特征观察、生化试验、PCR鉴定,并进行药敏试验,共分离出7株金黄色葡萄球菌。采用K-B纸片法对7株金黄色葡萄球菌进行药物敏感性检测,结果显示7株金黄色葡萄球菌对氨基糖苷类和糖肽类药物耐药,对红霉素表现为中介,对喹诺酮和四环素类药物敏感。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 病原分离鉴定 药敏试验
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金黄色葡萄球菌拮抗菌株的鉴定及抑菌机制研究
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作者 章帅文 熊大维 +3 位作者 顾斌涛 张诚 李鹏 黄国昌 《中国酿造》 北大核心 2025年第5期92-97,共6页
该研究以一株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有拮抗作用的菌株tz-6为研究对象,通过形态学观察、生理生化试验及16S r DNA序列分析对其进行菌种鉴定,并考察其对金黄色葡萄球菌生长、β-半乳糖苷酶、脱氧核糖核酸(DNA)和蛋白... 该研究以一株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有拮抗作用的菌株tz-6为研究对象,通过形态学观察、生理生化试验及16S r DNA序列分析对其进行菌种鉴定,并考察其对金黄色葡萄球菌生长、β-半乳糖苷酶、脱氧核糖核酸(DNA)和蛋白质泄漏程度、生物膜形成以及丙酮酸释放等的影响,探究其抑菌机制。结果表明,菌株tz-6被鉴定为链霉菌属(Streptomyces sp.),其发酵粗提物会能对金黄色葡萄球菌细胞膜和内膜结构产生破坏作用,增加细胞膜的通透性,导致酸性物质及β-半乳糖苷酶释放,增强了菌液上清的核酸和蛋白质含量,同时阻碍了金黄色葡萄球菌的机体能量和物质代谢。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 拮抗 鉴定 抑菌机制
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噬菌体VB_SauM_Lm44穿孔素HolLm44的克隆表达及其抑菌效果研究
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作者 张欣然 廖毅婷 +3 位作者 熊东炜 李鹏 杨淑华 龙淼 《动物营养学报》 北大核心 2025年第3期2081-2089,共9页
本试验旨在克隆表达金黄色葡萄球菌噬菌体VB_SauM_Lm44穿孔素并研究其抑菌效果。首先,通过分析VB_SauM_Lm44基因组,获得穿孔素基因序列,并利用PCR扩增穿孔素基因(命名为HolLm44,其表达的穿孔素蛋白命名为HolLm44);然后,将目的基因片段... 本试验旨在克隆表达金黄色葡萄球菌噬菌体VB_SauM_Lm44穿孔素并研究其抑菌效果。首先,通过分析VB_SauM_Lm44基因组,获得穿孔素基因序列,并利用PCR扩增穿孔素基因(命名为HolLm44,其表达的穿孔素蛋白命名为HolLm44);然后,将目的基因片段与双酶切处理后的线性pET-28a(+)质粒连接、转化入大肠杆菌DH5α克隆感受态细胞,提取重组质粒并转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)及BL21(DE3)plysS,进行目的蛋白诱导表达和纯化;最后,通过平板抑菌法及刃天青染色法验证穿孔素的抑菌效果,探究穿孔素HolLm44发挥其活性的最适作用条件。结果显示:穿孔素HolLm44具有2个跨膜区,其N-端和C-端都分布于细胞质内,属于Ⅱ类穿孔素。穿孔素HolLm44最适作用温度为37℃,最适作用pH为5.2。在作为指示菌的20株金黄色葡萄球菌中,只有1株为对穿孔素HolLm44表现出敏感性。本研究成功克隆表达出了噬菌体VB_SauM_Lm44中具有活性的穿孔素HolLm44,并证实其具有良好的抑制金黄色葡萄球菌的效果。 展开更多
关键词 噬菌体VB_SauM_Lm44 穿孔素 克隆表达 抑菌 金黄色葡萄球菌
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新疆某规模化奶牛场乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定、耐药分析及毒力基因检测
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作者 李扬 徐晶晶 +5 位作者 张小玉 李娜娜 余星雨 冷青文 李彦芳 屈勇刚 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1370-1382,共13页
【目的】探究新疆某规模化奶牛场乳源金黄色葡萄球菌的耐药性及毒力基因携带情况,为该养殖金黄色葡萄球菌病防治提供一定的参考。【方法】本研究从该规模化奶牛场采集乳样,通过平板划线法进行细菌分离,使用金黄色葡萄球菌特异性引物对... 【目的】探究新疆某规模化奶牛场乳源金黄色葡萄球菌的耐药性及毒力基因携带情况,为该养殖金黄色葡萄球菌病防治提供一定的参考。【方法】本研究从该规模化奶牛场采集乳样,通过平板划线法进行细菌分离,使用金黄色葡萄球菌特异性引物对分离株进行鉴定,采用K-B法分析分离株耐药表型,通过PCR方法检测其耐药基因和毒力基因。【结果】262份乳样中金黄色葡萄球菌平均分离率为15.27%(40/262),其中,临床乳房炎乳样中的分离率达28.57%(10/35),隐性乳房炎乳样和健康乳样样本分离率分别为11.41%(17/149)和16.67%(13/78)。5.00%(2/40)的分离株未检出管家基因(arcC、aroE、glpF、gmK、pta、tpi和yqil基因)。毒力基因clfA、clfB和coa的检出率较高,共有16种不同毒力基因组合。分离株对林可霉素等药物的耐药率较高;77.50%的分离株为多重耐药菌株,其中1株可耐万古霉素等14种药物。分离株中林可酰胺类耐药基因linA(52.50%)、喹诺酮类耐药基因qnrA(50.00%)、氨基糖苷类耐药基因aacA-aphD(45.00%)、红霉素及克林霉素类耐药基因ermC(40.00%)的检出率较高。氯霉素类等5类抗菌药的耐药表型与耐药基因型的符合率较高;β-内酰胺类等3类抗菌药的耐药表型与耐药基因型的符合率较低。【结论】该规模化奶牛场乳源金黄色葡萄球菌普遍耐药,多重耐药现象较为严重,本研究结果为该规模化奶牛场金黄色葡萄球菌的防治提供参考。 展开更多
关键词 奶牛 金黄色葡萄球菌 耐药性 毒力基因
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金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型研究
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作者 高菊 翁胜男 +4 位作者 冷贵云 李昕 姚杰 周强 唐伟 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1312-1319,共8页
目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型。方法采用三点接种法检测105株临床样本分离金黄色葡萄球菌的溶血表型;实时荧光定量聚合酶链式反应检测4种溶血素基因(hla、hlb、hlc和hld)mRNA表达量;VITEK 2 GP639药敏卡检测常用抗生素... 目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型。方法采用三点接种法检测105株临床样本分离金黄色葡萄球菌的溶血表型;实时荧光定量聚合酶链式反应检测4种溶血素基因(hla、hlb、hlc和hld)mRNA表达量;VITEK 2 GP639药敏卡检测常用抗生素耐药性;DNA凝胶电泳法检测mecA、sea、tst和pvl基因携带率;微孔板成膜结晶紫染色法检测生物膜形成能力;CCK-8法检测巨噬细胞毒性。结果金黄色葡萄球菌临床分离株中检出7种溶血表型。不同溶血表型金黄色葡萄球菌临床分离株在溶血素基因mRNA表达量、常用抗生素耐药性、毒力基因携带率、生物膜形成能力、小鼠巨噬细胞毒性作用等方面均有差异(P<0.05)。结论金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型多样,应当引起微生物检验、临床治疗和院感防控等多维度重点关注。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 临床分离株 溶血表型 溶血素 耐药性 毒力
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新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌PBP1的相互作用研究
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作者 徐铭琦 史祥睿 +6 位作者 刘威 段浩 魏静 邓炎 江悦 高英英 李海波 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第9期912-921,共10页
目的 探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法 以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质... 目的 探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法 以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质粒转入大肠杆菌中进行表达并通过亲和层析纯化获得PBP1-39-608蛋白;利用肽聚糖侧链主干肽的硫酯类似物S2d作为底物,测定HL-J6对PBP1-39-608转肽酶活性的抑制作用;用微量热泳动技术(microscale thermophoresis,MST)检测HL-J6与PBP1-39-608的亲和力,并通过细胞热转移实验(cell thermal shift assay,CETSA)确证结合作用;分别利用AutoDock Vina和Desmond软件进行分子对接和动力学模拟,明确HL-J6与PBP1-39-608蛋白的结合模式和关键氨基酸残基。结果 成功构建pET30a-pbp1-39-608重组质粒,诱导表达后,经纯化获得相对分子质量约为65×103的PBP1-39-608蛋白;HL-J6可呈时间依赖性抑制PBP1-39-608的转肽酶活性(P<0.001);HL-J6与PBP1-39-608的结合解离常数Kd约为64.92μmol/L;分子对接结果显示HL-J6通过与ILE-348、ASN-370、THR-516、PHE-423等主要氨基酸残基相互作用结合在PBP1-39-608的活性口袋,结合评分为-8.38 kcal/mol(<-5.00 kcal/mol);动力学模拟结果显示二者结合后50 ns趋于稳定。结论 HL-J6可显著抑制金黄色葡萄球菌PBP1的转肽酶活性,并与其存在稳定的相互作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 青霉素结合蛋白 HL-J6 重组蛋白:相互作用
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鸽源金黄色葡萄球菌外毒素基因与细菌分子分型相关性研究
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作者 赵世芳 王金泉 +2 位作者 陈伟丽 阮志栋 彭斌 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期42-46,共5页
旨在对鸽源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的毒素基因与agr、spa基因型进行研究,并分析其分型与毒素基因之间的相关性。利用多重PCR检测分离菌株的辅助基因调节子并对其进行蛋白A测序。检测表明,毒素基因中hla、hlb基因检出率较... 旨在对鸽源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的毒素基因与agr、spa基因型进行研究,并分析其分型与毒素基因之间的相关性。利用多重PCR检测分离菌株的辅助基因调节子并对其进行蛋白A测序。检测表明,毒素基因中hla、hlb基因检出率较高;其次为sec、seg、seh检出率均为16.00%;sea、seb、sed、see、tst检出率最低,均为2.00%;MRSA菌株携带4种及以上毒素基因。分型显示,S.aureus的agr分型中,agrⅠ型为鸽源S.aureus优势菌株,占分离率的70.00%;agrⅡ和agrⅢ检出率分别为12.00%、18.00%;agrⅣ未检出。spa共有9种分型,t011 S.aureus是鸽源主要的流行菌株,占68.00%,其次为t127、t502均为10.00%。agrⅡ和agrⅢS.aureus更具有携带多种毒素基因的潜力,而agrⅠ型毒素基因携带能力较弱;t011型S.aureus均携带hla基因,t502和t1710中的MRSA菌株均携带7种毒素基因;说明同种分型携带毒素基因情况具有一致性。t011均携带agrⅠ,t127均携带agrⅢ,t502均携带agrⅢ,说明spa与agr有一定相关性。研究通过S.aureus分型检测,分析其潜在携带毒素基因的能力,为鸽源S.aureus感染性疾病的监控及分子流行病学的研究提供科学依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 毒素基因 辅助基因调节子 蛋白A
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基于微生物代谢组学研究薄荷挥发油抗金黄色葡萄球菌的机制
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作者 彭媛媛 武艺 +5 位作者 胡文毅 黄佳帅 刘儒华 刘锡建 刘晓会 赵琳静 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第16期26-35,I0001-I0004,共14页
采用整合微生物代谢组学、网络分析和分子对接方法,研究亚抑菌浓度的薄荷挥发油(Mentha essential oil,MEO)暴露影响金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)生长的分子机制。采用GC-MS从MEO中共鉴定73种成分。MEO对S.aureus有较好的体... 采用整合微生物代谢组学、网络分析和分子对接方法,研究亚抑菌浓度的薄荷挥发油(Mentha essential oil,MEO)暴露影响金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)生长的分子机制。采用GC-MS从MEO中共鉴定73种成分。MEO对S.aureus有较好的体外抑制活性,最小抑菌浓度为0.4%(体积分数),该浓度MEO在10 h对S.aureus抑制率仍可达到94%。扫描电子显微镜分析显示,MEO干预可导致S.aureus菌体明显萎缩、凹陷,甚至破裂。基于质谱的代谢指纹分析发现,在亚抑菌浓度(0.1×MIC)MEO暴露下,处于对数生长期的S.aureus细胞中L-谷氨酸、苹果酸、肌醇、富马酸、乙醇胺等代谢物发生显著变化,主要涉及肌醇磷酸代谢、能量代谢(三羧酸循环、丙酮酸代谢)、氨基酸代谢和氧化应激损伤。进一步通过整合网络分析和分子对接,发现薄荷醇、薄荷酮、α-杜松醇、大马酮、香芹酮、β-波旁烯可能通过调控BCHE、FNTA、CES1、CES2、FAAH等核心靶标,干扰S.aureus正常生长。研究结果为MEO在食品领域的综合开发和应用提供了参考数据。 展开更多
关键词 薄荷挥发油 金黄色葡萄球菌 微生物代谢组学 网络分析 分子对接
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