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1,25-(OH)_(2)D_(3)通过lncRNA-uc.412抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖的机制研究
被引量：
1
1
作者
安梦如
黄婵
+5 位作者
王锦
王银妃
盛晓静
张爱青
甘卫华
殷勤
《皖南医学院学报》
CAS
2021年第4期315-318,323,共5页
目的:研究1,25二羟基维生素D 3[1,25-(OH)_(2)D_(3)]通过长链非编码RNA uc.412(lncRNA-uc.412)抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞增殖的可能机制。方法:用TGF-β1、1,25-(OH)_(2)D_(3)、SIS3分别干预系膜细胞,用lncRNA-uc...
目的:研究1,25二羟基维生素D 3[1,25-(OH)_(2)D_(3)]通过长链非编码RNA uc.412(lncRNA-uc.412)抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞增殖的可能机制。方法:用TGF-β1、1,25-(OH)_(2)D_(3)、SIS3分别干预系膜细胞,用lncRNA-uc.412过表达慢病毒转染系膜细胞,MTT法、流式细胞术检测系膜细胞增殖率,RT-PCR法检测ki67、p27、PCNA及lncRNA-uc.412的表达,Western blot检测smad3及p-smad3的表达。结果:①与TGF-β1组相比,1,25-(OH)_(2)D_(3)+TGF-β1干预后的ki67、PCNA、lncRNA-uc.412的表达下调,p27的表达上调(P<0.01),细胞增殖率下降(P<0.01);②TGF-β1+SIS3组p-smad3蛋白表达、lncRNA-uc.412的表达量较TGF-β1组下降(P<0.01);③与过表达lncRNA-uc.412组比较,过表达lncRNA-uc.412+1,25-(OH)_(2)D_(3)组的ki67、PCNA的表达下调,p27的表达上调(P<0.01)。结论:1,25-(OH)_(2)D_(3)可抑制TGF-β1诱导的大鼠系膜细胞增殖,其机制可能与1,25-(OH)_(2)D_(3)阻滞细胞周期及下调lncRNA-uc.412的表达水平有关。
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关键词
1
25二羟基维生素D_(3)
长链非编码RNA
uc.412
转化生长因子Β1
系膜细胞
增殖
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职称材料
lncRNA-uc.412重组质粒构建及在大鼠肾小球系膜细胞中的转染
被引量：
2
2
作者
陈俊宇
顾欣雨
+3 位作者
顾靖钏
鱼敏逸
甘卫华
张爱青
《山东医药》
CAS
2019年第24期9-12,共4页
目的 构建长链非编码RNA-uc.412(lncRNA-uc.412)的重组质粒,并观察其转染后在大鼠肾小球系膜细胞中的表达情况。方法 自大鼠系膜细胞中提取总RNA,根据lncRNA-uc.412的基因信息设计上下游引物,应用PCR技术与琼脂糖凝胶电泳获得扩增后分...
目的 构建长链非编码RNA-uc.412(lncRNA-uc.412)的重组质粒,并观察其转染后在大鼠肾小球系膜细胞中的表达情况。方法 自大鼠系膜细胞中提取总RNA,根据lncRNA-uc.412的基因信息设计上下游引物,应用PCR技术与琼脂糖凝胶电泳获得扩增后分离纯化的lncRNA-uc.412基因片段。将lncRNA-uc.412基因片段质粒与pRP[Exp]经双酶切处理后,通过凝胶电泳分离纯化,加入T4-DNA连接酶,即获得lncRNA-uc.412重组质粒。将lncRNA-uc.412重组质粒进行双酶切鉴定,检测目的基因片段大小;选取经双酶切鉴定连接成功的lncRNA-uc.412重组质粒,PCR扩增后进行双向测序。采用脂质体转染法转染lncRNA-uc.412重组质粒和空白质粒pRP[Exp]至大鼠肾小球系膜细胞,分别记为实验组和阴性对照组,采用RT-qPCR法检测lncRNA-uc.412在大鼠肾小球系膜细胞中的相对表达量。结果 lncRNA-uc.412重组质粒的双酶切鉴定结果显示,得到大小在200~300bp的特异性条带,与lncRNA-uc.412的长度相符。测序结果显示,lncRNA-uc.412重组质粒的碱基序列与理论预期序列一致。阴性对照组大鼠肾小球系膜细胞中lncRNA-uc.412的相对表达量记为1.00±0.00,实验组大鼠肾小球系膜细胞中lncRNA-uc.412的相对表达量为8.01±0.97,两组相比,P<0.05。结论 成功构建了lncRNA-uc.412重组质粒,并成功转染至大鼠肾小球系膜细胞。
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关键词
长链非编码RNA-
uc.412
重组质粒
肾小球系膜细胞
细胞增殖
肾病
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职称材料
题名
1,25-(OH)_(2)D_(3)通过lncRNA-uc.412抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖的机制研究
被引量：
1
1
作者
安梦如
黄婵
王锦
王银妃
盛晓静
张爱青
甘卫华
殷勤
机构
南京医科大学第二附属医院儿科
出处
《皖南医学院学报》
CAS
2021年第4期315-318,323,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(81970664,81670650)
江苏省“六个一工程”拔尖人才科研项目(LGY2018071)
+1 种基金
江苏省妇幼健康重点人才(FRC201737)
江苏省妇幼健康科研项目(F201508)。
文摘
目的:研究1,25二羟基维生素D 3[1,25-(OH)_(2)D_(3)]通过长链非编码RNA uc.412(lncRNA-uc.412)抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞增殖的可能机制。方法:用TGF-β1、1,25-(OH)_(2)D_(3)、SIS3分别干预系膜细胞,用lncRNA-uc.412过表达慢病毒转染系膜细胞,MTT法、流式细胞术检测系膜细胞增殖率,RT-PCR法检测ki67、p27、PCNA及lncRNA-uc.412的表达,Western blot检测smad3及p-smad3的表达。结果:①与TGF-β1组相比,1,25-(OH)_(2)D_(3)+TGF-β1干预后的ki67、PCNA、lncRNA-uc.412的表达下调,p27的表达上调(P<0.01),细胞增殖率下降(P<0.01);②TGF-β1+SIS3组p-smad3蛋白表达、lncRNA-uc.412的表达量较TGF-β1组下降(P<0.01);③与过表达lncRNA-uc.412组比较,过表达lncRNA-uc.412+1,25-(OH)_(2)D_(3)组的ki67、PCNA的表达下调,p27的表达上调(P<0.01)。结论:1,25-(OH)_(2)D_(3)可抑制TGF-β1诱导的大鼠系膜细胞增殖,其机制可能与1,25-(OH)_(2)D_(3)阻滞细胞周期及下调lncRNA-uc.412的表达水平有关。
关键词
1
25二羟基维生素D_(3)
长链非编码RNA
uc.412
转化生长因子Β1
系膜细胞
增殖
Keywords
1,25-(OH)_(2)D_(3)
lncRNA-
uc.412
TGF-β1
mesangial cells
proliferation
分类号
R692 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
lncRNA-uc.412重组质粒构建及在大鼠肾小球系膜细胞中的转染
被引量：
2
2
作者
陈俊宇
顾欣雨
顾靖钏
鱼敏逸
甘卫华
张爱青
机构
南京医科大学第二临床医学院
南京医科大学第二附属医院
出处
《山东医药》
CAS
2019年第24期9-12,共4页
基金
国家自然科学基金自助项目(81670650)
江苏省自然科学基金青年科技人才专项资金(BK20161071)
+1 种基金
江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目(201710312039Y
201710312010Z)
文摘
目的 构建长链非编码RNA-uc.412(lncRNA-uc.412)的重组质粒,并观察其转染后在大鼠肾小球系膜细胞中的表达情况。方法 自大鼠系膜细胞中提取总RNA,根据lncRNA-uc.412的基因信息设计上下游引物,应用PCR技术与琼脂糖凝胶电泳获得扩增后分离纯化的lncRNA-uc.412基因片段。将lncRNA-uc.412基因片段质粒与pRP[Exp]经双酶切处理后,通过凝胶电泳分离纯化,加入T4-DNA连接酶,即获得lncRNA-uc.412重组质粒。将lncRNA-uc.412重组质粒进行双酶切鉴定,检测目的基因片段大小;选取经双酶切鉴定连接成功的lncRNA-uc.412重组质粒,PCR扩增后进行双向测序。采用脂质体转染法转染lncRNA-uc.412重组质粒和空白质粒pRP[Exp]至大鼠肾小球系膜细胞,分别记为实验组和阴性对照组,采用RT-qPCR法检测lncRNA-uc.412在大鼠肾小球系膜细胞中的相对表达量。结果 lncRNA-uc.412重组质粒的双酶切鉴定结果显示,得到大小在200~300bp的特异性条带,与lncRNA-uc.412的长度相符。测序结果显示,lncRNA-uc.412重组质粒的碱基序列与理论预期序列一致。阴性对照组大鼠肾小球系膜细胞中lncRNA-uc.412的相对表达量记为1.00±0.00,实验组大鼠肾小球系膜细胞中lncRNA-uc.412的相对表达量为8.01±0.97,两组相比,P<0.05。结论 成功构建了lncRNA-uc.412重组质粒,并成功转染至大鼠肾小球系膜细胞。
关键词
长链非编码RNA-
uc.412
重组质粒
肾小球系膜细胞
细胞增殖
肾病
Keywords
long non-coding RNA-
uc.412
recombinant plasmid
mesangial cells
cell proliferation
nephropathy
分类号
R692.6 [医药卫生—泌尿科学]
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作者
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操作
1
1,25-(OH)_(2)D_(3)通过lncRNA-uc.412抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖的机制研究
安梦如
黄婵
王锦
王银妃
盛晓静
张爱青
甘卫华
殷勤
《皖南医学院学报》
CAS
2021
1
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职称材料
2
lncRNA-uc.412重组质粒构建及在大鼠肾小球系膜细胞中的转染
陈俊宇
顾欣雨
顾靖钏
鱼敏逸
甘卫华
张爱青
《山东医药》
CAS
2019
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