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根瘤菌Ⅲ型效应因子NopAA的突变及其对大豆共生结瘤的影响 被引量:1
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作者 马胜男 张浩然 +7 位作者 王悦 张煦杭 黄亚娸 王江旭 胡振帮 辛大伟 陈庆山 王锦辉 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期720-727,共8页
大豆根瘤固氮为大豆生长发育提供必不可少的氮源。根瘤菌Ⅲ型效应因子是大豆与根瘤菌共生体系建立过程中重要的信号分子。本研究以根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子NopAA为研究对象,通过生物信息学手段分析了其基本信息,利用三亲杂交构建NopAA... 大豆根瘤固氮为大豆生长发育提供必不可少的氮源。根瘤菌Ⅲ型效应因子是大豆与根瘤菌共生体系建立过程中重要的信号分子。本研究以根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子NopAA为研究对象,通过生物信息学手段分析了其基本信息,利用三亲杂交构建NopAA突变体,并利用Southern blot对突变体进行鉴定。表达分析发现,NopAA突变显著降低了大豆免疫相关基因PR1的表达;在根瘤成熟之后,根瘤菌依旧能够表达NopAA。最后通过结瘤能力鉴定,发现NopAA突变能够显著抑制根瘤的产生。该研究为揭示根瘤菌Ⅲ型效应因子NopAA的作用机制奠定了基础,同时为大豆农业生产过程中共生固氮的利用提供理论基础。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 Ⅲ型效应因子 表达分析 结瘤鉴定
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副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统(T3SS)效应蛋白及其对宿主细胞的操控 被引量:7
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作者 李楚楚 李伟燕 潘建义 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期247-251,共5页
副溶血弧菌是典型的食源性病原菌,也是全球范围内引起肠胃炎的主要病原菌。针筒状的Ⅲ型分泌系统(T3SS)为该菌主要的毒力因子,细菌感染时可将其效应蛋白直接注射至宿主细胞中,通过效应蛋白操纵宿主细胞,介导毒力的发挥。多数临床分离的... 副溶血弧菌是典型的食源性病原菌,也是全球范围内引起肠胃炎的主要病原菌。针筒状的Ⅲ型分泌系统(T3SS)为该菌主要的毒力因子,细菌感染时可将其效应蛋白直接注射至宿主细胞中,通过效应蛋白操纵宿主细胞,介导毒力的发挥。多数临床分离的副溶血弧菌含有2套T3SSs,其中T3SS1分泌的效应蛋白主要通过诱导细胞自噬、变圆和裂解等过程来发挥其细胞毒性,而T3SS2分泌的效应蛋白则主要通过破坏细胞骨架和操控细胞信号传导来发挥肠毒性。本文主要对副溶血弧菌T3SSs的组成和目前已发现的效应蛋白及其对宿主细胞的操控进行介绍。该研究不仅对深入了解该菌的致病机制有重要意义,而且也为宿主细胞信号转导机制研究提供新视角。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 Ⅲ型分泌系统(T3SS) 效应蛋白 细胞骨架 信号转导
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根瘤菌TtsI突变体构建及结瘤表型鉴定 被引量:1
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作者 田博宇 孙志君 +9 位作者 刘函西 文莹楠 王洁琦 吕浩 周红阳 黄修正 刘春燕 王锦辉 辛大伟 陈庆山 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期17-24,共8页
本论文以中华根瘤菌HH103 Ⅲ型分泌系统调控因子TtsI为研究对象,采用三亲杂交的方法获得突变体HH103ΩTtsI,并用PCR鉴定。Ⅲ型效应因子表达分析表明,在染料木苷存在的情况下,TtsI突变能够抑制NopAA、NopD、NopL和NopP等效应因子基因的... 本论文以中华根瘤菌HH103 Ⅲ型分泌系统调控因子TtsI为研究对象,采用三亲杂交的方法获得突变体HH103ΩTtsI,并用PCR鉴定。Ⅲ型效应因子表达分析表明,在染料木苷存在的情况下,TtsI突变能够抑制NopAA、NopD、NopL和NopP等效应因子基因的转录和表达。当TtsI突变情况下,能够显著抑制根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子的合成。用TtsI突变体和野生型根瘤菌HH103对来自不同生态区的10份种质资源进行结瘤鉴定,结果显示,TtsI突变后能够显著减少根瘤平均数和根瘤干重。导入系群体结瘤鉴定结果显示,TtsI突变体显著减少导入系平均瘤数。说明TtsI在大豆-根瘤菌共生体系建立过程中发挥重要的作用,这种作用的发挥有可能是依赖于调控其他Ⅲ型效应因子的表达。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 Ⅲ型效应因子 TtsI基因
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西瓜食酸菌Ⅲ型分泌效应物基因aop2功能分析
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作者 陈宝强 李莹莹 +5 位作者 马博雅 肉扎古丽·马利克 优丽图孜·乃比 宋金迪 刘君 王希东 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期286-297,共12页
Ⅲ型分泌效应物(type Ⅲ secreted effectors, T3SEs)是细菌性果斑病(bacterial fruit blotch, BFB)的病原菌——西瓜食酸菌(Acidovorax citrulli)分泌的关键致病因子。鉴定西瓜食酸菌特异的、具有GNAT(Gcn5-related N-acetyltransfera... Ⅲ型分泌效应物(type Ⅲ secreted effectors, T3SEs)是细菌性果斑病(bacterial fruit blotch, BFB)的病原菌——西瓜食酸菌(Acidovorax citrulli)分泌的关键致病因子。鉴定西瓜食酸菌特异的、具有GNAT(Gcn5-related N-acetyltransferase)超家族结构域的T3SE基因aop2,分析其编码蛋白质影响植物免疫的方式,可为深入认识该基因在病菌致病机制中的作用奠定基础。利用生物信息学分析其序列特征;借助荧光定量PCR技术分析aop2的表达调控及其表达与抗病相关基因表达间的关系;利用基因突变及基因功能互补手段,通过分析致病性、寄主活性氧积累量等解析基因功能;使用瞬时表达技术了解Aop2抑制激发子诱导的细胞坏死能力及其亚细胞定位情况。aop2基因启动子区存在Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system, T3SS)核心基因结合位点,其编码的蛋白不存在信号肽和跨膜螺旋区,含一个GNAT家族乙酰转移酶结构域但无同源蛋白;T3SS核心基因hrpG/hrpX突变体中aop2基因的表达量显著降低;缺失aop2基因的突变体对寄主黄瓜的致病力降低,但黄瓜子叶中活性氧积累量增加;Aop2可定位于烟草整个细胞,能够抑制由坏死因子NIP诱导的PCD(programmed cell death);Aop2的表达增强了烟草叶片中病原相关分子模式触发的免疫(PAMP-triggered immunity, PTI)信号通路,以及SA和JA信号通路相关基因的表达。结果表明,Aop2为西瓜食酸菌一个含有GNAT结构域的特异T3SE,其在与寄主黄瓜互作中发挥毒性因子功能,在与烟草互作中参与调控植物细胞死亡及PTI和植物激素相关抗病防卫反应。 展开更多
关键词 Ⅲ型分泌效应物 aop2 毒性因子 细胞死亡 乙酰转移酶 PTI 西瓜食酸菌
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三型分泌系统效应蛋白调控细胞凋亡和焦亡的研究进展 被引量:7
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作者 朱平 杜力杰 +3 位作者 孟昆 薛娟 杨瑾 李姗 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期178-187,共10页
病原菌感染对人类健康构成了严重的威胁,一类具有三型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS)的致病菌,可以通过T3SS将效应蛋白"注射"到宿主细胞中,去干扰宿主细胞的多种信号转导通路,从而促进病原菌的增殖和传播。T3SS效... 病原菌感染对人类健康构成了严重的威胁,一类具有三型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS)的致病菌,可以通过T3SS将效应蛋白"注射"到宿主细胞中,去干扰宿主细胞的多种信号转导通路,从而促进病原菌的增殖和传播。T3SS效应蛋白对宿主的影响被广泛研究,并且不同病原菌采取相似或不同的策略,同一种病原菌的效应蛋白又具有协同或拮抗的功能。综述了T3SS效应蛋白参与宿主细胞凋亡和焦亡信号通路过程中所发挥的功能及分子机制的最新研究进展,并进行了归纳分析,旨在为T3SS效应蛋白的深入研究提供参考和思路,从而进一步推进病原菌致病机制的研究,为防治病原菌提供理论基础。 展开更多
关键词 三型分泌系统 效应蛋白 细胞凋亡 细胞焦亡
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