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Evaluation of transgenic cotton lines expressing an insecticidal fern protein against whitefly,Bemisia tabaci(Gennadius)
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作者 KUMAR Rishi NAGRARE V.S. +14 位作者 SHAH Vivek SINGH Satnam PANDHER Suneet SINGH Satpal VERMA S.K. PAUL Debashis RATHORE Pankaj SHUKLA Anoop Kumar SINGH Mithlesh Kumar SAURABH Sharad KUMAR Harish KAUR Rupinderjeet SINGH Pradhyumna Kumar WAGHMARE V.N. PRASAD Y.G. 《Journal of Cotton Research》 2025年第2期163-177,共15页
Background Transgenic research in crops involves using genetic engineering techniques to introduce specific genes of interest from other organisms,or even entirely new genes into plant genomes to create crops with des... Background Transgenic research in crops involves using genetic engineering techniques to introduce specific genes of interest from other organisms,or even entirely new genes into plant genomes to create crops with desirable traits that wouldn’t be possible through conventional breeding methods.Transgenic crops have been developed for various traits globally.Whitefly,Bemisia tabaci(Gennadius)is one of the major sucking pests of cotton that cause significant damage to the cotton production.To combat whitefly infestations,researchers have developed four transgenic cotton lines expressing the fern protein.And those transgenic lines need to be evaluated for their performance against the target pest—whitefly.The evaluation was designed as controlled trials in polyhouse or muslin cloth cages under open-choice and no-choice conditions by comparing four transgenic cotton lines(A,B,C,and D)with three control groups,including untransformed cotton plants with a same genetic background of the transgenic line,conventionally bred whitefly-resistant cotton,and whitefly-susceptible cotton.In order to study the generational effect,the evaluation also involved studies on whitefly development in laboratory,muslin cloth cage,and polyhouse conditions.Results Both open-choice and no-choice experiments had shown that all the four transgenic cotton lines(A,B,C,and D)expressing the fern protein reduced adult whitefly numbers significantly compared with the control lines,except for the no-choice conditions in 2021,where the transgenic line C was non-significant different from the resistant control line.Notably,the nymphal population on the resistant control line was relatively low and nonsignificant different from the transgenic line C in 2021;and the transgenic lines A and C in 2022 under open-choice conditions.Under no-choice condition,the nymphal counts in the resistant control line was non-significant different from transgenic lines C and D in 2021;and transgenic line D in 2022.All transgenic lines showed significant decrease in egg hatching in 2021 and nymphal development in 2022,except for the transgenic line C which had no significant different in the nymphal development comparing with non-transgenic control lines in 2022.Adult emergence rates in both years of evaluation showed significant decrease in transgenic lines A and B comparing with the control lines.Additionally,the results showed a significant reduction in cotton leaf curl disease and sooty mold development in all the four transgenic lines compared with susceptible control under open-choice conditions,indicating potential benefits of transgenic lines beyond direct effect on whitefly control.Furthermore,the research explored the generational effects of the fern protein on whitefly which revealed the lowest fecundity in the transgenic line C across F0,F1 and F3 generations,lower egg hatching in F1 and F2 generations in transgenic lines A and B,shorter nymphal duration in F1 and F2 generations in transgenic line B,and the least total adult emergence in the transgenic line C in F0 and F3 generations.Conclusions These findings suggest that the transgenic cotton lines expressing fern protein disrupts whitefly populations and the life cycle to a certain extent.However,results are not consistent over generations and years of study,indicating these transgenic lines were not superior over control lines and need to be improved in future breeding. 展开更多
关键词 EVALUATION Fern protein transgenic cotton lines WHITEFLY
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Barley chitinase genes expression revamp resistance against whitefly (Bemisia Tabaci) in transgenic cotton (Gossypium hirsutum L.)
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作者 BASHIR Samina YAQOOB Amina +7 位作者 BASHIR Rohina BUKHARI Shanila SHAHID Naila AZAM Saira BAKHSH Allah HUSNAIN Tayyab SHAHID Ahmad Ali RAO Abdul Qayyum 《Journal of Cotton Research》 CAS 2024年第1期90-100,共11页
Background Chitinase is an enzyme that hydrolyzes chitin,a major component of the exoskeleton of insects,including plant pests like whiteflies.The present study aimed to investigate the expression of chemically synthe... Background Chitinase is an enzyme that hydrolyzes chitin,a major component of the exoskeleton of insects,including plant pests like whiteflies.The present study aimed to investigate the expression of chemically synthesized barley ch1 and chi2 genes in cotton(Gossypium hirsutum)through Agrobacterium-mediated transformation.Fifty-five putative transgenic cotton plants were obtained,out of which fifteen plants successfully survived and were shifted to the field.Using gene-specific primers,amplification of 447 bp and 401 bp fragments confirmed the presence of the ch1 and chi2 genes in five transgenic cotton plants of the T0 generation.These five plants were further evalu-ated for their mRNA expression levels.The T0 transgenic cotton plants with the highest mRNA expression level and better yield performance in field,were selected to raise their subsequent progenies.Results The T1 cotton plants showed the highest mRNA expression levels of 3.5-fold in P10(2)for the ch1 gene and 3.7-fold in P2(1)for the chi2 gene.Fluorescent in situ hybridization(FISH)confirmed a single copy number of ch1 and chi2(hemizygous)on chromosome no.6.Furthermore,the efficacy of transgenes on whitefly was evaluated through an insect bioassay,where after 96 h of infestation,mortality rates of whitefly were calculated to be 78%–80%in transgenic cotton plants.The number of eggs on transgenic cotton plants were calculated to be 0.1%–0.12 per plant compared with the non-transgenic plants where egg number was calculated to be 0.90–1.00 per plant.Conclusion Based on these findings,it can be concluded that the chemically synthesized barley chitinase genes(ch1 and chi2)have the potential to be effective against insects with chitin exoskeletons,including whiteflies.The transgenic cotton plants expressing these genes showed increased resistance to whiteflies,resulting in reduced egg numbers and higher mortality rates. 展开更多
关键词 CHITINASE Cotton White fly TRANSGENE BIOASSAY
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草甘膦防除耐除草剂转基因玉米田杂草效果评价
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作者 李美 张佳 +5 位作者 张玉 于凤阁 高兴祥 李健 林荣华 刘学 《植物保护》 北大核心 2025年第3期379-387,共9页
随着转基因耐除草剂作物在我国的试种推广,生产中急需其配套除草剂的应用技术。本研究在含DBN9936转化体转基因玉米田,研究了草甘膦在不同用药条件下对田间杂草的防除效果及对玉米的安全性;室内盆栽条件下研究了高剂量草甘膦土壤处理的... 随着转基因耐除草剂作物在我国的试种推广,生产中急需其配套除草剂的应用技术。本研究在含DBN9936转化体转基因玉米田,研究了草甘膦在不同用药条件下对田间杂草的防除效果及对玉米的安全性;室内盆栽条件下研究了高剂量草甘膦土壤处理的除草活性。结果表明,在2022年田间高湿条件下施药,41%草甘膦异丙胺盐水剂除草效果优异,810、1080、1350、4320 g/hm^(2)剂量处理药后22 d,对田间马唐Digitaria sanguinalis、牛筋草Eleusine indica、反枝苋Amaranthus retroflexus、马齿苋Portulaca oleracea、铁苋菜Acalypha australis等杂草总鲜重防效为99.6%~100.0%。在2023年田间干旱条件下施药,该药对杂草防效大幅下降,同等剂量处理药后23 d,对杂草总鲜重防效下降为86.9%、92.4%、95.1%、98.2%,对马唐、反枝苋防效较好,对牛筋草防效略低,对马齿苋、饭包草Commelina benghalensis的效果较差。两年数据表明,41%草甘膦异丙胺盐水剂试验剂量下对3~5叶期耐除草剂转基因玉米均安全,对杂草的防效均高于常规对照药剂52%烟嘧·莠去津可湿性粉剂702 g/hm^(2)处理。室内盆栽生物测定试验结果表明,草甘膦异丙胺盐原药600、1200、2400、4800、9600 g/hm^(2)剂量在杂草播后苗前土壤处理,对试验杂草未表现出明显的除草活性。 展开更多
关键词 草甘膦 耐除草剂转基因玉米 安全性 杂草 防效
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异源过表达大豆GmNF-YB24提高转基因烟草抗旱性
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作者 翟莹 计俊杰 +4 位作者 陈炯辛 于海伟 李珊珊 赵艳 马天意 《生物技术通报》 北大核心 2025年第8期137-145,共9页
【目的】核因子(NF-Y)基因参与植物抗旱性的调控。对大豆GmNF-YB24的抗旱功能及抗旱机制进行解析,为后续NF-YB基因在高抗大豆遗传育种中的应用提供理论依据。【方法】利用RT-qPCR检测GmNF-YB24在盐、干旱和低温胁迫下的表达。克隆Gm NF-... 【目的】核因子(NF-Y)基因参与植物抗旱性的调控。对大豆GmNF-YB24的抗旱功能及抗旱机制进行解析,为后续NF-YB基因在高抗大豆遗传育种中的应用提供理论依据。【方法】利用RT-qPCR检测GmNF-YB24在盐、干旱和低温胁迫下的表达。克隆Gm NF-YB24,构建植物表达载体并转化烟草。对GmNF-YB24转基因烟草的抗旱性进行鉴定。【结果】盐、干旱和低温胁迫均能诱导GmNF-YB24的表达,且GmNF-YB24的表达对干旱胁迫的响应最明显。GmNF-YB24开放阅读框全长516 bp,编码的蛋白含有171个氨基酸残基。GmNF-YB24蛋白序列中含有1个组蛋白折叠基序(HFM)。构建pRI101-GmNF-YB24植物表达载体并转化烟草。共获得5株GmNF-YB24转基因烟草植株(OE1-OE5)。干旱及复水处理后,GmNF-YB24转基因烟草的表现优于野生型烟草。干旱胁迫下,与野生型烟草相比,GmNF-YB24转基因烟草的脯氨酸和可溶性糖含量增加,相对电解质渗透率和丙二醛含量降低,抗氧化酶活性提高,减少了过氧化物的积累。GmNF-YB24转基因烟草中胁迫相关基因NtOsmotin和NtERD10B的表达量高于野生型烟草。【结论】GmNF-YB24在烟草中的异源过表达提高了转基因烟草的抗旱性。 展开更多
关键词 大豆 核因子Y NF-YB 转基因烟草 抗旱性
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转基因抗虫耐除草剂玉米LD05纯杂合植株的鉴定及抗性检测
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作者 李文兰 侯辛未 +3 位作者 李燕 赵瑞君 孟昭东 岳润清 《生物技术通报》 北大核心 2025年第4期123-133,共11页
【目的】在回交转育过程中利用分子检测手段将转基因玉米LD05目标性状准确快速导入育种常规自交系中,并明确LD05纯杂合株系和对照郑58在抗虫融合基因m2cryAb-vip3A表达水平、抗虫性和农艺性状等方面是否存在差异。【方法】通过左右边界... 【目的】在回交转育过程中利用分子检测手段将转基因玉米LD05目标性状准确快速导入育种常规自交系中,并明确LD05纯杂合株系和对照郑58在抗虫融合基因m2cryAb-vip3A表达水平、抗虫性和农艺性状等方面是否存在差异。【方法】通过左右边界引物进行PCR扩增鉴定外源目的基因m2cryAb-vip3A在自交系中的纯杂合,利用RT-qPCR和ELISA开展m2cryAb-vip3A在转录和翻译水平的表达分析,并通过室内生测和田间接虫试验鉴定LD05纯杂合株系对靶标害虫亚洲玉米螟、草地贪夜蛾、黏虫和棉铃虫的抗性,通过田间调查和室内考种对LD05纯杂合株系和对照郑58在农艺性状方面的差异进行比较分析。【结果】通过筛选优化鉴定,确定LC915+LC966为最优纯杂合鉴定引物。纯杂合株系中外源插入基因m2cryAb-vip3A在转录和翻译水平存在差异,纯合株系中普遍高于杂合株系。室内生测结果显示,喂食LD05纯合株系和杂合株系心叶期叶片,玉米螟、草地贪夜蛾、黏虫的校正死亡率均达到100%,为高抗级别;田间接虫试验结果显示,LD05纯合株系和杂合株系在心叶期和花丝期对玉米螟、心叶期对黏虫、花丝期对棉铃虫的抗性等级均为高抗。农艺性状调查显示LD05纯合株系、杂合株系和对照郑58无差别。【结论】建立了基于普通PCR的LD05转化体中目的基因的纯杂合鉴定方法,明确外源目的基因m2cryAb-vip3A在LD05纯杂合株系中表达存在差异,但在抗虫性和农艺性状等方面没有显著差异。 展开更多
关键词 m2cryAb-vip3A基因 纯杂合鉴定 抗虫性 转基因 玉米
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RNA干扰沉默褐飞虱糖转运蛋白基因4的研究
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作者 谢坤 丁汉凤 +6 位作者 李娜娜 贾素平 白静 丛韫喆 李广贤 姚方印 杨永义 《山东农业科学》 北大核心 2025年第1期22-29,共8页
褐飞虱是水稻上危害最严重的害虫之一,目前的防治措施存在各种弊端,开展控制褐飞虱的探索研究可开辟新的防治途径。本研究利用dsRNA(double-stranded RNA,双链RNA)介导的RNAi(RNA interference,RNA干扰)技术,以褐飞虱糖运输蛋白基因(Nls... 褐飞虱是水稻上危害最严重的害虫之一,目前的防治措施存在各种弊端,开展控制褐飞虱的探索研究可开辟新的防治途径。本研究利用dsRNA(double-stranded RNA,双链RNA)介导的RNAi(RNA interference,RNA干扰)技术,以褐飞虱糖运输蛋白基因(Nlst4)为靶标,在体外合成Nlst4的dsRNA,将其饲喂褐飞虱若虫后,其体内目标基因表达量显著下降,产生致死表型;构建Nlst4的RNAi干扰载体,通过农杆菌侵染转化培育转基因水稻,褐飞虱取食后,体内目标基因转录水平显著降低,1龄、2龄若虫发育历期显著延长,但未出现致死表型。试验结果证实,利用RNAi技术通过培育转基因水稻防治褐飞虱存在可行性,可为后续转基因抗褐飞虱水稻的培育提供科学依据。 展开更多
关键词 褐飞虱 RNA干扰 糖转运蛋白基因4 人工饲喂 转基因水稻
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扭果花旗杆DePIP1;1基因的克隆及功能分析
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作者 葛风伟 邹丽媛 胡尔西旦·吐尔逊 《植物资源与环境学报》 北大核心 2025年第4期23-31,共9页
以扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim.)为研究材料,克隆了前期转录组分析获得的盐胁迫下高表达的水通道蛋白(AQP)基因,命名为DePIP1;1,GenBank登录号OM864582。利用生物信息学方法分析该基因及蛋白序列,并进行表达模式分析;为进一... 以扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim.)为研究材料,克隆了前期转录组分析获得的盐胁迫下高表达的水通道蛋白(AQP)基因,命名为DePIP1;1,GenBank登录号OM864582。利用生物信息学方法分析该基因及蛋白序列,并进行表达模式分析;为进一步研究该基因抗逆分子调控机制,构建了过表达重组载体pCAMBIA1300-GFP∷DePIP1;1并遗传转化拟南芥[Arabidopsis thaliana(Linn.) Heynh.],验证了转基因拟南芥的抗盐胁迫能力。结果表明:DePIP1;1基因cDNA全长864 bp,编码287个氨基酸;DePIP1;1蛋白的理论等电点为pI 9.14,相对分子质量为30 685.71,亲水性平均系数为0.384,无信号肽,定位于细胞膜,共有6个跨膜结构域,符合AQP家族典型结构特征。DePIP1;1蛋白的二级结构含49.48%无规卷曲、33.80%α螺旋和16.72%延伸链,三级结构预测结果显示该蛋白存在同型四聚体结构。系统进化树分析结果表明:DePIP1;1蛋白与盐芥[Eutrema salsugineum(Pall.) Al-Shehbaz et Warwick]和拟南芥PIP1;1蛋白的同源性较高。基因表达模式分析结果表明:DePIP1;1基因在花瓣、叶、雌雄蕊、茎和根中均有表达,其中,在茎中表达量最高,在根中表达量最低;在干旱(250 mmol·L^(-1)甘露醇)、盐(150 mmol·L^(-1)NaCl)和冷(4℃)胁迫及10μmol·L^(-1)脱落酸处理下,扭果花旗杆茎和叶中DePIP1;1基因表达上调明显,根中DePIP1;1基因仅对干旱和盐胁迫有轻微响应。在100和200 mmol·L^(-1)NaCl胁迫下,过表达DePIP1;1拟南芥株系的根长、侧根数、叶片数均高于野生型;在200 mmol·L^(-1)NaCl胁迫下,过表达DePIP1;1拟南芥株系的总叶绿素含量显著高于野生型;而过表达DePIP1;1拟南芥株系和野生型的相对含水量差异不明显。综上所述,DePIP1;1基因表达具有组织特异性,并受逆境和激素诱导;过表达DePIP1;1可提高拟南芥的抗盐性。 展开更多
关键词 扭果花旗杆 DePIP1 1 基因克隆 逆境胁迫 转基因
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巴西橡胶树病程相关蛋白:抗逆、乳管堵塞、过敏原性及转基因育种
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作者 代龙军 刘明洋 《热带作物学报》 北大核心 2025年第10期2287-2298,共12页
病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PR蛋白)是植物响应胁迫的重要功能蛋白,在巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中具有多重生物学作用。本文系统综述了橡胶树PR蛋白的研究进展,重点探讨其在抗逆机制、乳管堵塞及过敏原性方面的... 病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PR蛋白)是植物响应胁迫的重要功能蛋白,在巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中具有多重生物学作用。本文系统综述了橡胶树PR蛋白的研究进展,重点探讨其在抗逆机制、乳管堵塞及过敏原性方面的功能特性,特别关注了PR蛋白与乳管堵塞的重要关系。PR蛋白通过复杂的分子网络参与橡胶树的防御反应,可能通过乳管堵塞过程影响胶乳产量;部分PR蛋白具有较强的过敏原性。PR蛋白的转基因研究已取得初步进展,但需进一步优化表达调控策略以平衡抗逆性、产量和过敏原性等性状。未来研究应加强PR蛋白作用机制的解析,特别是深入探究几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶这2种病程相关蛋白的表达水平与橡胶产量之间的关联性,同时重视对PR-14等尚未充分研究的蛋白类别的功能研究,开发精准的分子育种技术,为橡胶树品种改良提供理论依据和技术支撑。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 病程相关蛋白 抗逆 乳管堵塞 过敏原性 转基因育种
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戈壁异常球菌csp2基因提高玉米的抗旱性 被引量:1
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作者 许忆葳 张莹莹 +5 位作者 李瑞 燕永亮 刘允军 孔照胜 郑军 王逸茹 《作物学报》 北大核心 2025年第8期1981-1990,共10页
csp2基因来源于戈壁异常球菌,该菌对伽马射线、紫外线和干旱等损伤因子表现出极强的抗性。本研究按照植物密码子优化csp2并合成基因,构建p3301-csp2植物表达载体后转化玉米,在苗期和成株期评价转csp2基因玉米的耐旱性。研究发现,在干旱... csp2基因来源于戈壁异常球菌,该菌对伽马射线、紫外线和干旱等损伤因子表现出极强的抗性。本研究按照植物密码子优化csp2并合成基因,构建p3301-csp2植物表达载体后转化玉米,在苗期和成株期评价转csp2基因玉米的耐旱性。研究发现,在干旱处理条件下,csp2过表达株系苗期相比野生型表现出了更强的耐旱表型,相对含水量显著提高,电导率、MDA含量和H2O2含量均显著降低。此外,成株期耐旱性鉴定结果表明,csp2可提高玉米在干旱胁迫下的穗长和单穗重,过表达株系的产量显著高于对照。转录组分析表明,csp2通过调控茉莉酸信号通路、干旱胁迫相关激酶以及WRKY、ERF转录因子的表达响应干旱胁迫。因此,异源表达戈壁异常球菌csp2可以显著提高玉米的耐旱性,csp2可作为培育耐旱转基因玉米的优良基因。 展开更多
关键词 csp2 戈壁异常球菌 转基因玉米 耐旱 RNA-SEQ
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利用基因组测序技术鉴定家蚕转基因位点方法的建立
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作者 周昂 蒋晶晶 +4 位作者 左伟东 陈欣 童晓玲 代方银 李春林 《西南大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期113-122,共10页
建立一种基于基因组测序技术高效鉴定家蚕转基因插入位点的方法,并分析测序深度对位点鉴定准确性的影响,从而为家蚕及其他物种利用基因组测序技术开展低成本、高通量的转基因位点鉴定提供参考。首先,采集两份家蚕转基因材料的蛹,进行全... 建立一种基于基因组测序技术高效鉴定家蚕转基因插入位点的方法,并分析测序深度对位点鉴定准确性的影响,从而为家蚕及其他物种利用基因组测序技术开展低成本、高通量的转基因位点鉴定提供参考。首先,采集两份家蚕转基因材料的蛹,进行全基因组测序,并经过质量控制筛选出高质量的测序后读段(reads)。以载体序列和家蚕基因组为参考,经两轮比对分析,得到覆盖基因组和载体的目标reads。利用目标reads上的基因组序列在家蚕泛基因组数据库中进行比对分析,进而获得插入位点的具体位置。随后,运用Seqtk软件对数据进行抽样,分析不同测序深度对位点鉴定准确性的影响。两份材料的基因组测序数据分别为9.76 G和11.18 G,质控后读段(clean reads)数量分别为32639026和37394695,测序深度约为20×。序列比对分析和聚合酶链式反应(PCR)实验验证结果显示:TransGene_1的插入位点位于1号染色体1899494 bp与1899495 bp之间;TransGene_2的插入位点位于21号染色体959510 bp与959515 bp之间,且插入位点均处于基因间区。利用两份转基因材料的基因组测序数据进行不同测序深度的模拟分析,发现转基因材料TransGene_1在测序深度为6×时就能够得到覆盖两侧断点的reads,实现精确定位,而TransGene_2则需要测序深度达到10×及以上才能实现精确定位。 展开更多
关键词 家蚕 转基因插入位点 基因组测序 测序深度 转基因鉴定
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甜瓜转基因株系表型性状差异的研究
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作者 刘秉雪 贺玉花 +5 位作者 徐永阳 田小琴 张健 孔维虎 唐伶俐 赵光伟 《中国瓜菜》 北大核心 2025年第5期20-27,共8页
通过CRISPR-Cas9技术对甜瓜基因MELO3C002050进行编辑,旨在探究转基因甜瓜的倍性变化及其对表型性状的影响。对51株阳性苗进行表型和基因编辑鉴定,结果显示,45株(A型)果实显著伸长,符合基因编辑预期,且基因编辑成功;6株(B型)表现花器官... 通过CRISPR-Cas9技术对甜瓜基因MELO3C002050进行编辑,旨在探究转基因甜瓜的倍性变化及其对表型性状的影响。对51株阳性苗进行表型和基因编辑鉴定,结果显示,45株(A型)果实显著伸长,符合基因编辑预期,且基因编辑成功;6株(B型)表现花器官增大、节间缩短、果实变短、种子变宽等异常表型,但未发生基因编辑。流式细胞仪检测结果表明,B型植株DNA含量加倍(四倍体率11.76%)。综上,在甜瓜遗传转化过程中,可能导致染色体数目自发加倍,从而引起表型异常。因此,在甜瓜基因编辑表型评价中,优先通过倍性检测排除多倍体干扰,对基因编辑植株表型的精准评价尤为重要。 展开更多
关键词 甜瓜 转基因植株 多倍体 流式细胞仪
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转基因抗虫耐除草剂玉米LP026-2对田间节肢动物群落多样性的影响
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作者 范千千 杨淑珂 +3 位作者 李凡 徐晓辉 郝超峰 孙红炜 《生物安全学报(中英文)》 北大核心 2025年第4期361-368,共8页
【目的】节肢动物在田间发挥着重要的生态功能,转基因作物对节肢动物群落多样性的影响是转基因作物环境安全评价的重要内容。为明确转cry2Ab、cry1Fa、cry1Ab和epsps基因抗虫耐除草剂玉米LP026-2对节肢动物的安全性,开展了该转基因玉米... 【目的】节肢动物在田间发挥着重要的生态功能,转基因作物对节肢动物群落多样性的影响是转基因作物环境安全评价的重要内容。为明确转cry2Ab、cry1Fa、cry1Ab和epsps基因抗虫耐除草剂玉米LP026-2对节肢动物的安全性,开展了该转基因玉米对田间节肢动物群落多样性影响的研究。【方法】以转基因玉米LP026-2及其对照非转基因玉米AX808为试验材料,从玉米定苗后10 d到成熟,利用直接观察法和地面陷阱法,每7 d调查一次,以多样性指数、优势集中性指数、均匀性指数等参数作为评价指标,系统研究转基因玉米LP026-2对田间节肢动物群落多样性的影响,并分析对主要植食性害虫和天敌昆虫种群动态的影响。【结果】转基因玉米LP026-2与对照相比,直接观察法分别观察到节肢动物718和754头,共鉴定出2纲9目30科,地面陷阱法分别观察到节肢动物3057和3597头,共鉴定出5纲12目28科,田间节肢动物类群和数量组成无显著差异;田间节肢动物多样性指数、优势集中性指数、均匀性指数随时间变化趋势基本一致;田间主要植食性害虫双斑莹叶甲、大青叶蝉、赤须盲蝽的种群动态及发生数量基本一致;田间主要天敌类昆虫小花蝽、中华草蛉、龟纹瓢虫的种群动态及发生数量也基本一致。【结论】初步认为转基因抗虫耐除草剂玉米LP026-2对节肢动物群落多样性无安全风险,结果可为转基因玉米LP026-2的推广提供基础的环境安全数据。 展开更多
关键词 转基因玉米 节肢动物 生物多样性 种群动态
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转基因玉米WYN17132转化体特异性实时荧光PCR检测方法的建立与应用
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作者 咸若彤 缪青梅 +7 位作者 彭城 陈笑芸 杨蕾 徐晓丽 魏巍 徐俊锋 李玥莹 汪小福 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第7期1397-1406,共10页
WYN17132是我国自主研发的转am79-epsps基因耐草甘膦转基因玉米品种,已获得全国生产应用安全证书,但目前缺少相应的检测方法。为进一步落实我国转基因产品监测工作,本研究建立了针对该转化体特异性的实时荧光PCR检测方法。以转基因玉米W... WYN17132是我国自主研发的转am79-epsps基因耐草甘膦转基因玉米品种,已获得全国生产应用安全证书,但目前缺少相应的检测方法。为进一步落实我国转基因产品监测工作,本研究建立了针对该转化体特异性的实时荧光PCR检测方法。以转基因玉米WYN17132的外源插入序列与玉米基因组连接区域的侧翼序列为靶序列,设计多组特异性引物探针,筛选最佳引物探针组合,并系统评价该方法的特异性、检出限(LOD)和再现性。通过筛选,确定17132RB-qF3/qR3/qP3为最佳引物探针组合,该组合扩增片段为132 bp。本研究建立的WYN17132转化体特异性实时荧光PCR检测方法特异性良好,仅对目标转化体产生特异性扩增;方法灵敏度高,检出限可达0.05%;再现性稳定,适用性强。该检测方法能满足转基因玉米WYN17132的检测需求,为我国转基因玉米的监测监管和标识溯源提供了技术支撑。 展开更多
关键词 转基因玉米WYN17132 转化体特异性 实时荧光PCR
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大豆P34蛋白基因启动子克隆及其调控活性分析
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作者 桑莹莹 李珊珊 +3 位作者 鲍薇 徐东 张雪 赵艳 《华北农学报》 北大核心 2025年第1期22-28,共7页
大豆P34蛋白主要存在于种子中,其上游启动子很可能具有调控下游基因在种子中高表达的特性。为进一步研究大豆P34蛋白基因的组织表达模式及其启动子的调控活性,通过qRT-PCR方法检测大豆P34蛋白基因在大豆不同组织中的表达情况;克隆大豆P3... 大豆P34蛋白主要存在于种子中,其上游启动子很可能具有调控下游基因在种子中高表达的特性。为进一步研究大豆P34蛋白基因的组织表达模式及其启动子的调控活性,通过qRT-PCR方法检测大豆P34蛋白基因在大豆不同组织中的表达情况;克隆大豆P34蛋白基因5′端上游序列(GmP34P),生物信息学分析其转录起始位点和顺式元件;构建表达载体,利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,检测转基因烟草中GUS的表达。结果表明,P34蛋白基因在大豆种子中的表达量极显著高于根、茎、叶和花的表达量;克隆获得GmP34P序列长度为1 380 bp,预测分析表明,该序列的转录起始位点为第1 342位上的碱基A,序列中含有多种与种子高表达相关的顺式作用元件,如RY element、Skn-1 motif、2S seed protbanapa等;获得含有GmP34P启动子驱动GUS基因的植物表达载体pCAM-GmP34P;通过潮霉素、PCR及RT-PCR筛选阳性转基因植株;对pCAM-GmP34P阳性转基因烟草植株,进行qRT-PCR检测,结果显示,相对于其他组织,GUS基因在转基因烟草种子中的表达量达到极显著差异;GUS组织化学染色结果显示,GmP34P启动子能够调控下游GUS基因在种子中高表达。 展开更多
关键词 大豆 P34蛋白 启动子 生物信息学分析 转基因烟草
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抗菌肽MaSAMP的生信分析、基因克隆及遗传转化
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作者 廖名静 李向阳 +5 位作者 吕远达 姜波 李娟 钟云 王婷 郑蓝艳 《热带作物学报》 北大核心 2025年第7期1554-1561,共8页
来源于澳指檬(Microcitrus australasica)的一种抗菌肽(stable antimicrobial peptide,SAMP),不仅可以降低已感染柑橘黄龙病的病树体内的黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)浓度、减轻病树症状,而且还可以诱导未感染黄... 来源于澳指檬(Microcitrus australasica)的一种抗菌肽(stable antimicrobial peptide,SAMP),不仅可以降低已感染柑橘黄龙病的病树体内的黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)浓度、减轻病树症状,而且还可以诱导未感染黄龙病的健康树先天免疫、阻止感染黄龙病。本研究对MaSAMP的功能结构、亚细胞定位、系统发育等进行分析,结果表明,MaSAMP的开放阅读框(open reading frame,ORF)全长为201 bp,编码67个氨基酸,编码的蛋白分子量为7.59959 kDa,理论等电点为5.38,不稳定指数[instability index(II)]为33.22,脂肪族氨基酸系数(aliphatic index)为87.16%,平均亲水系数(grandaverageofhydropathicity)为–0.091,属于亲水性蛋白,含有1个Dabb结构域,MaSAMP蛋白结构以α-螺旋、无规则卷曲为主。MaSAMP与甜橙胁迫响应A/B桶状结构域蛋白CISIN_(1)g033887mg、克里曼丁橘A/B桶状结构域蛋白HS1亲缘关系较近,蛋白相似度分别为97.01%、91.04%。亚细胞定位结果显示,MaSAMP定位于叶绿体。进一步通过同源重组成功构建了融合EGFP荧光标签的pCAMBIA1300-35S::MaSAMP-EGFP过表达载体,并借助农杆菌介导的原位转化技术获得柑橘转基因植株。本研究为后续MaSAMP的生物学功能研究提供材料基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 澳指檬 生物信息学分析 载体构建 转基因
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番杏类甜蛋白基因TtTLP11超表达的转基因拟南芥对非生物胁迫的抗性功能分析
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作者 黄增旺 谢富英 +2 位作者 简曙光 黎庭耀 张美 《热带作物学报》 北大核心 2025年第10期2335-2345,共11页
番杏[Tetragonia tetragonoides(Pall.)Kuntze]是一种抗逆性极强的海水蔬菜。植物类甜蛋白[thaumatin-like protein,(TLP)]基因参与调控多种生物和非生物胁迫应答。为了探究番杏TtTLP基因的抗逆功能,本研究克隆了一个番杏类甜蛋白基因(T... 番杏[Tetragonia tetragonoides(Pall.)Kuntze]是一种抗逆性极强的海水蔬菜。植物类甜蛋白[thaumatin-like protein,(TLP)]基因参与调控多种生物和非生物胁迫应答。为了探究番杏TtTLP基因的抗逆功能,本研究克隆了一个番杏类甜蛋白基因(TtTLP11),并在模式植物拟南芥中进行转基因超表达,获得T3代转基因植株,以转TtTLP11基因拟南芥和野生型拟南芥为试验材料,进行高盐、高渗、高温胁迫和盐碱混合胁迫处理,通过测定种子萌发、幼苗生长状况和检测转基因植株的抗逆性,明确番杏TtTLP11基因的抗逆性功能并探讨可能的作用机制。结果表明:在多种非生物胁迫条件下,TtTLP11基因过表达可减轻胁迫对转基因拟南芥种子萌发的抑制,缓解幼苗受到的伤害,并提高植物的抗逆性。推测该基因可能通过缓解植物体内渗透压剧烈变化,维持细胞内水分平衡,增强植物对非生物胁迫的耐受性。本研究结果为深入解析植物缓解非生物胁迫侵害的分子调控网络提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 番杏 类甜蛋白基因 非生物胁迫 转基因拟南芥
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转基因大豆CAL16转化体特异性定量检测方法的建立
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作者 王沛然 陆佳雨 +5 位作者 许学 吴爽 李晨 胡笑林 潘伟芹 汪秀峰 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第4期1036-1050,共15页
以杭州瑞丰生物科技有限公司研发的转Cry1Ab/Vip3Da基因抗虫大豆,即转基因大豆CAL16为材料,建立CAL16转化体特异性定量PCR检测方法,旨在给我国CAL16及其衍生品系的生物育种产业化提供技术支撑。根据5′端和3′端旁侧序列设计引物探针组... 以杭州瑞丰生物科技有限公司研发的转Cry1Ab/Vip3Da基因抗虫大豆,即转基因大豆CAL16为材料,建立CAL16转化体特异性定量PCR检测方法,旨在给我国CAL16及其衍生品系的生物育种产业化提供技术支撑。根据5′端和3′端旁侧序列设计引物探针组合,筛选出5′端一对最佳引物组合,PCR产物片段大小为112 bp。经特异性测试、标准曲线的建立、正确度和精密度测试、检出限和定量限测试、稳健性测试、微滴式数字PCR验证,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。检出限达到0.025%,相当于10个拷贝的CAL16特异性片段;定量限达到0.1%,约为40个拷贝。实验室间循环验证显示:该方法符合国家标准方法各项要求,可满足检测需求。最终对CAL16定量方法进行不确定度评定,确保量值科学可靠,满足定量标识的需求。 展开更多
关键词 转基因大豆 CAL16 转化体特异性 定量检测 不确定度
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大豆转基因检测体系PCR-CRISPR/Cas12b的创建 被引量:2
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作者 陈珊珊 乾义柯 +2 位作者 牛蒙亮 胡广 王智 《核农学报》 北大核心 2025年第10期2104-2113,共10页
为建立转基因大豆CV127、DP305423、FG72的快速准确检测方法,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)结合簇状规则间隔短回文重复序列及相关蛋白Cas12b(CRISPR/Cas12b)检测技术,根据转基因大豆CV127、DP305423、FG72三种元件及内源基因18S rRNA... 为建立转基因大豆CV127、DP305423、FG72的快速准确检测方法,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)结合簇状规则间隔短回文重复序列及相关蛋白Cas12b(CRISPR/Cas12b)检测技术,根据转基因大豆CV127、DP305423、FG72三种元件及内源基因18S rRNA设计特异引物和CRISPR/Cas12b sgRNA,优化反应温度、反应时间和验证特异性、灵敏度,建立了PCR扩增结合CRISPR/Cas12b快速检测方法。通过PCR扩增反应35个循环后,取1μL扩增产物加入CRISPR/Cas12b体系中,45℃恒温条件下,15 min内即可观察到明显荧光信号;内源基因18S rRNA对应的sgRNA检测转基因与非转基因大豆均有荧光信号,CV127、DP305423、FG72对应的sgRNA仅在含有对应转基因元件的样品中检测到荧光信号,特异性较强;18S rRNA、CV127、DP305423、FG72对应检测体系最低检出限为10-1 pg·μL^(-1)、10-1 pg·μL^(-1)、1 fg·μL^(-1)和1 fg·μL^(-1),灵敏度较高;PCR-CRISPR/Cas12b检测法能快速准确鉴定CV127、DP305423、FG72三种转基因大豆。本研究为转基因作物提供了分子检测新方法,对提升转基因作物监管能力、有序推进生物育种产业化应用意义重大。 展开更多
关键词 转基因大豆 PCR CRISPR/Cas12b 检测
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异源表达csp2基因提高玉米苗期耐盐性
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作者 王国旭 许忆葳 +6 位作者 张莹莹 李瑞 李健 陈雨欣 韩新运 彭云玲 郑军 《植物遗传资源学报》 北大核心 2025年第10期2037-2048,共12页
玉米是重要的粮饲兼用作物,盐胁迫严重影响其生长和产量,因此改良玉米耐盐性尤为重要。以csp2基因过表达的玉米CAL纯合株系为材料,对盐胁迫处理后苗期表型及生理指标进行测定分析。结果表明,与CAL相比,盐胁迫下csp2过表达株系存活率显... 玉米是重要的粮饲兼用作物,盐胁迫严重影响其生长和产量,因此改良玉米耐盐性尤为重要。以csp2基因过表达的玉米CAL纯合株系为材料,对盐胁迫处理后苗期表型及生理指标进行测定分析。结果表明,与CAL相比,盐胁迫下csp2过表达株系存活率显著升高,丙二醛和过氧化氢含量显著降低,且具有更高的过氧化氢酶活性和脯氨酸含量,同时地上部Na+含量和Na+/K+显著低于CAL,表明csp2过表达株系的盐胁迫耐受性高于CAL,揭示csp2基因正向调控玉米耐盐性。为进一步解析csp2基因耐盐胁迫可能的调控机制,对CAL与csp2OE-72株系在正常水处理和盐胁迫12 h后进行转录组测序分析,结果表明,差异表达基因主要富集到细胞外围、代谢过程、植物激素信号转导等方面,同时也参与了对脱落酸的响应、淀粉和蔗糖代谢及氨基酸跨膜运输等途径。研究结果证实了csp2基因在玉米耐盐方面的重要功能,有望用于玉米耐盐性的遗传改良。 展开更多
关键词 转基因玉米 csp2基因 耐盐性 转录组分析
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Guarding the cotton fields by refining the resilience against sucking pests:use of cutting-edge breeding and other techniques
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作者 DINESH KUMAR G. MANIKANDA BOOPATHI N. +9 位作者 GEETHANJALI S. SUBRAMANIAN A. SOMASUNDARAM S. KANNAN M. PREMALATHA N. SHOBHANA V.G. RAMYA SELVI N. NIVETHA D.K. AKASH A. RAVIKESAVAN R. 《Journal of Cotton Research》 2025年第2期302-313,共12页
In addition to the negative consequences of climate change,sucking pest complexes severely limited cotton yields in the recent past.Although the damage caused by bollworms was much reduced by utilizing Bt cotton,the e... In addition to the negative consequences of climate change,sucking pest complexes severely limited cotton yields in the recent past.Although the damage caused by bollworms was much reduced by utilizing Bt cotton,the emergence of sucking pests(such as aphids,thrips,and whiteflies)poses a serious threat to cotton production,as they reduce lint yield by 40%–60%finally.Additionally,these pests also caused yield losses by spreading viral diseases.Promoting innovative and thorough control methods is necessary to counter the threat posed by these sucking pests.Such initiatives necessitate a multifaceted strategy that combines next-generation breeding technology and pest management techniques to produce novel cotton cultivars that are resistant to sucking pests.The discovery of novel genes and regulatory factors linked to cotton’s resistance to sucking pests will be possible by the combination of next-generation breeding technologies and omics approaches and employing those tools on special resistant donors.Continuous research aimed at understanding the genetic basis of insect resistance and improving integrated pest management(IPM)techniques is crucial to the sustainability and resilience of cotton cropping systems.To this end,a sustainable and viable strategy to protect cotton fields from sucking pests is outlined. 展开更多
关键词 Cotton Sucking pests Genomic selection High throughput phenotyping transgenic GWAS TRANSCRIPTOMICS
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