Toll样受体7激动剂治疗过敏性疾病的研究进展 被引量：2

1

作者 王玲 蔡铠红 +2 位作者 詹文珠 殷国干 叶琳 《医药导报》 CAS 北大核心 2024年第5期769-773,共5页

Toll样受体(TLR)7是TLR家族中的一员,是Ⅰ型跨膜糖蛋白,由细胞质Toll/白细胞介素-1受体同源性(TIR)信号传导结构域和包含19~25个串联富含亮氨酸重复基序的外部抗原识别结构域组成。人体内TLR7主要分布在浆树突状细胞(pDC)和B细胞的胞体... Toll样受体(TLR)7是TLR家族中的一员,是Ⅰ型跨膜糖蛋白,由细胞质Toll/白细胞介素-1受体同源性(TIR)信号传导结构域和包含19~25个串联富含亮氨酸重复基序的外部抗原识别结构域组成。人体内TLR7主要分布在浆树突状细胞(pDC)和B细胞的胞体内体膜上,通过高尔基体的囊泡从内质网穿梭至内体。内体膜上的TLR7与病毒来源的单链RNA分子或咪唑啉类似物结合从而被激活,进一步诱导Ⅰ型干扰素的合成,从而启动辅助性T淋巴细胞(TH)1细胞的激活,快速招募炎症细胞到感染部分,发挥抗病毒、抗肿瘤以及抗过敏的功能。TLR7激活后由于具有调节TH1/TH2细胞比例的作用,其配体用于治疗过敏性疾病的研究日益受到关注。该文围绕TLR7激动剂对过敏性哮喘、过敏性鼻炎以及过敏性脑炎的临床前研究和临床试验研究进行综述,以期为过敏性疾病的治疗提供新思路。 展开更多

关键词 tlr7激动剂 toll样受体 过敏性哮喘 过敏性鼻炎 过敏性脑炎

在线阅读 下载PDF 职称材料

Toll样受体7/8激活剂雷西莫特(R848)在牛XY精子分离中的应用研究 被引量：1

2

作者 卫利选 贾志宏 +5 位作者 曹平 贺周争雁 李龙 张力妮 罗茜 牛隽 《畜牧兽医科技信息》 2024年第7期51-53,共3页

本研究应用TLR7/8受体蛋白的激活剂雷西莫特(R848)进行XY精子分离,经R848孵育后X精子的运动性能受到抑制,Y精子的运动性能未受影响,这种对X精子的运动性能的抑制是可恢复的。用上游法分离XY精子并洗脱R848后,稀释重悬混匀精液后冷冻保存... 本研究应用TLR7/8受体蛋白的激活剂雷西莫特(R848)进行XY精子分离,经R848孵育后X精子的运动性能受到抑制,Y精子的运动性能未受影响,这种对X精子的运动性能的抑制是可恢复的。用上游法分离XY精子并洗脱R848后,稀释重悬混匀精液后冷冻保存,并对冷冻保存精子的运动指标、活力、畸形率、顶体和质膜完整性等指标进行检测,结果显示与普通冷冻精液相比未发生显著性变化,说明用TLR7/8特异性蛋白激活剂雷西莫特(R848)能够有效分离牛XY精子,为研究牛XY精子分离新技术提供参考。 展开更多

关键词 牛 性控精液 雷西莫特(R848) toll样受体 7/8(tlr7/8)

在线阅读 下载PDF 职称材料

TLR7基因rs3853839、rs179010多态性与EV71手足口病男性患儿易感性及病情严重程度相关 被引量：9

3

作者 李亚萍 翟嵩 +5 位作者 李梅 王媛 路彤 邓慧玲 张欣 党双锁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期953-958,共6页

目的探讨Toll样受体7/髓样分化因子88(TLR7/My D88)信号通路基因多态性与肠道病毒71型(EV71)手足口病(HFMD)易感性及重症化的关联性。方法收集在西安交通大学第二附属医院和西安市儿童医院感染科收治的EV71 HFMD标本180例和健康对照标本... 目的探讨Toll样受体7/髓样分化因子88(TLR7/My D88)信号通路基因多态性与肠道病毒71型(EV71)手足口病(HFMD)易感性及重症化的关联性。方法收集在西安交通大学第二附属医院和西安市儿童医院感染科收治的EV71 HFMD标本180例和健康对照标本201例。采用SNPscan多重SNP分型方法对381个样本的TLR7基因rs3853839、rs179010和My D88基因rs7744位点进行基因分型检测。结果男性患儿中TLR7基因rs3853839 C等位基因的易感性(OR=2.343,95%CI:1.516~3.621)与重症化(OR=1.939,95%CI:1.064~3.521)风险升高。男性患儿中TLR7rs179010 T等位基因的易感性(OR=1.701,95%CI:1.142~2.535)与重症化(OR=1.852,95%CI:1.038~3.305)风险升高。女性患儿中TLR7基因rs3853839、rs179010等位基因分布在病例组与对照组无明显差异。My D88基因rs7744多态性与EV71 HFMD易感性及病情轻重程度无明显关联性。结论 TLR7基因rs3853839、rs179010多态性与EV71 HFMD男性患儿易感性及病情严重程度相关。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 toll样受体7(tlr7) 基因多态性 重症化

在线阅读 下载PDF 职称材料

红嘴鸥TLR7基因克隆与生物信息学分析 被引量：4

4

作者 常华 段纲 +5 位作者 阮谦 罗倩敏 余琬玲 刘清琦 黄翠琴 项勋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第1期43-52,共10页

【目的】克隆野生鸟类红嘴鸥Toll样受体7(TLR7)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析,为后期TLR7蛋白的抗病毒活性研究做准备。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增红嘴鸥TLR7基因全序列,... 【目的】克隆野生鸟类红嘴鸥Toll样受体7(TLR7)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析,为后期TLR7蛋白的抗病毒活性研究做准备。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增红嘴鸥TLR7基因全序列,通过生物信息学软件分析TLR7基因序列、稀有密码子、相似性及其编码蛋白的理化性质、跨膜区域、信号肽、N-糖基化位点、磷酸化位点和亚细胞定位,分别利用SOPMA和SWISS-MODEL软件预测TLR7蛋白的二级结构和三级结构。【结果】试验成功克隆红嘴鸥TLR7基因(GenBank登录号:MZ668652),全长1720 bp,开放阅读框(ORF)大小为1182 bp,存在39个稀有密码子,其中含8个连续稀有密码子,编码393个氨基酸;红嘴鸥TLR7基因与GenBank中原鸡、红腹角雉、鹌鹑、绿头鸭、黑天鹅、山雀、白鹭、帝企鹅、红喉潜鸟和巴布亚企鹅的TLR7基因相似性分别为85.7%、84.9%、85.4%、87.0%、87.8%、86.8%、91.0%、93.1%、93.1%和93.1%。系统进化树结果显示,其与白鹭的亲缘关系最近。TLR7蛋白分子式为C_(2080)H_(3256)N_(556)O_(567)S_(19),分子质量约为63 ku,理论等电点为9.25;该蛋白不存在跨膜结构和信号肽,含有6个N-糖基化位点和33个磷酸化位点,是疏水性蛋白,主要存在于细胞质中;TLR7蛋白二级结构主要以α-螺旋为主,约占48.09%,其次为无规则卷曲(32.06%)、延伸链(13.23%)和β-转角(6.62%),TLR7蛋白的三级结构与二级结构一致,且与模型蛋白人TLR7蛋白相似性为68.78%。【结论】红嘴鸥TLR7基因与白鹭进化关系较近,含有8个连续稀有密码子,体外表达较难,研究为进一步探索红嘴鸥TLR7蛋白抗病毒免疫机制提供重要参考。 展开更多

关键词 红嘴鸥 toll样受体7(tlr7) 克隆 生物信息学分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

Toll样受体4和Toll样受体7在儿童原发性肾病综合征患儿肾组织中的表达及意义 被引量：21

5

作者 张芳敏 韩子明 赵德安 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期512-516,共5页

目的探讨Toll样受体(TLR)4、TLR7在儿童原发性肾病综合征(PNS)不同肾脏病理类型中的表达及临床意义。方法纳入110例确诊且经肾活检的PNS患儿,采用免疫组化方法检测肾组织中的TLR4、TLR7,以21例肾母细胞瘤患儿的正常肾组织为对照,分析比... 目的探讨Toll样受体(TLR)4、TLR7在儿童原发性肾病综合征(PNS)不同肾脏病理类型中的表达及临床意义。方法纳入110例确诊且经肾活检的PNS患儿,采用免疫组化方法检测肾组织中的TLR4、TLR7,以21例肾母细胞瘤患儿的正常肾组织为对照,分析比较PNS患儿与对照儿童间以及不同病理分型PNS患儿间,肾组织TLR4、TLR7表达的差异。结果不同病理类型PNS患儿和对照组之间肾小管中TLR4、TLR7表达的差异均有统计学意义(P<0.01),其中肾小管TLR4表达水平以MCD型最高,其次MN型、MsPGN型、FSGS型,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);而肾小管TLR7表达水平以MsPGN型最高,其次为MN型、MCD型、FSGS型,两两比较差异也均有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR4、TLR7在PNS患儿肾组织中表达增高,且其表达水平可能与病理类型相关。 展开更多

关键词 toll样受体4 toll样受体7 原发性肾病综合征 儿童

在线阅读 下载PDF 职称材料

Toll样受体7的研究进展 被引量：6

6

作者 王晓月 赵鹏翔 +1 位作者 Adzavon Yao Mawulikplimi 马雪梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1267-1271,共5页

Toll样受体7(TLR7)是一种广泛存在于机体免疫细胞内体膜上的模式识别受体。TLR7在识别结合病毒的单链RNA或人工合成的小分子嘌呤类化合物后,会招募特异接头蛋白,激活一系列信号级联反应,启动高水平的系统性适应性免疫应答,杀伤感染病毒... Toll样受体7(TLR7)是一种广泛存在于机体免疫细胞内体膜上的模式识别受体。TLR7在识别结合病毒的单链RNA或人工合成的小分子嘌呤类化合物后,会招募特异接头蛋白,激活一系列信号级联反应,启动高水平的系统性适应性免疫应答,杀伤感染病毒的细胞,从而彻底清除病毒。临床上已经开始利用TLR7激动剂治疗慢性病毒性感染疾病,TLR7激动剂作为免疫佐剂在机体识别和杀伤肿瘤过程中的作用也在逐渐得到重视。 展开更多

关键词 toll样受体7(tlr7) 免疫系统 抗病毒 抗肿瘤 综述

在线阅读 下载PDF 职称材料

Toll样受体7在人胃癌细胞株中的表达及其激动剂诱导SGC-7901细胞发生凋亡的实验研究 被引量：4

7

作者 姜炅 董蕾 +4 位作者 秦斌 郭晓燕 李红 史海涛 刘亚萍 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1606-1610,共5页

目的探讨Toll样受体7（TLR7）在不同人胃癌细胞株中的表达及其激动剂咪喹莫特对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法 Western blot法检测3种胃癌细胞株（SGC-7901、HGC-27和MKN-28）中TLR7蛋白表达差异,选取高表达TLR7的胃癌细胞作为主... 目的探讨Toll样受体7（TLR7）在不同人胃癌细胞株中的表达及其激动剂咪喹莫特对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法 Western blot法检测3种胃癌细胞株（SGC-7901、HGC-27和MKN-28）中TLR7蛋白表达差异,选取高表达TLR7的胃癌细胞作为主要研究对象;MTT法考察不同浓度咪喹莫特处理TLR7高表达胃癌细胞12～72 h后细胞增殖活性的改变;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法观察100μg/ml咪喹莫特干预12及24 h后细胞早期凋亡比率的改变;透射电镜下观察细胞凋亡形态学改变;实时定量PCR法分析Bcl-2及Bax mRNA在咪喹莫特作用前后表达差异。结果 TLR7蛋白在SGC-7901中表达水平高于其他两种胃癌细胞,其激动剂咪喹莫特能够明显抑制SGC-7901细胞增殖并且呈现出浓度及时间依赖性;100μg/ml咪喹莫特干预24 h后SGC-7901细胞早期凋亡比率明显上升,透射电镜下可观察到典型的凋亡形态学改变;咪喹莫特处理后SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA表达呈浓度依赖性下降,Bax mRNA呈浓度依赖性上升。结论 TLR7在3种不同分化程度的胃癌细胞中均有表达,其激动剂咪喹莫特能够明显抑制SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 胃癌 toll样受体7 咪喹莫特 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞诱导氧化应激对TLR7基因及其下游因子表达的影响 被引量：5

8

作者 朱童娜 吴璇 +2 位作者 邱欢 于莉 黄升海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第11期1539-1543,共5页

目的观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染人肺上皮细胞(A549细胞)引起的氧化应激对Toll样受体7(TLR7)活化及其主要信号分子的作用,探讨其所介导的抗炎作用和可能的调控机制,为临床治疗和预防RSV感染提供新的思路。方法 RSV体外感染A549细胞为... 目的观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染人肺上皮细胞(A549细胞)引起的氧化应激对Toll样受体7(TLR7)活化及其主要信号分子的作用,探讨其所介导的抗炎作用和可能的调控机制,为临床治疗和预防RSV感染提供新的思路。方法 RSV体外感染A549细胞为感染组,以抗氧化剂BHA进行预处理作为抗氧化剂组,于感染后的4、8、12、24 h收集细胞,以未感染细胞作为正常组。1化学法检测活性氧指标·OH含量的变化;2硝酸还原酶法检测NO含量的变化;3用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR7、白介素(IL-6)的mRNA转录水平的变化;4 ELISA法检测细胞上清液中IL-6的表达变化;5 MTT法检测各组细胞增殖情况。结果 1感染组里·OH的含量升高并呈时间依赖性,在抗氧化剂组,·OH的含量与感染组相比是降低的;2感染组各时间段NO含量升高并呈时间依赖性,抗氧化剂组的NO含量与感染组同一时间点相比降低;3感染组中不同时间点的TLR7基因转录水平表达上调,抗氧化剂组TLR7的表达虽有上调,表达量都比感染组同时间点下降;4感染组里IL-6的表达量与感染之间有时间依赖性关系,抗氧化剂组IL-6的表达虽有上调,但比感染组同时间点下降;5感染组随时间点的延长,细胞抑制率增加,抗氧化剂组的细胞抑制率与感染组相比下调明显。结论 RSV感染可诱导氧化应激的产生,在加入抗氧化剂BHA预处理后,可明显减轻TLR7及其下游主要信号分子的表达变化和细胞抑制率,表明RSV感染活化TLR7及引起细胞损伤可能是通过氧化应激途径来调节的。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 toll样受体7 氧化应激 A549细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠TLR7 mRNA和蛋白表达的影响 被引量：2

9

作者 戴启刚 汪受传 +4 位作者 徐建亚 李佳曦 梁晓鑫 李涛 孙寒丹 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1304-1307,共4页

目的研究金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠肺组织中Toll样受体7(TLR7)mRNA、蛋白表达的影响。方法将BALB/c小鼠分为RSV感染后72 h组和144 h组两大实验组,每大组分为正常组、RSV感染模型组、利巴韦林组、金欣高剂量组、金欣等效剂量组,每... 目的研究金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠肺组织中Toll样受体7(TLR7)mRNA、蛋白表达的影响。方法将BALB/c小鼠分为RSV感染后72 h组和144 h组两大实验组,每大组分为正常组、RSV感染模型组、利巴韦林组、金欣高剂量组、金欣等效剂量组,每组15只小鼠。72 h组RSV滴鼻3 d、灌胃3 d,144 h组RSV滴鼻3 d、灌胃5 d,末次灌胃24 h后采集肺组织,Realtime PCR检测肺组织中TLR7 mRNA表达水平,Western Blot法检测肺组织TLR7蛋白表达水平。结果 RSV感染后72 h组内,与RSV模型组相比,金欣高剂量组、等效剂量组能下调肺组织TLR7 mRNA的表达及蛋白表达(P<0.01、P<0.05);RSV感染后144 h组,TLR7 mRNA及蛋白的表达均较72 h同法处理组下降,但各组间TLR7 mRNA及蛋白的表达无差异。结论 RSV感染BALB/c小鼠72 h后,金欣口服液能下调肺组织中TLR7 mRNA及TLR7蛋白的表达;感染晚期(144 h后),金欣口服液下调TLR7表达,使之趋向正常。 展开更多

关键词 金欣口服液 呼吸道合胞病毒 BALB C小鼠 toll样受体7(tlr7)

在线阅读 下载PDF 职称材料

1,25-二羟维生素D_3下调Toll样受体7在树突状细胞中的表达 被引量：3

10

作者 刘飞 杨明珍 +2 位作者 李庆生 宋玲 夏雷鸣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第8期924-927,共4页

目的观察1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(DC)的表型、功能以及对其Toll样受体7(TLR7)表达的影响,探讨TLR7在1,25-二羟维生素D3诱导耐受性DC可能的机制。方法体外扩增小鼠骨髓来源的DC,采用流式细胞术和混合淋巴细胞反应检测1,25-二羟维... 目的观察1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(DC)的表型、功能以及对其Toll样受体7(TLR7)表达的影响,探讨TLR7在1,25-二羟维生素D3诱导耐受性DC可能的机制。方法体外扩增小鼠骨髓来源的DC,采用流式细胞术和混合淋巴细胞反应检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和功能的影响;利用RT-PCR半定量方法测定1,25-二羟维生素D3对DC的TLR7表达的影响。结果 1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD86和MHC II的荧光强度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);对T细胞的刺激能力较对照组明显减弱(P<0.05);与对照组比较,1,25-二羟维生素D3可以明显下调TLR7的表达(P<0.01)。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过下调TLR7的表达抑制DC细胞的成熟,从而使得DC具有耐受性特征。 展开更多

关键词 树突状细胞 1 25-二羟维生素D3 toll样受体7

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪Toll样受体7基因人工miRNA表达质粒的构建与筛选 被引量：3

11

作者 宋红芹 姜翠翠 孙怀昌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期18-21,26,共5页

目的构建猪Toll样受体7(TLR7)基因的人工miRNA(amiRNA)特异性表达载体,筛选有效amiRNA。方法 RT-PCR扩增猪TLR7基因的1984～2648 bp序列,构建融合表达载体pTLR7-EGFP。设计针对猪TLR7的5对amiRNA,构建重组干扰质粒pcDNA5-miRTLR7。将pcD... 目的构建猪Toll样受体7(TLR7)基因的人工miRNA(amiRNA)特异性表达载体,筛选有效amiRNA。方法 RT-PCR扩增猪TLR7基因的1984～2648 bp序列,构建融合表达载体pTLR7-EGFP。设计针对猪TLR7的5对amiRNA,构建重组干扰质粒pcDNA5-miRTLR7。将pcDNA5-miRTLR7和pTLR7-EGFP共转染NIH-3T3细胞,通过RT-PCR检测amiTLR7的表达,以荧光显微镜观察和流式细胞术分析干扰效率。结果 5个amiTLR7都成功表达,且均能沉默NIH-3T3细胞中TLR7基因的表达,抑制效率为36.99%到97.28%,其中amiTLR7-3效果最佳。结论成功构建了针对猪TLR7基因的amiRNA表达质粒,筛选出了沉默猪TLR7基因的最佳干扰序列。 展开更多

关键词 toll样受体7基因 人工miRNA RNA干扰 筛选

在线阅读 下载PDF 职称材料

HBV对健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞Toll样受体9、干扰素调节因子7、干扰素α表达的影响 被引量：3

12

作者 彭建平 孙克伟 +1 位作者 银思涵 伍玉南 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第5期894-898,共5页

目的观察HBV对体外培养的健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9、干扰素调节因子(IRF)7、干扰素(IFN)α表达的影响。方法体外培养Hep G 2.2.15细胞,收集各孔Hep G 2.2.15培养上清,超离心HBV病毒颗粒,PCR荧光探针法检... 目的观察HBV对体外培养的健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9、干扰素调节因子(IRF)7、干扰素(IFN)α表达的影响。方法体外培养Hep G 2.2.15细胞,收集各孔Hep G 2.2.15培养上清,超离心HBV病毒颗粒,PCR荧光探针法检测HBV DNA浓度。将培养第7天的pDC与不同载量的HBV(1×105拷贝/ml、1×106拷贝/ml、1×107拷贝/ml和空白对照)共培养24 h。随后每组均加入终浓度为2μg/ml的Cp G ODN 2216继续培养24 h。Real Time-PCR检测pDC中TLR9、IRF7mRNA的表达,Western Blot检测TLR9、IRF7蛋白表达,ELISA法测IFNα水平。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验;对HBV DNA拷贝数取常用对数,相关指标与HBV DNA的常用对数值用Pearson直线相关分析法。结果HBV 1×106拷贝/ml组和1×107拷贝/ml组TLR9 mRNA、IRF7 mRNA、pDC TLR9和IRF7蛋白、IFNα的表达水平明显低于空白对照组及HBV 1×105拷贝/ml组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。HBV对pDC TLR9 mRNA、IRF7 mRNA的表达和对pDC TLR9、IRF7蛋白的表达以及对pDC培养上清液IFNα的表达均呈浓度依赖性,HBV DNA载量越高,对TLR9 mRNA、IRF7 mRNA、TLR9和IRF7蛋白、IFNα表达的抑制效果越强(r值分别为-0.729、-0.761、-0.657、-0.703、-0.803,P值均<0.05)。结论 HBV体外干预后,正常pDC TLR9、IRF7 mRNA及蛋白表达下降,从而导致其下游IFNα的分泌减少。HBV能抑制正常pDC功能,导致HBV持续感染。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 树突细胞 toll样受体9 干扰素调节因子7 干扰素Α

在线阅读 下载PDF 职称材料

Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物联合ROR1具有更强的抗乳腺癌作用 被引量：2

13

作者 张娜 靳广毅 +5 位作者 晋贞超 刘兵 彭博雅 高宁宁 胡云龙 唐俐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期876-880,885,共6页

目的探讨Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物(T7-EA)联合受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)抗乳腺癌的作用。方法采用Syfpeithi表位预测软件预测ROR1的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;ELISA检测4μmol/L T7-EA、4μmol/L ROR1和4μmol/L T7-E... 目的探讨Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物(T7-EA)联合受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)抗乳腺癌的作用。方法采用Syfpeithi表位预测软件预测ROR1的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;ELISA检测4μmol/L T7-EA、4μmol/L ROR1和4μmol/L T7-EA联合4μmol/L ROR1诱导小鼠脾淋巴细胞产生的γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)和骨髓来源的树突状细胞(DC)产生的肿瘤坏死因子α(TNF-α);BALB/c小鼠皮下接种乳腺癌4T1细胞建立移植瘤模型,腹腔分别注射3 mg/kg T7-EA、15 mg/kg ROR1、3 mg/kg T7-EA联合15 mg/kg ROR1,每周1次,免疫治疗4次后处死小鼠检测肿瘤质量;ELISA检测血清中针对4T1细胞肿瘤蛋白的Ig G水平;乳酸脱氢酶(LDH)法测定特异性CTL活性。结果在预测的多条ROR1 CTL表位肽中选取序列PYCDETSSV作为疫苗多肽;体外实验显示T7-EA活化淋巴细胞呈现剂量依赖性,与ROR1相关多肽混合后不改变其活性;T7-EA与ROR1合用诱导小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ和IL-12,刺激DC产生TNF-α;体内实验显示T7-EA联合ROR1抑制肿瘤生长效果显著强于单用T7-EA组和ROR1组,T7-EA联合ROR1诱导的针对4T1细胞肿瘤蛋白的血清Ig G水平显著高于T7-EA和ROR1单独给药组,T7-EA联合ROR1诱发的T细胞杀伤作用显著强于T7-EA和ROR1单独处理组。结论 T7-EA和ROR1联合应用具有更强的抗乳腺癌效果。 展开更多

关键词 乳腺癌 toll样受体7 T7-利尿酸偶合物(T7-EA) 受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1) 肿瘤免疫治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

Toll样受体7及9在慢性粒细胞白血病患者浆细胞样树突状细胞内的表达 被引量：1

14

作者 段丽芳 张连生 +4 位作者 岳玲玲 柴晔 曾鹏云 吴重阳 李莉娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期257-260,共4页

目的:研究Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)mRNA及TLR9 mRNA在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者外周血浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)内的表达及pDC分泌干扰素-α(interferon-α,IFN-... 目的:研究Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)mRNA及TLR9 mRNA在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者外周血浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)内的表达及pDC分泌干扰素-α(interferon-α,IFN-α)的能力。方法:收集兰州大学第二医院血液科2010年11月至2011年7月间收治的30例CML患者(初诊未治组15例,缓解组15例)和体检中心的15例健康对照者,运用免疫磁珠法分选外周血pDC,利用real time-PCR检测pDC内TLR7及TLR9 mRNA表达水平。CpG ODN 2216刺激pDC 24 h后,ELISA检测上清液中IFN-α水平。结果:初诊组CML患者外周血pDC内TLR7 mRNA表达水平显著低于缓解组[(0.34±0.11)vs(0.93±0.21),P<0.05],初诊CML患者TLR9 mRNA表达水平显著低于缓解组[(0.44±0.15)vs(0.94±0.18),P<0.05]。CpG ODN 2216刺激后,初诊组pDC产生的IFN-α明显低于缓解组及健康对照组[(408.61±77.11)vs(611.39±84.86)、(651.67±93.39)ng/L,P<0.05]。结论:CML患者pDC内TLR7和TLR9 mRNA明显降低可能是pDC功能缺陷的主要原因,提示TLR7和TLR9可能参与CML的发病。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病 浆细胞样树突状细胞 toll样受体7 toll样受体9

在线阅读 下载PDF 职称材料

RSV感染小胶质细胞活化Toll样受体3、7介导炎性反应的初步研究 被引量：1

15

作者 李振兴 云云 +3 位作者 邱欢 朱童娜 吴璇 黄升海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第8期858-863,共6页

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16... 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16、24和36 h收集细胞,以未感染细胞作为正常组。用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR3、TLR7的mRNA转录水平的变化。③Western blot法分别检测感染4、8、12、16、24和36 h后的细胞内核转录因子(NF-κB)蛋白水平的变化。④ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化。结果①荧光显微镜下可以见到FITC标记RSV-F蛋白的绿色荧光随感染时间的延长而增强。②TLR3、TLR7在感染RSV后mRNA水平在观察的时间内表达均升高并呈时间依赖性关系。③各感染时间点NF-κB蛋白水平表达均升高并呈时间依赖性关系。④感染RSV后,细胞上清液中TNF-α含量均升高并呈时间依赖性关系。结论 RSV感染BV2后可以上调TLR3、TLR7,从而使下游细胞炎性因子TNF-α分泌升高,过度的炎性作用可能与神经系统症状的发生相关。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 toll样受体3 toll样受体7 核转 录因子 小鼠小胶质细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

TLR7激活对HepG2.2.15细胞株炎症因子TNF-α和IL-6表达的上调作用 被引量：1

16

作者 张胜权 胡道军 +4 位作者 朱娟娟 罗欣 黄海量 柴瑜 陶千山 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期934-937,共4页

目的比较乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组稳定转染细胞株HepG2.2.15和肝癌细胞株HepG2中TLR7表达,分析HepG2.2.15细胞中TLR7激活后诱导炎症因子表达。方法通过实时荧光定量(Real-time)PCR分析HepG2和HepG2.2.15中TLR7受体、I... 目的比较乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组稳定转染细胞株HepG2.2.15和肝癌细胞株HepG2中TLR7表达,分析HepG2.2.15细胞中TLR7激活后诱导炎症因子表达。方法通过实时荧光定量(Real-time)PCR分析HepG2和HepG2.2.15中TLR7受体、IL-6和TNF-αmRNA水平表达。TLR7配体Gardiquimod刺激20min后,Western blot分析激活的信号通路;刺激6h,Real-timePCR分析TLR7激活后IL-6和TNF-αmRNA水平表达变化;刺激48h,ELISA法分析IL-6和TNF-α蛋白质水平表达变化。结果HepG2.2.15细胞株中TLR7mRNA水平表达比HepG2中的表达高约30倍(P<0.01)。在没有任何刺激的条件下,HepG2.2.15细胞株中IL-6和TNF-αmRNA水平表达比HepG2中的表达分别高约7.5和9.3倍;Gardiquimod刺激6h后,HepG2.2.15细胞株中IL-6和TNF-αmRNA表达水平明显升高,并具有剂量依赖关系(P<0.01),而HepG2细胞在相同的刺激下IL-6和TNF-αmRNA表达水平升高并不明显(P<0.05);刺激48h后,IL-6和TNF-α蛋白质表达水平变化与其mRNA水平变化一致(P<0.01)。HepG2.2.15细胞株经Gardiquimod刺激后NF-κBp65亚单位进入细胞核中量显著增加。结论TLR7激活后能够上调HepG2.2.15细胞中IL-6和TNF-α的表达,提示TLR7可能在乙型病毒性肝炎的病理生理过程中发挥作用。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 tlr7 Gardiquimod HEPG2.2.15细胞株 促炎症因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

JMJD3参与IFN-α和TLR7诱导的B细胞活化及凋亡 被引量：1

17

作者 樊竑冶 李宝辉 +3 位作者 刘飞 任德善 侯亚义 周长林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期890-894,共5页

目的:探索组蛋白去甲基化酶JMJD3对B细胞活化和凋亡的影响。方法:磁珠分选纯化正常人及SLE患者外周血B细胞,用IFN-α、R848或IFN-α+R848处理纯化的B细胞,流式细胞仪检测CD86+或CD69+的细胞百分率以及CD86+Annexin V+或CD69+Annexin V+... 目的:探索组蛋白去甲基化酶JMJD3对B细胞活化和凋亡的影响。方法:磁珠分选纯化正常人及SLE患者外周血B细胞,用IFN-α、R848或IFN-α+R848处理纯化的B细胞,流式细胞仪检测CD86+或CD69+的细胞百分率以及CD86+Annexin V+或CD69+Annexin V+的细胞百分率;实时定量PCR和Western blot方法检测JMJD3的表达。结果:获得的B细胞纯度高达95%;IFN-α能够增强TLR7对B细胞的活化和凋亡;IFN-α也增加TLR7信号诱导的B细胞表达JMJD3,且JMJD3高表达依赖于MAPK通路,而不是NF-κB信号通路;SLE患者外周血B细胞高表达JMJD3,且JMJD3抑制剂能够抑制IFN-α+R848诱导的CD19+B细胞活化及凋亡。结论:JMJD3参与IFN-α和TLR7诱导的B细胞活化及凋亡,提示JMJD3抑制剂可能具有缓解SLE症状的作用。 展开更多

关键词 B细胞 干扰素-Α toll样受体7 组蛋白去甲基化酶JMJD3

在线阅读 下载PDF 职称材料

TLR7激动剂对P.y 17XNL感染BALB/c小鼠免疫调节效应的影响 被引量：2

18

作者 邱悦 赵永红 曹雅明 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期71-75,共5页

宿主抗疟保护性免疫应答的水平和强度与疟疾预后关系密切,当疟原虫侵袭宿主时,TLRs向机体传达病原体入侵信息,激活免疫系统。采用TLR7激动剂处理P.y 17XNL感染的BALB/c小鼠,通过FACS和ELISA检测DC亚群(mDC和pDC)、CD4^+ T细胞亚群(Th1、... 宿主抗疟保护性免疫应答的水平和强度与疟疾预后关系密切,当疟原虫侵袭宿主时,TLRs向机体传达病原体入侵信息,激活免疫系统。采用TLR7激动剂处理P.y 17XNL感染的BALB/c小鼠,通过FACS和ELISA检测DC亚群(mDC和pDC)、CD4^+ T细胞亚群(Th1、Th2、Tfh和Treg)和细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-21和IL-10)的水平,明确TLR7通过DC调控宿主应答的免疫机制。结果显示,TLR7激动剂能够促进DC亚群数量的增加,同时也提高Th1和Tfh细胞分化,并显著增加IFN-γ分泌水平。因此,TLR7激动剂通过诱导DC活化,促进Th1型免疫应答降低原虫血症水平,在疟疾感染过程中发挥保护性免疫作用。 展开更多

关键词 疟疾 toll样受体7 T细胞亚群 树突状细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

氧化苦参碱下调免疫细胞TLR7 mRNA的表达 被引量：6

19

作者 高小琪 彭丽娜 +7 位作者 李力 邱亚峰 繆剑华 徐永莉 史子学 邵东华 魏建超 马志永 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期150-153,159,共5页

为了探讨氧化苦参碱对免疫细胞Toll-like receptor 7(TLR7)mRNA表达的影响,使用CCK-8试剂盒检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞的生长抑制作用。应用荧光定量PCR方法检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞TLR7 mRNA及其下游因子TNF-αmRNA表达的影响... 为了探讨氧化苦参碱对免疫细胞Toll-like receptor 7(TLR7)mRNA表达的影响,使用CCK-8试剂盒检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞的生长抑制作用。应用荧光定量PCR方法检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞TLR7 mRNA及其下游因子TNF-αmRNA表达的影响;检测氧化苦参碱对小鼠脾脏淋巴细胞TLR7 mRNA及其下游因子MyD88、TRAF-6 mRNA表达的影响。结果显示,氧化苦参碱对RAW264.7细胞的半数抑制率为5.9 mg/mL。氧化苦参碱下调RAW264.7细胞TLR7、TNF-αmRNA表达;下调小鼠脾脏淋巴细胞TLR7、MyD88、TRAF-6 mRNA表达。由此得出,氧化苦参碱可下调免疫细胞TLR7mRNA的表达。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 tlr7免疫细胞 荧光定量PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

TLR7、TLR8在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量：4

20

作者 马海丽 刘建 逯清丽 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期286-289,共4页

目的探讨Toll样受体7,8(Toll like receptor 7,8,TLR7,8)在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,为进一步研究TLR在肺癌治疗中的应用提供理论依据。方法采用免疫组化SP法检测43例非小细胞肺癌组织和20例癌旁... 目的探讨Toll样受体7,8(Toll like receptor 7,8,TLR7,8)在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,为进一步研究TLR在肺癌治疗中的应用提供理论依据。方法采用免疫组化SP法检测43例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中TLR7、TLR8蛋白的表达水平,分析TLR7、TLR8的表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系。结果①TLR7主要在核周表达,TLR8在细胞质中表达,呈弥散表达。②TLR7在43例非小细胞肺癌阳性表达率为48.8%,高于癌旁正常肺组织的15.0%(P<0.05);TLR8在43例非小细胞肺癌组织阳性表达率为69.8%,高于癌旁正常肺组织的20.0%(P<0.05)。③TLR7表达与年龄、吸烟、肺癌淋巴结转移、TNM分期、分化程度无相关性,与性别、病理类型有关。TLR8表达与吸烟有关。TLR7表达和TLR8表达无相关性。结论 TLR7、TLR8在非小细胞肺癌组织中的表达均高于正常肺组织。TLR7、TLR 8可能参与了肺癌的发病机制, 展开更多

关键词 toll样受体7 toll样受体8 非小细胞肺癌

在线阅读 下载PDF 职称材料