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题名蛇毒类凝血酶基因在大肠埃希菌中诱导表达及影响因素
被引量：1
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作者
闫强
何桂梅
陆一鸣
陈明勇
孙树汉
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机构
中国农业大学动物医学院
第二军医大学遗传学教研室
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出处
《动物医学进展》
CSCD
2006年第8期77-79,共3页
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基金
国家自然科学基金(30400272)
上海市科委基础研究重点项目(04JC14002)资助
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文摘
将蛇毒类凝血酶基因(TLE)亚克隆到原核表达载体pMAL-p2X上,对重组表达质粒鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21进行诱导表达;同时采用不同的OD值、诱导时间I、PTG浓度和诱导温度对尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶基因重组表达质粒pMAL-p2X进行了条件优化。研究发现,不同的诱导时间、IPTG诱导浓度和诱导温度与融合蛋白表达量有很大关系。SDS-PAGE结果显示,当OD值为0.5,IPTG终浓度为0.3 mmol/L,诱导温度为37℃时,诱导3 h后蛋白表达量最高,超出此范围可使表达量显著减少。在优化诱导条件后,融合蛋白的表达量可达全菌总蛋白量的66%。
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关键词
蛇毒类凝血酶基因
原核表达
影响因素
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Keywords
thrombin-like enzyme gene prokaryotic expression influence factor
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分类号
S856.9
[农业科学—临床兽医学]
S852.612
[农业科学—基础兽医学]
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