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SIRT1对H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的影响
被引量:
8
1
作者
和斌
李祺越
+3 位作者
洪岭
伍园园
滕晓明
唐传玲
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期1591-1597,共7页
目的·探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤中的作用及可能机制。方法·分别用0、100、250、500、1000μmol/L H2O2处理人卵巢颗粒细胞SVOG 4、8、12、24 h,CC...
目的·探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤中的作用及可能机制。方法·分别用0、100、250、500、1000μmol/L H2O2处理人卵巢颗粒细胞SVOG 4、8、12、24 h,CCK-8法检测细胞活力,选择合适的H2O2浓度和处理时间用于建立颗粒细胞体外氧化应激损伤模型。荧光显微镜观察H2O2处理后细胞核形态变化,试剂盒检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;实时定量PCR、Western blotting分析分别检测SIRT1、衔接蛋白P66SHC(the 66 kDa Src homology 2 domain containing isoform)及B淋巴细胞瘤-2因子(B-cell lymphoma-2,BCL-2)mRNA和蛋白的表达水平;脂质体转染SIRT1过表达质粒后,SVOG细胞再经H2O2处理,同样观察上述指标的变化。结果·250μmol/L H2O2处理SVOG细胞12 h,可诱发细胞活力明显下降(P=0.017),细胞核固缩,MDA含量增加(P=0.001),SOD活性下降(P=0.006);伴随SIRT1、BCL-2 mRNA和蛋白表达降低,P66SHC表达升高。SIRT1过表达后再经H2O2处理,与H2O2处理组相比,SVOG细胞核恢复正常形态,MDA含量下调(P=0.038),SOD活性回升(P=0.021),P66SHC表达降低(P=0.002),BCL-2表达升高(P=0.013)。结论·SIRT1可能通过下调P66SHC和上调BCL-2的表达发挥对抗人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的作用。
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关键词
卵巢颗粒细胞
沉默信息调节因子1
氧化应激损伤
衔接蛋白
p66shc
B淋巴细胞瘤-
2
因子
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职称材料
题名
SIRT1对H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的影响
被引量:
8
1
作者
和斌
李祺越
洪岭
伍园园
滕晓明
唐传玲
机构
同济大学附属第一妇婴保健院辅助生殖医学科
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期1591-1597,共7页
基金
国家自然科学基金(81971383)
上海市自然科学基金(17ZR1422000)
上海市市级医疗卫生学科建设项目(2017ZZ02015)。
文摘
目的·探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤中的作用及可能机制。方法·分别用0、100、250、500、1000μmol/L H2O2处理人卵巢颗粒细胞SVOG 4、8、12、24 h,CCK-8法检测细胞活力,选择合适的H2O2浓度和处理时间用于建立颗粒细胞体外氧化应激损伤模型。荧光显微镜观察H2O2处理后细胞核形态变化,试剂盒检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;实时定量PCR、Western blotting分析分别检测SIRT1、衔接蛋白P66SHC(the 66 kDa Src homology 2 domain containing isoform)及B淋巴细胞瘤-2因子(B-cell lymphoma-2,BCL-2)mRNA和蛋白的表达水平;脂质体转染SIRT1过表达质粒后,SVOG细胞再经H2O2处理,同样观察上述指标的变化。结果·250μmol/L H2O2处理SVOG细胞12 h,可诱发细胞活力明显下降(P=0.017),细胞核固缩,MDA含量增加(P=0.001),SOD活性下降(P=0.006);伴随SIRT1、BCL-2 mRNA和蛋白表达降低,P66SHC表达升高。SIRT1过表达后再经H2O2处理,与H2O2处理组相比,SVOG细胞核恢复正常形态,MDA含量下调(P=0.038),SOD活性回升(P=0.021),P66SHC表达降低(P=0.002),BCL-2表达升高(P=0.013)。结论·SIRT1可能通过下调P66SHC和上调BCL-2的表达发挥对抗人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的作用。
关键词
卵巢颗粒细胞
沉默信息调节因子1
氧化应激损伤
衔接蛋白
p66shc
B淋巴细胞瘤-
2
因子
Keywords
ovarian granulosa cell
silent information regulator 1(SIRT1)
oxidative damage
the
66
kda
src
homology
2
domain
containing
isoform
(
p66shc
)
B-cell lymphoma-
2
(BCL-
2
)
分类号
R711.6 [医药卫生—妇产科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
SIRT1对H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的影响
和斌
李祺越
洪岭
伍园园
滕晓明
唐传玲
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
8
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