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大刺鳅syce3基因表达特征及其对温度胁迫的响应
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作者 翁曼欣 薛凌展 +4 位作者 陈度煌 曾高雄 胡振禧 高宇 张伟妮 《南方农业学报》 北大核心 2025年第6期1902-1912,共11页
【目的】研究大刺鳅联会复合体中心元件蛋白3基因(syce3)结构,分析其在不同性别、不同组织、不同胚胎发育阶段的表达特征和细胞定位,以及其对温度胁迫的响应,为大刺鳅性别控制育种提供理论依据。【方法】克隆大刺鳅syce3基因,利用生物... 【目的】研究大刺鳅联会复合体中心元件蛋白3基因(syce3)结构,分析其在不同性别、不同组织、不同胚胎发育阶段的表达特征和细胞定位,以及其对温度胁迫的响应,为大刺鳅性别控制育种提供理论依据。【方法】克隆大刺鳅syce3基因,利用生物信息学对其进行理化性质分析、结构及功能位点预测和系统进化分析等;采用实时荧光定量PCR方法检测syce3基因在11个组织中的表达情况,通过荧光原位杂交方法检测其在性腺中的表达情况;分析不同温度对胚胎发育及syce3基因表达的影响。【结果】获得大刺鳅syce3基因序列,长度为303 bp,共编码87个氨基酸残基;syce3蛋白分子量为10.03334 kD,理论等电点(pI)为4.85,平均亲水性指数为-0.609,预测为亲水性蛋白;syce3蛋白二级结构中,α-螺旋占63.22%,无规则卷曲占29.88%,延伸链占6.90%。同源性对比发现,大刺鳅syce3蛋白氨基酸序列与其他物种的同源性较低;系统发育树分析显示,大刺鳅syce3基因核苷酸序列与其他物种亲缘关系较远。实时荧光定量PCR检测结果显示,syce3基因在11个组织中均有表达,且在性腺中相对表达量最高,并在精巢中特异性高表达;荧光原位杂交试验验证,大刺鳅syce3基因在精巢的精原细胞、精母细胞、精子细胞和精子中,以及卵巢的皮层滤泡期表达。通过温度孵化试验,发现syce3基因在26℃卵裂期的相对表达量显著高于其他胚胎发育期(P<0.05),且26℃的syce3基因相对表达量高于32℃。【结论】成功克隆并鉴定了大刺鳅syce3基因,发现该基因在精子细胞、精原细胞、精母细胞及精子中均有表达,表明syce3基因参与大刺鳅早期胚胎发育及性腺分化调控过程。 展开更多
关键词 大刺鳅 联会复合体中心元件蛋白3基因(syce3) 性别分化 温度胁迫
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