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SOCE调控亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的研究
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作者 李思瑶 季子崴 +6 位作者 李蕾 张靖淇 岳柏晨 尹玉凤 徐闯 杨威 张冰冰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3907-3917,共11页
[目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细... [目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细胞。取亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞分为3组,分别为Hyp、毒胡萝卜素(thapsigarsin,TG)处理组(Hyp+TG)和2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-aminoethyl diphenylborinate,2-APB)处理组(Hyp+2-APB组)。通过流式细胞术检测细胞内Ca^(2+)水平,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测SOCE相关因子mRNA和蛋白表达量;通过激光共聚焦和免疫荧光检测单核巨噬细胞吞噬和黏附情况,并检测单核巨噬细胞吞噬和黏附因子的表达。[结果]流式细胞术检测结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平极显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中钙离子释放激活的钙通道蛋白1 (calcium release activated calcium modulator 1,ORAI1)、基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)、STIM2、选择素L(selectin L,SELL)、ORA I2、ORAI3以及吞噬因子髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。Western blotting结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中ORAI2、ORAI3、STIM2、ORAI1和STIM1蛋白表达量极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。同时,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞吞噬和黏附能力显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。TG处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),ORAI1、ORAI3、STIM1、STIM2和ORAI2蛋白表达水平显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力均显著或极显著增强(P<0.05;P<0.01)。2-APB处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),ORAI2、STIM2、ORAI1、ORAI3和STIM1蛋白表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力极显著或显著减弱(P<0.01;P<0.05)。[结论]TG激活SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平升高,细胞吞噬和黏附能力增强;2-APB抑制SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平降低,细胞的吞噬和黏附功能减弱,表明SOCE参与调控单核巨噬细胞的吞噬和黏附作用。 展开更多
关键词 钙池操控的钙内流(soce) 单核巨噬细胞 吞噬 黏附
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TGF-β参与细胞内钙池操纵性Ca^(2+)内流调节FGF23的释放
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作者 张冰冰 杨威 +4 位作者 徐闯 夏成 张洪友 王春仁 余丽芸 《黑龙江八一农垦大学学报》 2017年第5期66-68,73,共4页
为了研究TGF-β是否通过细胞内钙池操纵性Ca^(2+)内流来调节FGF23的释放,通过TGF-β处理大鼠骨肉瘤细胞利用荧光定量PCR技术检测细胞内FGF23和Orai1基因的表达。结果表明,与正常对照组细胞比较,TGF-β处理组FGF23与Orai1的基因表达水平... 为了研究TGF-β是否通过细胞内钙池操纵性Ca^(2+)内流来调节FGF23的释放,通过TGF-β处理大鼠骨肉瘤细胞利用荧光定量PCR技术检测细胞内FGF23和Orai1基因的表达。结果表明,与正常对照组细胞比较,TGF-β处理组FGF23与Orai1的基因表达水平显著升高,并且Orai1和NF-κB的抑制剂能够拮抗TGF-β的作用。表明TGF-β通过NF-κB/Orai1调节FGF23的释放,为进一步治疗慢性肾病等疾病提供依据。 展开更多
关键词 TGF-Β 成纤维生长因子23 细胞内钙池操纵性Ca^2+内流
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高糖对H9C2心肌细胞系和乳大鼠心室肌细胞钙库操纵性钙内流及相关蛋白的影响 被引量:2
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作者 沙勒塔娜提·塔拉别克 孙志朋 +2 位作者 王璐琪 油红捷 罗大力 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第3期411-420,共10页
目的探究高糖环境对大鼠胚胎心肌细胞系(H9C2)和乳大鼠心室肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)钙库操纵性钙内流(store operated calcium entry,SOCE)功能的影响,对基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STI... 目的探究高糖环境对大鼠胚胎心肌细胞系(H9C2)和乳大鼠心室肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)钙库操纵性钙内流(store operated calcium entry,SOCE)功能的影响,对基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)蛋白表达及其激活结构的作用,完善SOCE在糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)中的潜在致病机制。方法将H9C2和NRVMs细胞分为2组,对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)和高糖组(25 mmol/L葡萄糖),分别培养48 h后用激光共聚焦显微镜实时观察各组心肌细胞在毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)刺激后Ca2+荧光强度值的变化;采用Western blotting技术检测各组细胞STIM1和钙释放激活钙通道调节分子1(calcium release-activated calcium channel modulator 1,Orai1)蛋白表达的变化;借助化学交联技术和免疫荧光法检测NRVMs的STIM1蛋白的聚集变化;免疫共沉淀技术观察NRVMs心肌细胞内源性STIM1和Orai1蛋白的直接相互作用。结果与对照组相比,高糖组H9C2和NRVMs心肌细胞钙内流(Ca2+ influx)显著增加(P<0.05);高糖组H9C2和NRVMs心肌细胞STIM1以及Orai1蛋白表达上调(P<0.01);钙库排空后,高糖组NRVMs心肌细胞STIM1蛋白聚集体显著增多(P<0.01)。结论体外高糖能诱导大鼠胚胎心肌细胞系H9C2及乳大鼠原代培养心室肌细胞NRVMs的STIM1和Orai1蛋白表达上调,促进STIM1蛋白激活形成聚集体和SOCE激活,Ca2+内流增多。该作用提示高糖增加的心肌细胞SOCE可能与糖尿病心肌肥大有关。 展开更多
关键词 高糖 钙库操纵性钙内流 基质相互作用分子1 钙释放激活钙通道调节分子1
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三七皂苷R1对肺高压大鼠模型肺动脉的舒张作用 被引量:11
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作者 胡莹 焦海霞 +3 位作者 王瑞幸 郭立成 穆云萍 林默君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1572-1576,共5页
目的探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)和野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠模型肺动脉(pulmonary arteries,PAs)收缩效应的作用及其机制。方法清洁级♂SD大鼠随机... 目的探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)和野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠模型肺动脉(pulmonary arteries,PAs)收缩效应的作用及其机制。方法清洁级♂SD大鼠随机分为3组。正常对照组;CH组:大鼠饲养于氧分压为10.0%±0.5%的密封有机玻璃箱内;MCT组:大鼠按60 mg·kg-1(BW)一次性腹腔注射20 mg·L-1的MCT。观察三七皂苷R1对两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应的作用。结果可成功制备CH和MCT致肺高压大鼠;三七皂苷R1(0.1~100μmol·L-1)对10 nmol·L-1内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱发正常大鼠PAs收缩效应呈剂量依赖性舒张,EC50为(5.25±0.14)μmol·L-1;3 nmol·L-1Gd3+阻断ET-1诱发两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应后,再加入三七皂苷R1无进一步抑制作用;6μmol·L-1三七皂苷R1对环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱发两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应均有明显的抑制作用。结论三七皂苷R1可能通过阻断钙池操纵性钙内流介导的PAs收缩产生治疗肺高压作用。 展开更多
关键词 慢性低氧 野百合碱 肺高压 三七皂苷R1 钙池操 纵性钙内流 肺动脉
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