期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
siat7e基因和st3gal Ⅰ基因双表达载体的构建及其初步应用
被引量：
4
1
作者
陈小云
张敏
+3 位作者
张启龙
王磊
王栋
蒋桃珍
《中国兽药杂志》
2013年第4期6-10,共5页
应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从人类基因组中扩增出全长为1011 bp的唾液酸转移酶(siat7e基因),并从鸡基因组中扩增出全长为1029 bp的β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(ST3GAL Ⅰ)基因。将它们分别克隆入pMD18-T载体中。对扩增的全长si...
应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从人类基因组中扩增出全长为1011 bp的唾液酸转移酶(siat7e基因),并从鸡基因组中扩增出全长为1029 bp的β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(ST3GAL Ⅰ)基因。将它们分别克隆入pMD18-T载体中。对扩增的全长siat7e基因序列采用BamH Ⅰ和PstⅠ双酶切后连接入pReceiver真核表达载体,构建pRE-SⅠAT重组表达载体,进而,对扩增的全长st3gal Ⅰ基因采用Sac Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,后连接入pRE-SIAT重组表达载体,构建pRE-SIAT-ST3重组真核表达载体。经限制性内切酶消化及DNA序列分析,证实构建的重组表达质粒是正确的。将构建的双基因表达载体转染MDCK细胞,利用荧光显微镜观察,可见细胞表达明显的绿色荧光,从而初步证实了外源基因在MDCK细胞中的正确表达。本研究为最终构建能够适应悬浮培养,并且对禽流感病毒更为易感的MDCK细胞系奠定了基础。
展开更多
关键词
s
i
at7e基因
st3gal
Ⅰ基因
表达载体
MDCK细胞
在线阅读
下载PDF
职称材料
共表达siat7e和st3galⅠ基因MDCK细胞株的建立
2
作者
张启龙
陈小云
王栋
《中国兽药杂志》
2014年第3期1-5,共5页
为建立易悬浮驯化和对流感病毒易感的MDCK细胞株,将表达siat7e和st3galⅠ基因的真核表达载体电击转染MDCK细胞,采用有限稀释法、荧光定量PCR和流式细胞术成功筛选到1株双基因共表达MDCK-C5细胞株,且传至12代后仍表达稳定,为流感疫苗工...
为建立易悬浮驯化和对流感病毒易感的MDCK细胞株,将表达siat7e和st3galⅠ基因的真核表达载体电击转染MDCK细胞,采用有限稀释法、荧光定量PCR和流式细胞术成功筛选到1株双基因共表达MDCK-C5细胞株,且传至12代后仍表达稳定,为流感疫苗工业化大规模生产奠定了基础。
展开更多
关键词
MDCK细胞
s
i
at7e基因
st3gal
i
基因
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
siat7e基因和st3gal Ⅰ基因双表达载体的构建及其初步应用
被引量：
4
1
作者
陈小云
张敏
张启龙
王磊
王栋
蒋桃珍
机构
中国兽医药品监察所
出处
《中国兽药杂志》
2013年第4期6-10,共5页
基金
国家自然科学基金(项目批准号31101817)
"863"项目课题"疫苗与诊断试剂创制及工艺创新"子课题:"重大动物疫病疫苗悬浮培养关键技术研究"(2011AA10A213)
文摘
应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从人类基因组中扩增出全长为1011 bp的唾液酸转移酶(siat7e基因),并从鸡基因组中扩增出全长为1029 bp的β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(ST3GAL Ⅰ)基因。将它们分别克隆入pMD18-T载体中。对扩增的全长siat7e基因序列采用BamH Ⅰ和PstⅠ双酶切后连接入pReceiver真核表达载体,构建pRE-SⅠAT重组表达载体,进而,对扩增的全长st3gal Ⅰ基因采用Sac Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,后连接入pRE-SIAT重组表达载体,构建pRE-SIAT-ST3重组真核表达载体。经限制性内切酶消化及DNA序列分析,证实构建的重组表达质粒是正确的。将构建的双基因表达载体转染MDCK细胞,利用荧光显微镜观察,可见细胞表达明显的绿色荧光,从而初步证实了外源基因在MDCK细胞中的正确表达。本研究为最终构建能够适应悬浮培养,并且对禽流感病毒更为易感的MDCK细胞系奠定了基础。
关键词
s
i
at7e基因
st3gal
Ⅰ基因
表达载体
MDCK细胞
Keywords
s
i
at7e
gene
st3gal i gene
express vector
MDCK cell
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
共表达siat7e和st3galⅠ基因MDCK细胞株的建立
2
作者
张启龙
陈小云
王栋
机构
中国兽医药品监察所
出处
《中国兽药杂志》
2014年第3期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31101817)
"十一五"国家科技支撑计划重点项目(2009BADB4B00)
文摘
为建立易悬浮驯化和对流感病毒易感的MDCK细胞株,将表达siat7e和st3galⅠ基因的真核表达载体电击转染MDCK细胞,采用有限稀释法、荧光定量PCR和流式细胞术成功筛选到1株双基因共表达MDCK-C5细胞株,且传至12代后仍表达稳定,为流感疫苗工业化大规模生产奠定了基础。
关键词
MDCK细胞
s
i
at7e基因
st3gal
i
基因
Keywords
MDCK cell
s
i
at7e
gene
st3gal i gene
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
siat7e基因和st3gal Ⅰ基因双表达载体的构建及其初步应用
陈小云
张敏
张启龙
王磊
王栋
蒋桃珍
《中国兽药杂志》
2013
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
共表达siat7e和st3galⅠ基因MDCK细胞株的建立
张启龙
陈小云
王栋
《中国兽药杂志》
2014
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
