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鲤春病毒血症病毒糖蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备被引量：8: 1; 作者张家林李强 +1 位作者叶仕根李华《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期454-458,共5页; 利用原核表达系统表达纯化鲤春病毒血症病毒(SVCV)G蛋白,制备特异性单克隆抗体,扩增出鲤春病毒0504分离株G基因片段,并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,经诱导表达、裂解离心包涵体,包涵体经His Bind亲和层析柱纯化及尿素浓度梯度... 展开更多; 关键词鲤春病毒血症病毒(svcv) G蛋白原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)特性和对鲤春病毒的敏感性被引量：3: 2; 作者王津津刘莹 +7 位作者于力贾鹏陈兵史秀杰郑晓聪兰文升何俊强刘荭《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2016年第6期56-61,共6页; 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)是中国科学院水生生物研究所在20世纪70年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系,迄今已传至300多代,在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用。本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测... 展开更多; 关键词草鱼性腺细胞系生物学特性易感性鲤春病毒血症病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

鲤春病毒糖蛋白(G)基因的分离及同源性比较被引量：3: 3; 作者耿波孙效文 +2 位作者牟振波梁利群欧阳红生《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期450-454,共5页; 通过RT—PCR和巢氏PCR方法从疑似鲤春病毒（SVCV）侵染的镜鲤肝组织中获得了鲤眷病毒糖蛋白（G）基因。通过序列测定与分析，所获得的鲤春病毒糖蛋白（G）基因由606个核苷酸组成。编码一个由202个氨基酸组成的糖蛋白。通过NCBI blast与... 展开更多; 关键词鲤春病毒病糖蛋白序列同源性分离株; 在线阅读下载PDF 职称材料

纳米磁珠现场提取鲤春病毒核酸的方法研究: 4; 作者王姝刘朋朋 +6 位作者张雷张伟孙明赵晓丽刘翌邓丛良张利峰《中国动物检疫》 CAS 2013年第5期46-48,共3页; 使用纳米磁珠(MNP)提取鲤春病毒(SVCV)核酸,置25℃和4℃保存,分别在第1、4、11、20天时,用荧光RT-PCR方法检测。结果显示MNP提取到的SVCV核酸均出现典型扩增,并且与对照样品的Ct值接近,证实MNP可以有效地吸附鲤春病毒核酸,并能释放核酸... 展开更多; 关键词纳米磁珠(MNP) 鲤春病毒(svcv) 荧光RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价被引量：4: 5; 作者田城城兰文升叶仕根《中国动物检疫》 CAS 2020年第2期99-106,共8页; 重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求。本研究以鲤春病毒血症病毒(springviraem... 展开更多; 关键词重组酶聚合酶扩增技术鲤春病毒血症病毒核酸检测评价; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲤春病毒血症病毒糖蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备被引量：8: 1; 作者张家林李强叶仕根李华; 机构大连海洋大学辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室; 出处《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期454-458,共5页; 基金辽宁省高等学校优秀人才支持计划项目(LJQ2011075); 文摘利用原核表达系统表达纯化鲤春病毒血症病毒(SVCV)G蛋白,制备特异性单克隆抗体,扩增出鲤春病毒0504分离株G基因片段,并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,经诱导表达、裂解离心包涵体,包涵体经His Bind亲和层析柱纯化及尿素浓度梯度复性后,作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体。结果表明:成功筛选出2株稳定分泌G蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C5、2D5,经Western-Blot检测表明,制备的单克隆抗体具有良好的特异性。本研究中成功制备的抗G蛋白单克隆抗体,可为建立新型鲤春病毒检测方法提供工具。; 关键词鲤春病毒血症病毒(svcv) G蛋白原核表达单克隆抗体; Keywords spring viraemia of carp vires （svcv） glycoprotein prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)特性和对鲤春病毒的敏感性被引量：3: 2; 作者王津津刘莹于力贾鹏陈兵史秀杰郑晓聪兰文升何俊强刘荭; 机构深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心; 出处《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2016年第6期56-61,共6页; 基金国家质检总局科技计划项目(2014IK236) 国家质检总局公益性行业科研专项(201210055 +1 种基金 20120214) 深圳检验检疫局科技计划项目(SZ2014202)共同资助; 文摘草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)是中国科学院水生生物研究所在20世纪70年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系,迄今已传至300多代,在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用。本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测定、细胞周期测定、细胞核型分析、细胞凋亡检测、电镜观察等方法,对GCO的生长特性及鲤春病毒血症病毒(SVCV)在该细胞中的增殖特性等进行了研究。结果显示,GCO细胞的最适生长温度为25℃,在M199和MEM等细胞培养液中均能较好地生长,培养液中最适的胎牛血清浓度为10%。测定了GCO细胞系对SVCV病毒的敏感性,发现与鲤(Cyprinus carpio)上皮瘤细胞系(EPC)、肥头鲤(Pimephales promelas)细胞系(FHM)、大鳞大麻哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)胚胎细胞系(CHSE-214)等世界动物卫生组织(OIE)推荐和各检测实验室常用的鱼类细胞系相比,GCO细胞系对SVCV表现出非常高的敏感性。生长曲线、电镜观察和凋亡实验显示,SVCV能引起GCO细胞系出现明显而稳定的细胞病变,引起GCO细胞系出现凋亡,并在细胞质中大量增殖。结果表明,GCO细胞系适用于SVCV病毒的分离、检测以及病毒致病性的有关研究。GCO细胞的适宜生长温度为15–28℃,这一特点将使它可以广泛地用于多种水生动物病毒的分离。; 关键词草鱼性腺细胞系生物学特性易感性鲤春病毒血症病毒; Keywords Grass carp ovary cell lines （GCO） Biological characteristics Susceptibility spring viraemia of carp virus （svcv）; 分类号 S852.23 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲤春病毒糖蛋白(G)基因的分离及同源性比较被引量：3: 3; 作者耿波孙效文牟振波梁利群欧阳红生; 机构中国水产科学研究院黑龙江水产研究所吉林大学; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期450-454,共5页; 基金中国水产科学研究院冷水性鱼类增养殖重点实验室开放课题"冷水性鱼类病毒病原的研究与鉴定" 农业科技跨越计划"优质冷水性鱼类健康养殖技术示范"(2004跨21)项目的资助; 文摘通过RT—PCR和巢氏PCR方法从疑似鲤春病毒（SVCV）侵染的镜鲤肝组织中获得了鲤眷病毒糖蛋白（G）基因。通过序列测定与分析，所获得的鲤春病毒糖蛋白（G）基因由606个核苷酸组成。编码一个由202个氨基酸组成的糖蛋白。通过NCBI blast与9个来自不同国家或地区的鲤春病毒糖蛋白（G）基因序列比对分析，发现获得的鲤鱼春季病毒糖蛋白G基因DNA序列与美国分离的AY527273株同源性最高为99．8％，与中国分离的AY842485株同源性次高为98．7％，与英国分离的两个序列SVI538065和SVI538066株的同源性为98．2％，而与其它国家的分离株如SVUI8101、SVI318079、SVI538061、SVI538062、SVI538063的同源性最差，仅为89．4％-90．0％。氨基酸同源性分析结果与DNA同源性分析结果一致，所获得的鲤春病毒糖蛋白G基因氨基酸推导序列与其它9个分离株的氨基酸同源性在89．6％-99．5％之间。对SVCV不同分离株遗传变异和进化关系的分析为下一步开展SVCV快速诊断方法的研究和疫苗的研制奠定了基础。; 关键词鲤春病毒病糖蛋白序列同源性分离株; Keywords spring viraemia of carp virus（svcv） Glycoprote in Sequence homologue Isolate; 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名纳米磁珠现场提取鲤春病毒核酸的方法研究: 4; 作者王姝刘朋朋张雷张伟孙明赵晓丽刘翌邓丛良张利峰; 机构北京市水产技术推广站北京出入境检验检疫局; 出处《中国动物检疫》 CAS 2013年第5期46-48,共3页; 基金国家重大科学研究计划项目2011CB932800<纳米测量技术标准的基础研究>资助; 文摘使用纳米磁珠(MNP)提取鲤春病毒(SVCV)核酸,置25℃和4℃保存,分别在第1、4、11、20天时,用荧光RT-PCR方法检测。结果显示MNP提取到的SVCV核酸均出现典型扩增,并且与对照样品的Ct值接近,证实MNP可以有效地吸附鲤春病毒核酸,并能释放核酸。MNP提取的核酸保存20d后,荧光RT-PCR依然可检测到阳性,说明MNP提取到的病毒核酸能在常温或低温下保存。这样就能够在现场处理样品,方便样品的携带,节约运输成本,提高实验室的样品处理效率。; 关键词纳米磁珠(MNP) 鲤春病毒(svcv) 荧光RT-PCR; Keywords magnetic nanoparticles （MNP） spring viraemia of carp virus （svcv） real-time RT-PCR; 分类号 S941.416 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价被引量：4: 5; 作者田城城兰文升叶仕根; 机构大连海洋大学水产与生命学院深圳海关动植物检验检疫技术中心; 出处《中国动物检疫》 CAS 2020年第2期99-106,共8页; 基金深圳市科技计划项目（JCYJ20170410103015603）; 文摘重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求。本研究以鲤春病毒血症病毒(springviraemiaofcarp virus,SVCV)为检测靶标,建立了SVCV的RPA检测技术,并分析了该方法的灵敏性、特异性和稳定性,评判了该技术应用于POCT的可能性。结果表明:基于RPA的检测方法灵敏度较高,检测下限可达4×10~3 PFU/mL,但比以Taq酶为基础的RT-PCR技术略低;特异性好,未发现对其他水生动物疫病病原,如传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)、传染性鲑鱼贫血病病毒(ISAV)等发生非特异性反应;稳定性良好,3次重复性试验的结果近乎一致。试验证明,该方法能够替代RT-PCR技术,应用于POCT的试剂和仪器设备研发。; 关键词重组酶聚合酶扩增技术鲤春病毒血症病毒核酸检测评价; Keywords recombinase polymerase amplification(RPA) spring viraemia of carp virus(svcv) nucleic acid test evaluation; 分类号 S851.34 [农业科学—预防兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鲤春病毒血症病毒糖蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备	张家林李强叶仕根李华	《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)特性和对鲤春病毒的敏感性	王津津刘莹于力贾鹏陈兵史秀杰郑晓聪兰文升何俊强刘荭	《渔业科学进展》 CSCD 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鲤春病毒糖蛋白(G)基因的分离及同源性比较	耿波孙效文牟振波梁利群欧阳红生	《生物技术通报》 CAS CSCD	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	纳米磁珠现场提取鲤春病毒核酸的方法研究	王姝刘朋朋张雷张伟孙明赵晓丽刘翌邓丛良张利峰	《中国动物检疫》 CAS	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价	田城城兰文升叶仕根	《中国动物检疫》 CAS	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料