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烙灸激活Wnt信号通路干预脊髓损伤大鼠血清促进内源性神经干细胞增殖分化研究 被引量：2
1
作者 夏铂 范灵 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第1期180-184,I0005,共6页
目的探究烙灸激活Wnt信号通路干预脊髓损伤大鼠血清中的内源性神经干细胞增殖分化。方法采用脊髓损伤大鼠Allen′s模型。分假手术组、模型组、Wnt抑制剂组、烙灸组、烙灸+Wnt抑制剂组,干预7 d后,取各组大鼠血清。取造模成功后3 d大鼠脊... 目的探究烙灸激活Wnt信号通路干预脊髓损伤大鼠血清中的内源性神经干细胞增殖分化。方法采用脊髓损伤大鼠Allen′s模型。分假手术组、模型组、Wnt抑制剂组、烙灸组、烙灸+Wnt抑制剂组,干预7 d后,取各组大鼠血清。取造模成功后3 d大鼠脊髓组织,分离培养内源性神经干细胞。各组血清干预细胞,在7 d后观察各组细胞增殖和分化状态。采用Westernt Blot、qRT-PCR检测各组分离血清干预后内源性神经干细胞增殖分化标记物蛋白表达及基因表达情况。结果免疫荧光染色显示烙灸组内源性神经干细胞增殖及向神经元分化最显著;模型组、Wnt抑制剂组增殖分化最少。Westernt Blot、qRT-PCR检测结果均显示烙灸组最显著,Wnt抑制剂组与模型组差异不显著。结论烙灸激活脊髓损伤大鼠Wnt信号通路,促进其内源性神经干细胞增殖分化为神经元细胞及少突胶质细胞,再抑制分化为星状胶质细胞,以实现神经细胞恢复新生的目的。 展开更多
关键词 WNT信号通路 烙灸 脊髓损伤大鼠血清 内源性神经干细胞 增殖分化
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重复经脊髓磁刺激对Notch1通路调控小鼠脊髓神经干细胞激活效应的作用
2
作者 琚芬 赵晨光 +4 位作者 孙玮 袁华 黄朝阳 鱼亮 黄省利 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期756-763,共8页
目的:观察重复经脊髓磁刺激(repetitive trans-spinal magnetic stimulation,rTSMS)通过Notch1通路对脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的作用。方法:孕龄16周C57BL/6小鼠处死后,迅速分离胎鼠全长脊髓,体外培养小鼠脊髓来源NSCs,... 目的:观察重复经脊髓磁刺激(repetitive trans-spinal magnetic stimulation,rTSMS)通过Notch1通路对脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的作用。方法:孕龄16周C57BL/6小鼠处死后,迅速分离胎鼠全长脊髓,体外培养小鼠脊髓来源NSCs,通过单细胞测序及RNA速率分析检测脊髓NSCs亚群及速率变化特征。将体外培养的NSCs分为对照组、干预组及实验组。对照组将刺激探头置于培养皿上,不给予rTSMS刺激干预;干预组将刺激探头置于培养皿上,采用20Hz高频rTSMS、1500个脉冲刺激;实验组在转染Notch1 shRNA慢病毒后,进行rTSMS刺激,方案同干预组。采用Western blot检测各组Notch1表达量,免疫荧光染色和克隆球形成实验检测NSCs激活情况。结果:体外培养的脊髓NSCs可以诱导分化成为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,单细胞测序显示NSCs其可分为6个亚群并具有特殊异质性,Notch1主要表达在dNSCs和pNSCs两个亚群中。Notch1 shRNA慢病毒转染第5天后,细胞中Notch1蛋白表达量明显下降(对照组1.080±0.086 vs实验组0.520±0.041,P<0.05)。随后对照组给予假刺激,干预组及实验组给予rTSMS刺激,发现rTSMS显著提高NSCs内Notch1表达(对照组1.030±0.068 vs干预组1.480±0.087,P<0.05)。rTSMS干预后克隆球直径增大(对照组88.5±7.5 vs干预组106.2±8.8 vs实验组89.2±8.1,P<0.05)和BrdU阳性细胞率提高(对照组38.6±3.7 vs干预组50.3±4.6,P<0.05),有统计学差异。Notch1 shRNA干扰后,克隆球直径以及BrdU阳性细胞率均小于对照组,有统计学差异(P<0.05)。结论:rTSMS可在体外介导Notch1促进NSCs有效激活。 展开更多
关键词 神经干细胞 重复经脊髓磁刺激 NOTCH1 激活 小鼠
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龟板对脊髓损伤大鼠神经干细胞的作用 被引量：34
3
作者 李伊为 崔晓军 +3 位作者 陈东风 杜少辉 黎晖 周建洪 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期321-324,共4页
为了观察龟板对大鼠脊髓损伤后 nestin表达和后肢功能恢复的影响 ,本实验于手术后 1d、7d、14 d、2 1d、2 8d分别对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能 ,处死动物后应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白的表达 ,用图像... 为了观察龟板对大鼠脊髓损伤后 nestin表达和后肢功能恢复的影响 ,本实验于手术后 1d、7d、14 d、2 1d、2 8d分别对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能 ,处死动物后应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白的表达 ,用图像分析仪进行定量分析 ,观察了龟板对脊髓损伤后神经上皮干细胞蛋白的影响。结果表明 ,脊髓损伤后第 1d,在两组受损伤脊髓灰质中都可见到 nestin的表达 ;第 14 d时达到高峰 ,龟板组为 3 8.2 4± 6.83 ,损伤组为 2 2 .48± 7.83 (P<0 .0 5 )。龟板组可使损伤的脊髓中 nestin持续高表达至术后第 2 8d,而损伤组仅持续高表达至术后 2 1d。增加的 nestin阳性细胞数量与神经功能的改善平行。本研究结果提示 展开更多
关键词 龟板 神经干细胞 细胞增殖 脊髓损伤 脊髓损伤
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神经干细胞与NT-3基因修饰雪旺细胞联合移植促进全横断脊髓损伤大鼠功能修复的实验研究 被引量：15
4
作者 郭家松 曾园山 +4 位作者 李海标 黄文林 李晓君 刘甘泉 李晓滨 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期323-326,共4页
目的:探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养素-3(NT-3)基因修饰雪旺细胞(SCs)联合移植对全横断脊髓损伤大鼠的后肢运动及神经传导功能修复的作用。方法:将NSCs与NT-3基因修饰SCs或未基因修饰SCs联合移植,或NSCs单独移植到大鼠全横断性脊髓损... 目的:探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养素-3(NT-3)基因修饰雪旺细胞(SCs)联合移植对全横断脊髓损伤大鼠的后肢运动及神经传导功能修复的作用。方法:将NSCs与NT-3基因修饰SCs或未基因修饰SCs联合移植,或NSCs单独移植到大鼠全横断性脊髓损伤处,60d后进行爬网格测验和BBB评分检测运动功能。第67d,进行皮质运动诱发电位(CMEP)和皮质感觉诱发电位(CSEP)检测脊髓的神经传导功能。结果:脊髓损伤大鼠后肢的运动功能及CMEP和CSEP的修复程度依次为NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植组,NSCs与未基因修饰SCs联合移植组,NSCs单独移植组和实验对照组。结论:NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植能够促进脊髓损伤后大鼠的后肢运动及神经传导功能的修复。 展开更多
关键词 NT-3基因修饰 全横断脊髓损伤 联合移植 神经干细胞 功能修复 雪旺细胞 大鼠 实验研究 全横断性脊髓损伤 神经传导功能 NSCs 感觉诱发电位 运动诱发电位 单独移植 运动功能 神经营养素 CSEP 后肢 BBB EP) 对照组 检测
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神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后腓肠肌的影响 被引量：10
5
作者 李成仁 陈德英 +2 位作者 李巍 蔡文琴 苏炳银 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期36-39,共4页
目的　探讨神经干细胞 (NSCs)移植对脊髓损伤后腓肠肌的影响。方法　 3 0只Wistar大鼠随机分为正常组(A组 )、损伤组 (B组 )和NSCs移植组 (C组 ) ,每组 10只 ;将培养的大鼠神经干细胞悬液注入C组切断脊髓处 ,B组注射等量的生理盐水。术... 目的　探讨神经干细胞 (NSCs)移植对脊髓损伤后腓肠肌的影响。方法　 3 0只Wistar大鼠随机分为正常组(A组 )、损伤组 (B组 )和NSCs移植组 (C组 ) ,每组 10只 ;将培养的大鼠神经干细胞悬液注入C组切断脊髓处 ,B组注射等量的生理盐水。术后 2个月 ,进行腓肠肌肌电位、肌湿重测定 ,观察腓肠肌运动终板的变化。结果　①与A组比较 ,B组和C组腓肠肌肌电位的峰值下降 ,时限延长 (P <0 .0 1) ,C组电位有所恢复。②与A组比较 ,B组的腓肠肌肉湿重下降近70 %,C组肌肉湿重有所恢复 ,但仍未达到正常水平 (P <0 .0 1)。③B组和C组的运动终板形状变得单一 ,运动终板的总数量减少 ,其中C组比B组减少数目为少。结论　神经干细胞移植入脊髓损伤的横断处 ,能延缓肌肉的萎缩 ,有助于其功能的恢复。 展开更多
关键词 神经干细胞移植 神经干细胞 脊髓损伤 腓肠肌 SCI
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高压氧对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的诱导作用 被引量：35
6
作者 刘海 王忠诚 +2 位作者 安沂华 崔勇 晋强 《中国康复理论与实践》 CSCD 2006年第5期369-371,共3页
目的探讨高压氧对脊髓损伤后内源性干细胞的诱导修复。方法脊髓半横断后高压氧治疗,进行行为学评分、电镜及免疫组化检查。结果内源性神经干细胞治疗后较对照组增多。结论高压氧使实验动物内源性神经干细胞增殖、分化加强,脊髓损伤后的... 目的探讨高压氧对脊髓损伤后内源性干细胞的诱导修复。方法脊髓半横断后高压氧治疗,进行行为学评分、电镜及免疫组化检查。结果内源性神经干细胞治疗后较对照组增多。结论高压氧使实验动物内源性神经干细胞增殖、分化加强,脊髓损伤后的功能得到改善。 展开更多
关键词 脊髓损伤 高压氧 内源性神经干细胞 大鼠
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NOV基因修饰神经干细胞移植对损伤大鼠脊髓功能恢复的影响 被引量：8
7
作者 李成仁 李巍 +2 位作者 蔡文琴 苏炳银 陈德英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期33-35,共3页
目的　观察NOV基因修饰神经干细胞 (NSCs)移植对损伤大鼠脊髓功能的治疗作用。方法　 40只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )、NSCs组 (C组 )和NOV NSCs组 (D组 ) ,每组 10只 ;将NSCs悬液注入C组切断脊髓处 ,D组注入等量... 目的　观察NOV基因修饰神经干细胞 (NSCs)移植对损伤大鼠脊髓功能的治疗作用。方法　 40只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )、NSCs组 (C组 )和NOV NSCs组 (D组 ) ,每组 10只 ;将NSCs悬液注入C组切断脊髓处 ,D组注入等量的NOV基因修饰NSCs悬液 ,B组注射等量的生理盐水。术后 2个月 ,采用BBB评分和皮层体感诱发电位 (CSEP)观察大鼠脊髓功能的恢复程度。结果　①术后 2月BBB评分B、C、D组大鼠有所恢复 ,但都未达到正常水平 ;C组和D组的大鼠恢复较好 ,评分较高 ,与B组有显著性差异 ;其中D组比C组恢复要好。②脊髓损伤后 ,各组的CSEP波均消失 ,术后 2月除B组外C组和D组的波形均有不同程度的恢复 ,但潜伏期延长 ,其中C组比D组更长 ,两者之间有显著性差异。 展开更多
关键词 NOV基因 神经干细胞移植 功能恢复 肾母细胞瘤过度表达基因 神经干细胞 脊髓损伤 SCI
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人胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定研究 被引量：13
8
作者 唐少锋 汤逊 +2 位作者 蔡景霞 林月秋 周田华 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2003年第9期523-525,i001,共4页
目的:研究人胚胎神经干细胞的培养条件及体外分化情况。方法:从12周龄人胚胎脑皮质分离细胞,采用无血清培养技术,协同应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和重组人白血病抑制因子(rhLIF)进行培养;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(B... 目的:研究人胚胎神经干细胞的培养条件及体外分化情况。方法:从12周龄人胚胎脑皮质分离细胞,采用无血清培养技术,协同应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和重组人白血病抑制因子(rhLIF)进行培养;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记检测细胞的增殖能力,间接免疫荧光化学法检测细胞的分化情况。结果:培养得到的大量半悬浮生长的神经干细胞球能够传代培养;BrdU标记阳性,可诱导分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论:人胚胎脑皮质分离细胞培养得到的细胞群具有神经干细胞的基本特征,可进一步用于基础及临床研究。 展开更多
关键词 胚胎 神经干细胞 细胞分离 细胞培养 细胞鉴定
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联合应用督脉电针和游泳训练后脊髓损伤大鼠神经干细胞分化方向的研究 被引量：12
9
作者 李灵玲 周达岸 +2 位作者 杨燕兴 王良 刘鹏民 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期172-176,共5页
目的:联合应用督脉电针和游泳训练后,研究脊髓损伤大鼠神经干细胞分化的方向。方法:复制并评价脊髓全横断损伤大鼠模型,75只大鼠随机分为5组:假手术组、脊髓损伤组、脊髓损伤+督脉电针组、脊髓损伤+游泳训练组、脊髓损伤+督脉电针+游泳... 目的:联合应用督脉电针和游泳训练后,研究脊髓损伤大鼠神经干细胞分化的方向。方法:复制并评价脊髓全横断损伤大鼠模型,75只大鼠随机分为5组:假手术组、脊髓损伤组、脊髓损伤+督脉电针组、脊髓损伤+游泳训练组、脊髓损伤+督脉电针+游泳训练组(n=15),检测各组1周、2周、3周、4周、5周5个时间点脊髓组织神经生长因子(NGF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,对各组大鼠进行BBB评分(Basso,Beattie&Bresnahan locomotor rating scale,BBB scale)。结果:各治疗组均能使不同时间点脊髓损伤大鼠BBB评分、脊髓组织NGF表达水平提高(P<0.05);脊髓组织GFAP表达水平下降(P<0.05);提示游泳训练和督脉电针联合干预对促进脊髓损伤的康复效果更佳。各治疗组随着干预时间的增加表现出不同程度的BBB评分、脊髓组织NGF表达水平提高(P<0.01),脊髓组织GFAP表达水平下降(P<0.01);尽量长时间的应用游泳训练和督脉电针对促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复的疗效最佳。结论:联合应用督脉电针与游泳训练后,神经干细胞分化方向得到控制,使脊髓组织NGF表达增强,GFAP表达被抑制,从而促进神经元的再生和修复,抑制星形胶质细胞持续反应性增生,减少胶质瘢痕组织生成,促进神经环路重建。 展开更多
关键词 神经干细胞 督脉电针 游泳训练 脊髓损伤 神经环路
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胚胎大鼠脊髓神经干细胞的培养及鉴定 被引量：6
10
作者 柴勇 杨成 +2 位作者 石增立 张丽霞 张敏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期339-342,共4页
为了探讨胚胎大鼠脊髓神经管神经干细胞体外培养、鉴定的方法,本实验在解剖显微镜下机械性分离11.5 d的胚胎大鼠脊髓神经管,并制备细胞悬液,无血清培养基培养。应用免疫荧光染色方法对原代和传代细胞进行巢蛋白(nestin)鉴定;加入胎牛血... 为了探讨胚胎大鼠脊髓神经管神经干细胞体外培养、鉴定的方法,本实验在解剖显微镜下机械性分离11.5 d的胚胎大鼠脊髓神经管,并制备细胞悬液,无血清培养基培养。应用免疫荧光染色方法对原代和传代细胞进行巢蛋白(nestin)鉴定;加入胎牛血清诱导其分化后分别行神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)鉴定。结果显示:11.5 d胚胎大鼠脊髓神经管来源的神经干细胞经连续传代培养可形成较多克隆球,呈nestin免疫阳性;加入胎牛血清可诱导其分别向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化。本实验结果提示,利用E11.5的胚胎大鼠脊髓神经管可成功培养出大量稳定增殖并有多向分化潜能的神经干细胞,可用于进一步的研究。 展开更多
关键词 神经干细胞 脊髓 细胞培养 鉴定 大鼠
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神经干细胞移植在恢复损伤脊髓传导功能中的作用 被引量：8
11
作者 李成仁 李巍 +2 位作者 蔡文琴 苏炳银 陈德英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期40-42,共3页
目的　探讨神经干细胞 (NSCs)移植在恢复损伤脊髓传导功能中的作用。方法　 3 0只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )和移植组 (C组 ) ,每组 10只 ;将培养的大鼠NSCs悬液注入C组损伤脊髓处 ,B组注射等量的生理盐水。采用... 目的　探讨神经干细胞 (NSCs)移植在恢复损伤脊髓传导功能中的作用。方法　 3 0只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )和移植组 (C组 ) ,每组 10只 ;将培养的大鼠NSCs悬液注入C组损伤脊髓处 ,B组注射等量的生理盐水。采用皮层体感诱发电位 (CSEP)和HRP逆行示踪技术观察大鼠脊髓传导功能的恢复情况。结果　①脊髓损伤后 ,B组的CSEP波消失 ,术后 2月C组的波形有所恢复 ,但潜伏期延长 ;②A组脊髓前角可见到许多HRP标记阳性神经元 ,B组未见阳性神经元 ,C组可见有阳性神经元 ,但数目较A组少。结论　NSCs脊髓内移植能促进损伤脊髓传导功能的部分恢复。 展开更多
关键词 神经干细胞移植 神经干细胞 脊髓损伤 皮层体感诱发电位 HRP SCI
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神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤 被引量：9
12
作者 马希峰 杨波 +7 位作者 宋来君 任新民 唐艳花 赵建英 张正勇 李惠翔 徐晓丽 何炜 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第1期21-23,共3页
目的:探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的新方法,为治疗脊髓功能障碍性疾病打下基础。方法:制作脊髓横断大鼠模型,造成大鼠下肢瘫痪,分别在损伤急性期和损伤3周后移植胎鼠脑组织神经干细胞,观察移植后的动物行为变化、脊髓神经电生理变... 目的:探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的新方法,为治疗脊髓功能障碍性疾病打下基础。方法:制作脊髓横断大鼠模型,造成大鼠下肢瘫痪,分别在损伤急性期和损伤3周后移植胎鼠脑组织神经干细胞,观察移植后的动物行为变化、脊髓神经电生理变化和脊髓组织形态学变化。结果:细胞移植后第8 d即可见瘫痪大鼠的后肢肌力开始恢复,2～3周后可出现爬行,4周后后肢活动活跃;对照组瘫痪的肢体无任何恢复。脊髓诱发电位部分出现,动作电位波幅较高;对照组未出现诱发电位,且动作电位波幅明显减低。脊髓移植区肉眼可见有增生的组织充填,镜下有大量新生的细胞,表现为神经元和神经胶质细胞阳性染色。结论:神经干细胞移植可使脊髓横断大鼠运动功能恢复,有望成为治疗脊髓损伤的有效手段。 展开更多
关键词 神经干细胞移植 神经干细胞 脊髓损伤
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补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后移植神经干细胞存活、增殖与迁移的影响 被引量：10
13
作者 张敏 柴勇 +1 位作者 杨成 刘同慎 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期326-330,共5页
目的:探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)灌胃对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后移植胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)存活、增殖与迁移的影响。方法:将SD大鼠随机分为SCI组、NSCs移植组、NSCs移植联合补阳还五... 目的:探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)灌胃对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后移植胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)存活、增殖与迁移的影响。方法:将SD大鼠随机分为SCI组、NSCs移植组、NSCs移植联合补阳还五汤灌胃组。制作大鼠脊髓横断损伤模型,将BrdU标记NSCs细胞按浓度1×106/ml分别移植入移植组和联合组的脊髓横断处,损伤组用等量DMEM/F12完全培养基代替。术后联合组每天用BYHWD予以灌胃治疗1次,损伤组和移植组用生理盐水代替。各组在7、14、28 d后分别取材,用免疫荧光组织化学法检测移植在SCI处的NSCs存活、增殖和迁移情况。结果:损伤组未见BrdU标记阳性细胞;联合组各时间点BrdU标记阳性细胞数量均多于移植组各时间点,并有显著性统计学意义(P<0.05);联合组28 d时BrdU标记阳性细胞数量最多,与联合组7 d和14 d相比有显著性统计学意义(P<0.05);在联合组各时间点,BrdU标记阳性细胞向SCI处头尾端组织迁移的距离明显长于移植组各时间点。结论:脊髓横断损伤后,移植胚胎NSCs能够存活并增殖和迁移。补阳还五汤能够促进大鼠脊髓全横断损伤处移植的NSCs存活、增殖和迁移。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经干细胞 补阳还五汤 大鼠
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姜黄素诱导内源性神经干细胞促进大鼠脊髓损伤后功能修复 被引量：11
14
作者 向鑫 袁继超 +3 位作者 陈飞 朱海涛 储卫华 林江凯 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期883-887,共5页
目的 探讨姜黄素对脊髓损伤后内源性神经干细胞分化的影响及其对损伤后功能修复的作用。 方法 雄性SD大鼠72只按随机数字表法分为3组：假手术组（n=12）、单纯损伤组（n=30）、姜黄素处理组（n=30）。假手术组仅行椎板切除术，单纯... 目的 探讨姜黄素对脊髓损伤后内源性神经干细胞分化的影响及其对损伤后功能修复的作用。 方法 雄性SD大鼠72只按随机数字表法分为3组：假手术组（n=12）、单纯损伤组（n=30）、姜黄素处理组（n=30）。假手术组仅行椎板切除术，单纯损伤组、姜黄素处理组以70 g力的动脉瘤夹钳夹T9-T10节段脊髓1 min造模。姜黄素处理组于脊髓损伤后30 min按200 mg/kg给予腹腔注射姜黄素，单纯损伤组给予等量生理盐水。分别于损伤后1 d，1、2、4、8周行BBB运动功能评分及斜板实验评价大鼠后肢功能，后处死大鼠并取材，行免疫荧光染色分别观察Nestin、Tuj1、GFAP/CSPG的表达，Western blot检测Wnt3a蛋白及β-catenin表达情况。 结果 BBB运动功能评分及斜板实验结果显示损伤后自1周开始，各时间点姜黄素处理组大鼠后肢功能恢复情况均优于单纯损伤组（P〈0.05）。免疫荧光染色显示脊髓损伤后1周可见损伤区附近有Nestin阳性细胞，2周时达高峰，4周时明显减少，单纯损伤组、姜黄素处理组组间差异无统计学意义；姜黄素处理组Tuj1阳性神经元数量较单纯损伤组明显增多；4周时脊髓损伤中心囊腔周边形成胶质瘢痕，姜黄素处理组GFAP及CSPG表达明显弱于单纯损伤组。Western blot检测Wnt3a及β-catenin表达显示假手术组几乎无表达，姜黄素处理组表达量较单纯损伤组明显增强（P〈0.05）。 结论 姜黄素可通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导脊髓损伤后被激活的内源性神经干细胞更多地分化为神经元，减轻胶质瘢痕，从而改善大鼠后肢功能的恢复。 展开更多
关键词 姜黄素 脊髓损伤 内源性神经干细胞 WNT Β-CATENIN信号通路
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神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后Caspase-3和c-fos表达的影响 被引量：5
15
作者 刘畅 陈晓 +5 位作者 李诚 乔苏迟 朱德刚 吾不力.阿扎提 苏佳灿 王志伟 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期343-347,共5页
目的研究神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后Caspase-3和c-fos表达的影响。方法 SD大鼠45只,随机分成3组(n=15):假手术组、脊髓损伤模型组(模型组)和神经干细胞移植组。假手术组仅打开锥板但不离断脊髓;模型组动物锥板打开后横向断开脊髓,... 目的研究神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后Caspase-3和c-fos表达的影响。方法 SD大鼠45只,随机分成3组(n=15):假手术组、脊髓损伤模型组(模型组)和神经干细胞移植组。假手术组仅打开锥板但不离断脊髓;模型组动物锥板打开后横向断开脊髓,止血并逐层缝合;神经干细胞移植组椎板打开后横向断开脊髓,止血并注入神经干细胞悬液,再逐层缝合。手术后1、2、3和14 d对大鼠进行神经功能评分(BBB评分)。14 d后处死动物,取脊髓组织,部分用于制备切片并进行TUNEL标记,检测神经细胞(神经元)的凋亡;对另一部分脊髓组织进行蛋白提取,Western blotting检测Caspase-3和c-fos蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组和神经干细胞移植组BBB评分均显著下降(P<0.05);但神经干细胞移植组神经功能改善情况好于模型组(P<0.05)。模型组和神经干细胞移植组的细胞凋亡率均显著高于假手术组(P<0.05);神经干细胞移植组细胞凋亡率明显低于模型组(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,模型组和神经干细胞移植组大鼠脊髓组织中Caspase-3和c-fos的表达量显著高于假手术组(P<0.05);神经干细胞移植组大鼠脊髓组织中Caspase-3和c-fos的表达量显著低于模型组(P<0.05)。结论在大鼠脊髓损伤后,神经干细胞移植能够加快大鼠损伤后的恢复并降低细胞凋亡率,使Caspase-3和c-fos的表达量减少,对大鼠脊髓损伤具有治疗作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经干细胞 移植 神经元细胞凋亡
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督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进SCI横断大鼠前角运动神经元存活及减轻后肢肌萎缩的研究 被引量：10
16
作者 李晓滨 曾园山 +1 位作者 陈玉玲 陈穗君 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期104-107,共4页
目的:探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用对大鼠脊髓全横断损伤的前角运动神经元存活以及减轻后肢肌萎缩有无促进作用。方法:将正常组、对照组、督脉电针组(电针组)、神经干细胞移植组(NSCs组)和督脉电针+神经干细胞移植组(电针NSCs... 目的:探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用对大鼠脊髓全横断损伤的前角运动神经元存活以及减轻后肢肌萎缩有无促进作用。方法:将正常组、对照组、督脉电针组(电针组)、神经干细胞移植组(NSCs组)和督脉电针+神经干细胞移植组(电针NSCs组)成年大鼠T10脊髓段做全横断损伤,其中NSCs组和电针NSCs组在损伤处移植神经干细胞,电针组和电针NSCs组在术后开始接受督脉电针治疗。所有实验动物在脊髓损伤后存活65天。结果:电针NSCs组大鼠其腰段脊髓受损伤运动神经元的存活数量明显多于其他实验对照组大鼠。电针NSCs组大鼠后肢的股二头肌萎缩程度明显小于其他实验对照组大鼠。结论:督脉电针与神经干细胞移植联合应用能够促进大鼠脊髓全横断损伤后受损伤的脊髓前角运动神经元存活,以及减轻大鼠脊髓全横断损伤后瘫痪的后肢股二头肌的萎缩状况。 展开更多
关键词 督脉 电针 神经干细胞移植 脊髓损伤 运动神经元 肌萎缩 大鼠
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大鼠胚胎脑和脊髓神经干细胞分化特性比较 被引量：3
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作者 尹岚 富赛里 +2 位作者 马政文 徐晓明 陆佩华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期50-54,共5页
　体外分离大鼠胚胎脑和脊髓神经干细胞,经培养传代后,撤除生长因子(bFGF和EGF)并给予 1%胎牛血清促其自然分化,然后比较两者的分化规律,以及传代次数对分化的影响。结果发现:在完全相同的培养条件下,来源于脑和脊髓的神经干细胞均可分... 　体外分离大鼠胚胎脑和脊髓神经干细胞,经培养传代后,撤除生长因子(bFGF和EGF)并给予 1%胎牛血清促其自然分化,然后比较两者的分化规律,以及传代次数对分化的影响。结果发现:在完全相同的培养条件下,来源于脑和脊髓的神经干细胞均可分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞,但两者分化为神经元的能力均随细胞体外传代次数的增加而显著下降 (P<0. 05);此外,脑来源的神经干细胞分化为神经元的能力远高于脊髓来源的神经干细胞 (P<0. 01)。提示,来自中枢神经系统不同部位的神经干细胞在分化潜力上存在差别,体外传代会影响神经干细胞的分化能力。 展开更多
关键词 分化 胎脑 大鼠胚胎 脊髓神经 神经干细胞 神经元 体外分离 传代 胎牛血清 少突胶质细胞
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树突细胞及神经干细胞/前体细胞联合移植促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复 被引量：5
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作者 晁瑞 赵建华 +2 位作者 刘明永 王永飞 郭乔楠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期998-1002,共5页
目的观察树突细胞(dendritic cells,DCs)及神经干细胞/前体细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)联合移植对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的作用,并初步探讨其机制。方法 SD成年大鼠80只制作脊髓损伤模型,随机数字表... 目的观察树突细胞(dendritic cells,DCs)及神经干细胞/前体细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)联合移植对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的作用,并初步探讨其机制。方法 SD成年大鼠80只制作脊髓损伤模型,随机数字表法分为4组,SCI 9 d后分别移植Hanks平衡盐溶液(Hanks balanced salt solution,HBSS)、DCs、NSPCs、DCs+NSPCs。通过BBB评分法评估SCI大鼠运动功能,组织病理学方法观察损伤局部病理学改变。采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)转基因SD大鼠脑来源的NSPCs,损伤局部移植2周后观察存活情况。免疫组织荧光法观察损伤局部神经生长因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的表达变化。结果移植84 d后DCs+NSPCs组运动功能明显改善(P<0.05),DCs+NSPCs组、NSPCs组、DCs组、HBSS组BBB评分分别为(11.70±0.99)、(9.75±0.50)、(7.40±0.93)、(5.93±0.78),相邻两组有统计学差异(P<0.05)。DCs+NSPCs组损伤区范围及空洞均明显减少(P<0.05),NSPCs存活数量明显增加(P<0.01),显著上调损伤区NT-3的表达。结论 DCs联合NSPCs移植能够促进神经干细胞存活,减少损伤区范围及空洞形成,改善SCI大鼠运动功能。损伤区NT-3的表达增加可能是促进修复的机制之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 树突细胞 神经干细胞 移植
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BDNF基因修饰神经干细胞移植后大鼠脊髓损伤移植处的基因表达变化 被引量：5
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作者 李巍 李成仁 +1 位作者 蔡文琴 周德山 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期43-46,共4页
目的　了解脑源性神经营养因子 (Brain derivedneurotrophicfactor ,BDNF)基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化 ,为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法　大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,手术对照组 ,神经干细胞 (N... 目的　了解脑源性神经营养因子 (Brain derivedneurotrophicfactor ,BDNF)基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化 ,为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法　大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,手术对照组 ,神经干细胞 (Neuralstemcells ,NSCs)移植组 ,BDNF NSCs移植组 ,各组分 4个时相点 (7d、1个月、2个月、3个月 ) ,利用细胞移植、X gal组化、免疫组化、原位杂交等方法 ,观察了移植处细胞的标记基因 (LacZ)表达和BDNF、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )的表达。结果　大鼠脊髓损伤移植处细胞中 ,有标记基因阳性细胞 ,BDNF强烈表达 ,尤其是BDNF NSCs移植组的移植后 1周和 1个月时。各组各时相点均有GFAP和NF 2 0 0免疫反应阳性细胞和纤维。结论　BD NF基因修饰神经干细胞能在脊髓损伤移植处存活 ,强烈表达BDNF ,BDNF基因修饰神经干细胞可以作为脊髓损伤修复的移植材料。 展开更多
关键词 BDNF基因 神经干细胞移植 神经干细胞 脊髓损伤 SCI
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新生大鼠脊髓神经干细胞的分离培养及鉴定 被引量：5
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作者 胡建石 郑志竑 +1 位作者 林玲 林建银 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2004年第1期7-9,共3页
目的　从新生大鼠的脊髓中分离培养神经干细胞并观察其增殖和分化能力。方法　采用细胞培养技术结合间接免疫荧光细胞化学法。结果　分离的细胞生长旺盛 ,单克隆化生成的细胞团 ,BrdU掺入呈强阳性。分离培养获得的细胞团呈Nestin强阳性 ... 目的　从新生大鼠的脊髓中分离培养神经干细胞并观察其增殖和分化能力。方法　采用细胞培养技术结合间接免疫荧光细胞化学法。结果　分离的细胞生长旺盛 ,单克隆化生成的细胞团 ,BrdU掺入呈强阳性。分离培养获得的细胞团呈Nestin强阳性 ,至今已在体外连续传代 8个月。培养的细胞团经 1%小牛血清诱导可分化为神经元和星形胶质细胞。 展开更多
关键词 新生大鼠 脊髓 神经干细胞 分离培养 增殖 分化
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