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大豆加工食品中转基因成分多重PCR检测体系的建立 被引量:6
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作者 王媛 葛毅强 +1 位作者 陈颖 徐宝梁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期118-121,共4页
以大豆内源基因 (Lectin)、筛选基因 3 5S启动子 (Cauliflowermosaicvirus 3 5S ,CaMV3 5S)、Nos终止子 (Nopalinesynthase,Nos)和外源基因 (5 enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthase ,Ep sps)为检测对象 ,通过对PCR扩增体系中各... 以大豆内源基因 (Lectin)、筛选基因 3 5S启动子 (Cauliflowermosaicvirus 3 5S ,CaMV3 5S)、Nos终止子 (Nopalinesynthase,Nos)和外源基因 (5 enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthase ,Ep sps)为检测对象 ,通过对PCR扩增体系中各引物终浓度及PCR扩增过程中退火温度的探讨 ,研究了不同引物终浓度配比及退火温度对转基因大豆多重PCR检测的影响 ,建立了大豆加工食品中转基因成分多重PCR检测体系。结果表明 ,当各组引物的终浓度分别为 1 0、2 0、2 0、3 0 μmol/L即引物终浓度配比为 1∶2∶2∶3 ,退火温度为 5 5 4℃时 ,所建立的多重PCR检测方法能够有效地检测出大豆中的转基因成分 ,具有特异性好 ,简便 ,快速 ,准确等优点。 展开更多
关键词 多重pcr检测 中转 引物 法能 检测对象 内源基因 特异性 大豆 转基因成分 浓度
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五重PCR检测转基因大豆 被引量:10
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作者 张秀丰 苏旭东 +4 位作者 张伟 袁耀武 周巍 张会彦 齐哲 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期194-198,共5页
旨在建立一套准确、快速、可靠的用于转基因大豆检测及DNA提取方法;以35S启动子(Cauliflowermosaicvirus 35S,CaMV 35S)、Nos终止子(Nopalinesynthase,Nos)、NPTⅡ、CP4-EPSPS四种外源基因和大豆内源基因(Lectin)为检测的目的片段,建立... 旨在建立一套准确、快速、可靠的用于转基因大豆检测及DNA提取方法;以35S启动子(Cauliflowermosaicvirus 35S,CaMV 35S)、Nos终止子(Nopalinesynthase,Nos)、NPTⅡ、CP4-EPSPS四种外源基因和大豆内源基因(Lectin)为检测的目的片段,建立五重PCR反应体系,并采用改进的方法提取DNA,进行PCR扩增,实际检测了已知转基因大豆和市售大豆;改进的DNA提取方法与经典的CTAB方法相比,提取时间至少缩短了1h,降低了提取成本。经过PCR扩增对五种外源基因进行了检测,经DNA测序证实了产物为目的扩增产物。转基因大豆的检出限为0.2%~0.5%。改进后的DNA提取方法能够快速提取用于PCR扩增的高质量模板,消除了PCR反应的抑制因子;建立的五重PCR反应体系能够高效、准确的检测转基因大豆。 展开更多
关键词 转基因 大豆 DNA提取 多重pcr 检测
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豆粕饲料中转基因成分的多重PCR快速检测 被引量:5
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作者 于忠娜 苗向阳 +1 位作者 单虎 李建霞 《动物医学进展》 CSCD 2007年第1期53-56,共4页
以大豆内源基因、35S启动子基因、NOS终止子和35S-CTP4为检测对象,研究了对内源基因与外源基因的引物终浓度配比及退火温度对转基因豆粕多重PCR检测的影响。结果表明,建立的多重PCR方法能够准确的同时检测出豆粕中的内源基因和转基因成分。
关键词 豆粕饲料 转基因成分 多重pcr
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抗草甘磷转基因大豆多重PCR检测及假阳性问题探讨 被引量:1
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作者 李信申 何红 +2 位作者 胡汉桥 陈国杰 袁琛 《广东海洋大学学报》 CAS 2008年第6期66-71,共6页
以大豆病基因类似物(RGA)基因为对照,用RR大豆中的外源CaMV35S启动子、CP4-EPSPS引物,应用多重PCR方法,从RR大豆中扩增出预期大小的DNA片段。结果表明:将扩增产物回收后测序,经同源性分析扩增产物为CaMV35S启动子和CP4-EPSPS的一部分序... 以大豆病基因类似物(RGA)基因为对照,用RR大豆中的外源CaMV35S启动子、CP4-EPSPS引物,应用多重PCR方法,从RR大豆中扩增出预期大小的DNA片段。结果表明:将扩增产物回收后测序,经同源性分析扩增产物为CaMV35S启动子和CP4-EPSPS的一部分序列;多重PCR检测的灵敏度为0.08%;PCR检测过程中产生假阳性的原因是污染和非特异性扩增。 展开更多
关键词 抗草甘膦 RR大豆 多重pcr
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