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抗菌肽的结构特征、生物活性及应用 被引量：7
1
作者 胡志帅 陈书明 晋大鹏 《生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期58-61,共4页
抗菌肽分子呈双亲性的α-螺旋结构可使细菌、真菌、寄生虫的质膜形成离子通道,从而导致这些病原体死亡。抗菌肽分子也可通过影响它们的能量转运和代谢,损害它们的呼吸链的功能,抑制它们的蛋白质和DNA的合成,以及干扰病毒的侵染过程和抑... 抗菌肽分子呈双亲性的α-螺旋结构可使细菌、真菌、寄生虫的质膜形成离子通道,从而导致这些病原体死亡。抗菌肽分子也可通过影响它们的能量转运和代谢,损害它们的呼吸链的功能,抑制它们的蛋白质和DNA的合成,以及干扰病毒的侵染过程和抑制病毒的繁殖等机制,对病原体产生抑制或杀灭作用。此外,抗菌肽还可杀伤肿瘤细胞并提高机体的免疫功能。因此,抗菌肽有望开发为防治人和动物疾病的药物,应用前景广阔。 展开更多
关键词 抗菌肽 两亲性 结构 生物活性 应用
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抗菌肽理化性质的研究进展 被引量：2
2
作者 陈武 黎定军 +2 位作者 丁彦 肖启明 周清明 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期150-155,共6页
抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是生物先天免疫系统的重要组成部分,由核糖体或非核糖体肽合成酶合成,可协助宿主有效应对细菌、真菌、原生生物和病毒等病原生物的胁迫。AMPs具有相对分子质量小、两亲性结构和携带正电荷等理化性... 抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是生物先天免疫系统的重要组成部分,由核糖体或非核糖体肽合成酶合成,可协助宿主有效应对细菌、真菌、原生生物和病毒等病原生物的胁迫。AMPs具有相对分子质量小、两亲性结构和携带正电荷等理化性质。综述抗菌肽构象、电荷及阳离子度、疏水性与疏水力矩、两亲性及其他属性等方面的研究进展。 展开更多
关键词 抗菌肽 理化性质 构象 阳离子度 疏水性 两亲性
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融合自组装双亲短肽提高碱性果胶酶热稳定性 被引量：5
3
作者 刘松 汪明星 +1 位作者 堵国成 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1-6,共6页
考察了N-端融合自组装双亲短肽（SAP）对PGL热稳定性的影响.将6种具有不同疏水性和柔性的SAP融合至Bacillus sp.WSHB04-02 PGL N-端,得到融合酶PGL-S1、PGL-S2、PGL-S3、PGL-S4、PGL-S5和PGL-S6.与PGL相比,融合酶的55℃半衰期（t1/2）提... 考察了N-端融合自组装双亲短肽（SAP）对PGL热稳定性的影响.将6种具有不同疏水性和柔性的SAP融合至Bacillus sp.WSHB04-02 PGL N-端,得到融合酶PGL-S1、PGL-S2、PGL-S3、PGL-S4、PGL-S5和PGL-S6.与PGL相比,融合酶的55℃半衰期（t1/2）提高9.69 ～ 72.03倍;PGL-S1比酶活提高1.5倍达到458.52 U/mL,其他融合酶比酶活下降38.27％ ～93.94％.此外,6种融合酶Km均较PGL显著下降;S1-PGL的kcat/Km提高3.52倍,其他融合酶kcat/Km则下降38％以上.所有SAP-PGL融合酶最适反应pH均在pH 9.4～10.6,符合其工业应用环境要求.上述结果表明,N-端融合SAP能有效提高PGL热稳定性和催化活性,获得的融合酶S1-PGL具有理想的应用前景. 展开更多
关键词 碱性果胶酶 自组装双亲短肽 融合 热稳定性比酶活
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桔小实蝇抗菌肽Bactrocerin-2的分离纯化与鉴定 被引量：2
4
作者 党向利 田金环 +1 位作者 易辉玉 柴一秋 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期556-561,共6页
采用阳离子交换层析、RP-FPLC及RP-HPLC分离纯化技术,从细菌诱导的桔小实蝇蛹中分离鉴定出桔小实蝇抗菌肽Bactrocerin-1的同系物Bactrocerin-2。结果表明:Bactrocerin-2含有20个氨基酸残基,分子量为2 311.51 u,序列为VTKTWIKVIRGIGKSKIK... 采用阳离子交换层析、RP-FPLC及RP-HPLC分离纯化技术,从细菌诱导的桔小实蝇蛹中分离鉴定出桔小实蝇抗菌肽Bactrocerin-1的同系物Bactrocerin-2。结果表明:Bactrocerin-2含有20个氨基酸残基,分子量为2 311.51 u,序列为VTKTWIKVIRGIGKSKIKWA;并且Bactrocerin-2与Bactrocerin-1的相似性极高,氨基酸同源性达到90%;该肽与鞘翅目Coleoptericin C-末端的20个氨基酸也具有较高的相似性。氨基酸组成分析结果表明,该肽是一种疏水、带正电荷的抗菌肽。该研究将有助于对昆虫天然免疫反应的认知,并为设计有效的抗菌分子奠定基础。 展开更多
关键词 桔小实蝇 抗菌肽 Bactrocerin-2 同系物 双亲性
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阳离子抗菌肽分子设计的研究现状 被引量：6
5
作者 王威 王联结 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期442-445,448,共5页
随着传统抗生素的大量使用,许多病原微生物对抗生素产生了耐药性。不断寻找新一代的抗菌药物已经成为制药科研工作者的共有目标。阳离子抗菌肽具有相对分子量小、抗菌谱广、热稳定性好和抗菌机理独特等优点,有望成为新一代的抗菌药物。... 随着传统抗生素的大量使用,许多病原微生物对抗生素产生了耐药性。不断寻找新一代的抗菌药物已经成为制药科研工作者的共有目标。阳离子抗菌肽具有相对分子量小、抗菌谱广、热稳定性好和抗菌机理独特等优点,有望成为新一代的抗菌药物。最大限度地提高其活性和稳定性、降低毒性和成本,是抗菌肽新药开发的首要问题。用分子设计手段改造抗菌肽已成为解决这一问题的关键。国内外的研究者在抗菌肽的分子设计方面做出了大量的努力,本文对抗菌肽的人工设计方法进行综述,分析了各种设计方法的优缺点,同时对抗菌肽分子设计的发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 抗菌肽 两亲α-螺旋 分子设计
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通过融合双亲短肽改善L-天冬酰胺酶酶学特性
6
作者 杨套伟 饶志明 +2 位作者 贾明媚 张显 徐美娟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1178-1184,共7页
L-天冬酰胺酶可以将L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸与氨,主要应用在医药与食品行业。作者尝试在L-天冬酰胺酶N-末端融合不同的自组双亲短肽,改善该酶的酶学特性。首先,利用分子克隆技术将6条分别具有不同特征的短肽与L-天冬酰胺酶的N-端融... L-天冬酰胺酶可以将L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸与氨,主要应用在医药与食品行业。作者尝试在L-天冬酰胺酶N-末端融合不同的自组双亲短肽,改善该酶的酶学特性。首先,利用分子克隆技术将6条分别具有不同特征的短肽与L-天冬酰胺酶的N-端融合,并在Escherichia coli BL21中进行表达,最后,利用Ni^(2+)-NTA纯化获得纯的重组L-天冬酰胺酶酶液。结果表明,融合SAP4对L-天冬酰氨酶(ans Z酶)动力学特征影响较大,融合蛋白SAP4-ans Z的比活力较融合前提高约30%,其中重组蛋白K_m值较原始酶下降了7.5%,而V_(max)值得提升了10%,说明融合SAP4可以改善ans Z酶对L-天冬酰胺的水解效率。 展开更多
关键词 L-天冬酰胺酶 双亲短肽 融合 酶学特征
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融合短肽促进碱性果胶酶的高效表达 被引量：4
7
作者 汪明星 刘松 +2 位作者 刘龙 堵国成 陈坚 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期504-509,共6页
碱性果胶酶(PGL)是一种重要的工业酶,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。作者将6种双亲短肽(SAP)融合至PGL N端,以期提高PGL在大肠杆菌中的分泌表达效率。得到一株高产菌株PGL-S1,胞外酶活由129.65 U/m L提高到535.47 U/m L,其他5种短... 碱性果胶酶(PGL)是一种重要的工业酶,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。作者将6种双亲短肽(SAP)融合至PGL N端,以期提高PGL在大肠杆菌中的分泌表达效率。得到一株高产菌株PGL-S1,胞外酶活由129.65 U/m L提高到535.47 U/m L,其他5种短肽则酶活降低。通过SDS-PAGE检测发现,PGL-S1的表达量并没有多大变化,推测可能是催化效率提高引起酶活提高。分析双亲短肽的疏水性指数发现,SAP1的疏水性不同于其他短肽,疏水性是蛋白质发生聚集的主要作用力,能够固定N、C末端,加强与底物的相互作用。推测PGL-S1融合蛋白的表面疏水性提高,促进了对底物的催化效率,具有巨大的工业应用潜力。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 双亲短肽 高效表达 疏水性指数 催化效率
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自组装双亲短肽氨基酸组成及连接肽对其融合酶表达量的影响 被引量：2
8
作者 赵伟欣 刘松 +2 位作者 刘立明 陈坚 堵国成 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1-6,共6页
自组装双亲短肽(self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布,具有自聚合效应的氨基酸短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。以自组装双亲短肽S1(AEAEAKAKAEAEAKAK)为出发序列,与来源... 自组装双亲短肽(self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布,具有自聚合效应的氨基酸短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。以自组装双亲短肽S1(AEAEAKAKAEAEAKAK)为出发序列,与来源于Bacillus sp.WSHB04-02的碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)组成的融合酶为模式蛋白,考察SAPs的氨基酸组成及SAPs融合蛋白内部连接肽(linker peptide)对PGL-SAP融合酶的表达量的影响。结果显示,含有较弱疏水性的甘氨酸和丙氨酸残基的PGL-S1突变体可使融合酶正常表达,其中,含有组氨酸的PGL-S1v1具有相对最高的胞外酶活,较野生型提高了9倍,较PGL-S1提高了1.5倍。连接肽方面,与刚性连接肽相比,含有柔性连接肽的融合酶具有更高的胞外酶活,含有(GGGGS)3的PGL-F-S1融合酶胞外酶活是野生型的14倍。上述结果表明,SAPs的氨基酸组成及融合蛋白之间的连接肽对PGL融合酶的表达具有重要影响。 展开更多
关键词 自组装双亲短肽 融合蛋白 连接肽 氨基酸极性 表达量 碱性果胶酶
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抗变异链球菌多肽的设计、筛选及抗菌效果评价 被引量：5
9
作者 梁东生 李焕影 +3 位作者 许晓虎 梁靖恒 戴杏竹 赵望泓 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期823-829,共7页
目的构建抗变异链球菌的低毒、高活性、快速的新型抗菌肽,并探讨其在防治龋病方面的潜能。方法根据两亲性正电性α-螺旋结构抗菌肽的设计理念,对乳酸杆菌拮抗变异链球菌的代谢产物reuterin 6和/或gassericin A进行活性改造,分别通过细... 目的构建抗变异链球菌的低毒、高活性、快速的新型抗菌肽,并探讨其在防治龋病方面的潜能。方法根据两亲性正电性α-螺旋结构抗菌肽的设计理念,对乳酸杆菌拮抗变异链球菌的代谢产物reuterin 6和/或gassericin A进行活性改造,分别通过细菌敏感性实验、细胞毒性实验和杀菌-时效实验来评估衍生肽的抗菌效果和生物相容性,再进一步检测目标抗菌肽抗变异链球菌的速率、抗多种口腔致病菌的活性和发展耐药菌株的能力。结果构建了6条AT-1衍生肽,并从中筛选出了低毒、高活性、快速的新型抗菌肽AT-7;具有高疏水性、不完美两亲性的AT-7抑制变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌和黏性放线菌等口腔致病菌的最小抑菌浓度是3.3μmol/L,在5 min内即可抑制88.7%的变异链球菌,以及连续诱导10代的处理仍不能产生耐AT-7的变异链球菌。结论疏水性和不完美两亲性都是决定抗菌肽的抗菌效果的重要因素;抗菌肽AT-7具有转化为口腔临床用药的潜力。 展开更多
关键词 抗菌肽 龋病 变异链球菌 抗菌活性 不完美两亲性
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阳离子双亲性多肽-脂质纳米粒子的构建及细胞毒性和体外稳定性
10
作者 王乔 费浩 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期142-150,共9页
选用阳离子双亲性R多肽(RLARLLRRLARWLR)进行脂质纳米粒子的构建.通过脂质乳浊液清除实验、色氨酸荧光光谱蓝移实验,对R多肽与脂质的重组过程和作用方式进行表征.通过透射电子显微镜观察、动态光散射、zeta电位检测,表征了所构建的阳离... 选用阳离子双亲性R多肽(RLARLLRRLARWLR)进行脂质纳米粒子的构建.通过脂质乳浊液清除实验、色氨酸荧光光谱蓝移实验,对R多肽与脂质的重组过程和作用方式进行表征.通过透射电子显微镜观察、动态光散射、zeta电位检测,表征了所构建的阳离子双亲性多肽-脂质纳米粒子(R peptide-lipid nanoparticle,R-LNP)的粒径和表面性质.通过MTT实验检测了R-LNP的细胞毒性;通过超高效液相色谱(ultra high performance liquid chromatography,UPLC)方法比较了R多肽和R-LNP抗酶解(糜蛋白酶、胰蛋白酶)的稳定性.结果表明,R多肽能促进脂质的重组,其疏水性部分嵌入脂质纳米粒子的疏水核心,形成粒径为(14.7±0.1)nm,zeta电位为17.8 mV的脂质纳米粒子.R-LNP对A549和MCF-7细胞的半抑制浓度为(5.93±0.75)和(4.36±0.40)μmol/L,保留R多肽细胞毒性作用,同时R-LNP有效提高了R多肽的稳定性,有助于多肽的体内应用. 展开更多
关键词 阳离子双亲性多肽 脂质纳米粒子 构建 功能
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