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s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位
被引量：
1
1
作者
宋忆淑
宋志宇
+2 位作者
费向东
贺冰
李玉新
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期39-41,共3页
目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s-...
目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s- lap/ GFP融合基因转入 Hela细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达。结果 :s- lap/ GFP重组质粒序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜显示 ,在转染 GFP基因的 Hela细胞中 ,荧光呈网状均匀分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染 s- lap/ GFP融合基因的 Hela细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 :s- lap/ GFP融合蛋白可在人 Hela细胞中表达 ,并主要定位于细胞核。
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关键词
s-lap/gfp
融合蛋白
重组融合蛋白质类/遗传学
基因融合/方法
HELA细胞
在线阅读
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职称材料
RPE细胞光损伤相关新基因s-lap编码区克隆及s-lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞中的表达与定位
被引量：
1
2
作者
宋忆淑
李玉新
+2 位作者
费向东
鲍永利
谭大鹏
《眼科新进展》
CAS
2005年第1期11-13,共3页
目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧...
目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧光蛋白的目的基因真核表达重组质粒 pcDNA3 .1 GFP/s lap ,转染B16黑色素瘤细胞 ,观察s lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。结果 s lapcDNA序列含有编码10 1个氨基酸的开放读码框架 ,有 2个可能的N 糖基化位点 ,1个可能的caseinkinaseII磷酸化位点和 2个可能的PKC磷酸化位点 ;成功地克隆了s lap蛋白编码区序列 ,构建了其真核表达载体 ,荧光显微镜观察 ,在转染 pcDNA3 .1 GFP质粒的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光呈网状分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染s lap/GFP融合基因的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 新基因s lap编码的蛋白质可在B16黑色素瘤细胞中获得表达 ,并以细胞核内高表达。
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关键词
s-lap
基因
克隆
s-lap/gfp
融合蛋白
基因表达
基因定位
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职称材料
题名
s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位
被引量：
1
1
作者
宋忆淑
宋志宇
费向东
贺冰
李玉新
机构
东北师范大学遗传与细胞研究所
吉林大学第一医院泌尿外科
吉林省长春市双阳区医院骨科
吉林大学第一医院眼科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期39-41,共3页
基金
中国博士后科学基金资助课题 (2 0 0 4 0 35 5 5 7)
吉林省科技厅自然科学基金资助课题 (2 0 0 30 5 4 1- 4 )
文摘
目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s- lap/ GFP融合基因转入 Hela细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达。结果 :s- lap/ GFP重组质粒序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜显示 ,在转染 GFP基因的 Hela细胞中 ,荧光呈网状均匀分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染 s- lap/ GFP融合基因的 Hela细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 :s- lap/ GFP融合蛋白可在人 Hela细胞中表达 ,并主要定位于细胞核。
关键词
s-lap/gfp
融合蛋白
重组融合蛋白质类/遗传学
基因融合/方法
HELA细胞
Keywords
s-lap/gfp
fusion protein
recobinant fusion proteins/genetics
gene fusion/methods
Hela cells
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
RPE细胞光损伤相关新基因s-lap编码区克隆及s-lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞中的表达与定位
被引量：
1
2
作者
宋忆淑
李玉新
费向东
鲍永利
谭大鹏
机构
东北师范大学遗传与细胞研究所
长春市双阳区医院
出处
《眼科新进展》
CAS
2005年第1期11-13,共3页
基金
中国博士后科学基金资助项目 (编号 :2 0 0 4 0 35557)
吉林省科技厅自然科学基金资助项目 (编号 :2 0 0 30 541 4)~~
文摘
目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧光蛋白的目的基因真核表达重组质粒 pcDNA3 .1 GFP/s lap ,转染B16黑色素瘤细胞 ,观察s lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。结果 s lapcDNA序列含有编码10 1个氨基酸的开放读码框架 ,有 2个可能的N 糖基化位点 ,1个可能的caseinkinaseII磷酸化位点和 2个可能的PKC磷酸化位点 ;成功地克隆了s lap蛋白编码区序列 ,构建了其真核表达载体 ,荧光显微镜观察 ,在转染 pcDNA3 .1 GFP质粒的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光呈网状分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染s lap/GFP融合基因的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 新基因s lap编码的蛋白质可在B16黑色素瘤细胞中获得表达 ,并以细胞核内高表达。
关键词
s-lap
基因
克隆
s-lap/gfp
融合蛋白
基因表达
基因定位
Keywords
s-lap
gene
clone
s-lap/gfp
fusion protein
gene expression
gene localization
分类号
R739.8 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位
宋忆淑
宋志宇
费向东
贺冰
李玉新
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
在线阅读
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职称材料
2
RPE细胞光损伤相关新基因s-lap编码区克隆及s-lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞中的表达与定位
宋忆淑
李玉新
费向东
鲍永利
谭大鹏
《眼科新进展》
CAS
2005
1
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