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聚乙二醇修饰重组人干扰素ω的过程优化 被引量:5
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作者 潘红春 刘红 +3 位作者 程永刚 彭力 徐波 杨红涛 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2876-2884,共9页
采用分子量20000直链单甲氧基PEG-琥珀酰亚胺琥珀酸酯(mPEG-SS)对毕赤酵母表达的重组人干扰素ω(rhIFNω)进行氨基化学修饰,以期获得抗原性降低及稳定性增加的单链PEG修饰产物(PEG-rhIFNω)。建立了PEG修饰rhIFNω的反应体系,考察了修... 采用分子量20000直链单甲氧基PEG-琥珀酰亚胺琥珀酸酯(mPEG-SS)对毕赤酵母表达的重组人干扰素ω(rhIFNω)进行氨基化学修饰,以期获得抗原性降低及稳定性增加的单链PEG修饰产物(PEG-rhIFNω)。建立了PEG修饰rhIFNω的反应体系,考察了修饰反应各因素对单修饰产物得率的影响,优化修饰工艺条件为:反应体系起始pH值8.5,rhIFNω/PEG摩尔比1∶7,rhIFNω浓度0.75 mg.ml-1,磷酸盐缓冲液浓度50mmol.L-1,于25℃振荡反应4 h,用30%冰醋酸终止反应。在优化条件下,单链PEG-rhIFNω含量和修饰率分别达到0.25 mg.ml-1和34.63%。纯化后的单链PEG-rhIFNω具有典型PEG修饰蛋白的特性,体外抗病毒活性保留了天然rhIFNω抗病毒活性的15%。 展开更多
关键词 重组人干扰素ω 聚乙二醇 过程优化 抗病毒活性
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单链PEG化重组人干扰素ω的结构和性能表征
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作者 潘红春 杨琴 +2 位作者 苏秋菊 刘丽 刘红 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期7-13,共7页
用紫外扫描光谱、MALDI-TOFMS等电聚焦电泳、毛细管电泳、圆二色光谱、肽图等手段对单链PEGrhIFNω的性能、组分和结构进行表征.结果表明,单链PEG-rhIFNω的最大紫外吸收波长未改变,为280.6nm;等电点由9.7下降到7.35~8.60;质... 用紫外扫描光谱、MALDI-TOFMS等电聚焦电泳、毛细管电泳、圆二色光谱、肽图等手段对单链PEGrhIFNω的性能、组分和结构进行表征.结果表明,单链PEG-rhIFNω的最大紫外吸收波长未改变,为280.6nm;等电点由9.7下降到7.35~8.60;质谱分析发现,单链PEG-rhIFNω中仍含有PEG多点修饰组分;圆二色光谱分析发现,单链PEG-rhIFNω二级结构中同时具有典型α螺旋和无规卷曲结构,而rhIFNm没有无规卷曲结构;毛细管电泳分析发现,单链PEG-rhIFNω含4种位置异构体.肽图分析推测,单链PEG-rhIFNω的PEG修饰位点应为Lys33或Lys167-和Lys46-或Lys52-或Lys152-残基. 展开更多
关键词 重组人干扰素ω 聚乙二醇化 二级结构 位置异构体 肽图
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