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PTHrP促进RANKL诱导巨噬细胞分化为破骨细胞参与中耳胆脂瘤骨破坏 被引量:1
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作者 谢淑敏 金丽 +4 位作者 符金凤 袁秋林 殷团芳 任基浩 刘伟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期655-666,共12页
目的:骨质进行性吸收破坏是中耳胆脂瘤最重要的临床特征之一,可导致一系列颅内外并发症,而目前中耳胆脂瘤骨破坏的机制尚未明确。本研究旨在探究甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)参与中耳胆脂瘤骨破坏... 目的:骨质进行性吸收破坏是中耳胆脂瘤最重要的临床特征之一,可导致一系列颅内外并发症,而目前中耳胆脂瘤骨破坏的机制尚未明确。本研究旨在探究甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)参与中耳胆脂瘤骨破坏的机制。方法:收集后天性中耳胆脂瘤患者的25例胆脂瘤标本和13例外耳道正常皮肤组织标本。采用免疫组织化学染色方法检测PTHrP、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)在中耳胆脂瘤和外耳道正常皮肤组织中的表达,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色法检测中耳胆脂瘤和外耳道正常皮肤组织中是否存在TRAP阳性多核巨噬细胞。选取小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞进行干预,分为RANKL干预组和PTHrP+RANKL共同干预组,采用TRAP染色法检测2组破骨细胞的生成情况,实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测干预后2组破骨细胞相关基因TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)和活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T cell cytoplasmic 1,NFATc1)的mRNA表达水平,骨吸收陷窝实验检测2组破骨细胞的骨吸收功能。结果:免疫组织化学染色结果显示,PTHrP和RANKL在中耳胆脂瘤组织中的表达均显著增高,OPG表达降低(均P<0.05),且PTHrP的表达与RANKL、RANKL/OPG比值均呈显著正相关,与OPG表达呈显著负相关(分别r=0.385、r=0.417、r=-0.316,均P<0.05)。同时,PTHrP、RANKL的表达水平与中耳胆脂瘤的骨破坏程度均呈显著正相关(分别r=0.413、r=0.505,均P<0.05)。TRAP染色结果显示中耳胆脂瘤上皮周围基质中有大量TRAP阳性细胞,并存在细胞核数量为3个或3个以上的TRAP阳性破骨细胞。RANKL或PTHrP+RANKL联合干预5 d后,与RANKL干预组相比,PTHrP+RANKL联合干预组的破骨细胞数量显著增加(P<0.05),且破骨细胞相关基因TRAP、CTSK和NFATc1的mRNA表达水平均升高(均P<0.05)。骨吸收陷窝扫描电镜结果显示RANKL干预组、PTHrP+RANKL联合干预组的骨片表面均形成骨吸收陷窝;与RANKL干预组相比,PTHrP+RANKL联合干预组的骨片表面骨吸收陷窝数量显著增加(P<0.05),面积也更大。结论:PTHrP可能通过促进RANKL诱导胆脂瘤组织周围基质中的巨噬细胞分化为破骨细胞,参与中耳胆脂瘤骨破坏。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素相关蛋白 中耳胆脂瘤 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 破骨细胞 巨噬细胞
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局部注射不同剂量抗RANKL抗体对大鼠牙槽骨骨质疏松的影响
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作者 周静 张婧 +3 位作者 王璐 马玲 苏静洋 张钊 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期687-692,共6页
目的:探究局部注射抗核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)抗体对大鼠牙槽骨骨质疏松的影响及不同剂量间的比较研究。方法:采用SD大鼠30只(对照组9只,实验组21只),通过皮下注射地塞... 目的:探究局部注射抗核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)抗体对大鼠牙槽骨骨质疏松的影响及不同剂量间的比较研究。方法:采用SD大鼠30只(对照组9只,实验组21只),通过皮下注射地塞米松建立大鼠牙槽骨骨质疏松模型,建模5周后进行模型验证,模型验证成功后,将实验组随机分为3组;实验组Ⅱ、Ⅲ于1、3、7 d在大鼠右上第一磨牙腭侧黏骨膜下注射兔抗大鼠RANKL抗体0.1μg/位点和1μg/位点,实验组Ⅰ注射等体积生理盐水。1周后处死取材,采用微计算机断层扫描技术(micro computed tomography,Micro-CT)测量右上第一磨牙区牙槽骨骨密度(bone mineral density,BMD)、骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV);牙槽骨组织病理学染色观察组织形态学改变及破骨细胞数目变化;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测牙龈中RANKL/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)比值变化。结果:成功建立大鼠牙槽骨骨质疏松模型。Micro-CT和组织病理学结果显示,注射RANKL抗体后,牙槽骨BMD、BV/TV增加,破骨细胞数目减少,成骨细胞活跃,骨髓腔减小,但高、低剂量抗体相比变化不显著;ELISA结果显示,注射高剂量抗体后牙龈中RANKL/OPG比值显著降低,注射低剂量抗体后RANKL/OPG比值虽降低,但变化不显著。结论:局部注射抗RANKL抗体可以改善大鼠牙槽骨骨质疏松,低剂量即可达到改善效果。 展开更多
关键词 核因子κB受体活化因子配体抑制剂 抗核因子κB受体活化因子配体抗体 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 牙槽骨骨质疏松
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RANK-RANKL-OPG信号通路在骨重建中的分子作用机制 被引量:14
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作者 李雪 周延民 +3 位作者 马珊珊 马遥 郭天奇 徐昭南 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期659-662,共4页
骨是动态的活性组织,通过由骨吸收和骨形成所组成的骨重建来维持自身的平衡及结构的完整性。核因子kB受体活化因子--kB受体活化因子配体--骨保护蛋白通路是骨吸收和骨形成发生耦联的关键通路,其对于维持骨重建的平衡、成骨细胞的分化以... 骨是动态的活性组织,通过由骨吸收和骨形成所组成的骨重建来维持自身的平衡及结构的完整性。核因子kB受体活化因子--kB受体活化因子配体--骨保护蛋白通路是骨吸收和骨形成发生耦联的关键通路,其对于维持骨重建的平衡、成骨细胞的分化以及调控破骨细胞生成等过程起着重要的作用。此外,此通路的深入研究对于骨质疏松症、心血管疾病的临床治疗具有重要的指导意义。本文就RANK-RANKL-OPG信号通路在骨发生和吸收中的分子作用机制作一综述。 展开更多
关键词 核因子kb受体活化因子 kb受体活化因子配体 骨保护素 骨重建 破骨细胞
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淫羊藿对激素性股骨头坏死骨组织OPG/RANKL mRNA表达的影响 被引量:34
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作者 王建忠 高鸿雁 +4 位作者 王坤正 周荣兴 李晓东 郭军 吕慧成 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1714-1717,共4页
目的观察糖皮质激素对大鼠股骨头骨组织中骨保护素(OPG)/核因子kappa B受体活化因子配基(RANKL)mRNA表达的影响及淫羊藿的拮抗作用,探讨淫羊藿预防激素性股骨头坏死的作用效果及其作用机制。方法健康SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为激素... 目的观察糖皮质激素对大鼠股骨头骨组织中骨保护素(OPG)/核因子kappa B受体活化因子配基(RANKL)mRNA表达的影响及淫羊藿的拮抗作用,探讨淫羊藿预防激素性股骨头坏死的作用效果及其作用机制。方法健康SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为激素组、淫羊藿组和对照组,每组16只。激素组和淫羊藿组每只给予肌肉注射醋酸泼尼松龙12.5mg/kg,2次/周,淫羊藿组同时给予淫羊藿提取液1 ml/100 g(相当于0.1 g/ml生药)灌胃,而激素组用生理盐水代替淫羊藿灌胃,1次/d;对照组用生理盐水代替激素和淫羊藿以同样方式肌注和灌胃。4周后取左侧股骨头骨组织石蜡包埋,HE染色,鉴定股骨头坏死情况;取右侧股骨头骨组织提取总RNA,采用实时定量聚合酶链反应技术检测OPG和RANKLmRNA表达水平,计算出OPG/RANKL比值。结果激素组、淫羊藿组、对照组大鼠出现股骨头坏死表现比例分别为71.43%(10/14)、26.67%(4/15)、0(0/16);激素组、淫羊藿组、对照组OPG mRNA表达分别为1.13±0.32、1.47±0.42和1.51±0.43;RANKL mRNA表达分别为2.70±1.24、1.82±0.46和1.55±0.42。激素组OPG和OPG/RANKL比值低于淫羊藿和对照组,而RANKL表达高于淫羊藿组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。淫羊藿组与对照组比较,差异无统计学意义。结论淫羊藿预防激素性股骨头坏死可能与其拮抗皮质激素导致的OPG/RANKL mRNA表达异常有关。 展开更多
关键词 淫羊藿 糖皮质激素 股骨头 骨坏死 骨保护素 核因子kappaB受体活化因子配基
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淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径调节骨吸收的机理研究 被引量:22
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作者 马小妮 葛宝丰 +6 位作者 陈克明 周建 王嘉琪 郭晓宇 宋鹏 吕享 成魁 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-5,共5页
目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细... 目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细胞的纯度达到95%以上。OPG基因和蛋白表达水平在24 h时明显升高,与对照相比有显著差异。OPG和RANKL的比值显著高于对照组。结论淫羊藿苷主要通过提高OPG及OPG和RANKL的比值来发挥抑制骨吸收的作用。 展开更多
关键词 大鼠骨髓基质干细胞 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 淫羊藿苷
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OPG/RANKL/RANK系统参与牙槽骨吸收及重建过程作用初探 被引量:9
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作者 陈莉丽 黄玫 +1 位作者 雷利红 吴燕岷 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期288-292,共5页
目的初步探讨护骨素OPG、核因子κB受体活化因子配体RANKL、核因子κB活化因子RANK在牙周炎牙槽骨吸收及骨重建过程中的作用。方法对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7实验组进行体外诱导培养,对照组为完全培养基培养;小鼠成骨样细... 目的初步探讨护骨素OPG、核因子κB受体活化因子配体RANKL、核因子κB活化因子RANK在牙周炎牙槽骨吸收及骨重建过程中的作用。方法对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7实验组进行体外诱导培养,对照组为完全培养基培养;小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1实验组采用前期实验收集的骨吸收上清处理,对照组采用完全培养基培养;以免疫荧光等方法检测细胞OPG、RANKL、RANK的表达。30只8周龄雄性SD大鼠建立实验性牙槽骨吸收模型,研究其吸收重建规律。以免疫组化S-P法检测OPG、RANKL、RANK的表达情况。结果实验组MC3T3-E细胞经骨吸收上清处理7 d后,OPG蛋白平均荧光强度为(29.636±5.652),对照组为(15.568±1.229),表达显著上调(P<0.01);但实验组RANKL蛋白平均荧光强度为(6.806±1.738),对照组为(18.082±2.732),表达被显著抑制(P<0.01),OPG/RANKL比值在上清处理后高于对照组(P<0.05)。采用大肠杆菌内毒素E-LPS注射法成功制备大鼠牙槽骨吸收模型。在牙槽骨吸收区域OPG水平较无骨吸收区域有所降低,RANKL的表达则相反。结论 OPG、RANKL、RANK参与了大鼠实验性骨吸收活动;破骨细胞骨吸收上清可能通过改变OPG与RANKL的比值,从而影响骨重建中骨形成与骨吸收的动态平衡。 展开更多
关键词 成骨细胞 破骨细胞 护骨素 核因子ΚB受体活化因子配体 核因子κB活化因子 牙周炎动物模型
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姜黄素对佐剂性关节炎大鼠滑膜OPG和RANKL蛋白表达的影响 被引量:18
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作者 邱艳 商玮 +3 位作者 赵智明 郭郡浩 蔡辉 赵凌杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1490-1493,1498,共5页
目的:通过观察姜黄素对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)模型大鼠滑膜病理、滑膜骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)表达的影响,探讨其防治类风... 目的:通过观察姜黄素对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)模型大鼠滑膜病理、滑膜骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)可能作用机制。方法:雄性SD大鼠以弗氏完全佐剂造模,分为模型组与姜黄素组,另有正常组,d 28处死所有大鼠行滑膜常规病理HE染色,并用Western blot法来检测滑膜RANKL、OPG蛋白的表达。结果:模型组大鼠滑膜炎性细胞浸润、纤维细胞及滑膜细胞的增生较正常组均明显增加(P<0.01),而姜黄素组的大鼠滑膜组织病理较模型组显著改善(P<0.01);姜黄素组大鼠的滑膜RANKL表达显著低于模型组,滑膜OPG表达显著高于模型组,RANKL/OPG比值显著低于模型组(P<0.01)。结论:姜黄素不仅改善AA大鼠关节滑膜病理学损伤,还可调节滑膜RANKL/OPG的比值。因此姜黄素可能通过调节OPG/RANKL系统来发挥对AA大鼠的治疗作用。 展开更多
关键词 姜黄素 佐剂性关节炎 骨保护素 核因子ΚB受体活化因子配体
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类风湿性关节炎患者外周血T细胞RANKL增加且血清Dickkopf1降低 被引量:7
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作者 陈林 李立新 +5 位作者 黄卓春 牛倩 黄凤誉 张君龙 杨滨 王兰兰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期373-377,共5页
目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基... 目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基末端肽(CTX)水平。采用液相悬浮芯片法检测Wnt抑制因子Dickkopf1(DKK1)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)含量。利用流式细胞术检测外周血T细胞上RANKL的水平。结果与健康对照组相比,RA患者血清中OC-N-MID、CTX含量无显著性差异,RANKL水平升高,DKK1水平降低。RA患者外周血T细胞上RANKL水平增加,尤其CD3+T细胞亚群上RANKL增加显著。结论 RA患者T细胞上RANKL水平增加,血清中RANKL含量升高,DKK1水平降低。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 骨代谢 Dickkopf1(DKK1) 核因子κB受体激活蛋白配体(rankl)
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血清RANKL、OPG联合MRI在早期RA诊断与骨关节损伤中的价值 被引量:11
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作者 彭丽萍 徐胜前 +4 位作者 齐姗 吴颖 刘文 肖会 徐建华 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第2期272-276,共5页
目的探讨血清核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和护骨素(OPG)水平联合MRI在早期类风湿关节炎(RA)诊断和骨关节损伤中的价值。方法收集RA患者232例,其中早期RA(病程≤1年)111例,非早期RA(病程>1年)121例,选择121例正常人为对照组。... 目的探讨血清核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和护骨素(OPG)水平联合MRI在早期类风湿关节炎(RA)诊断和骨关节损伤中的价值。方法收集RA患者232例,其中早期RA(病程≤1年)111例,非早期RA(病程>1年)121例,选择121例正常人为对照组。详细记录RA患者各临床及实验室指标,采用双能X线骨密度仪测定其股骨区和腰椎部位的骨密度(BMD)。所有RA患者摄双手X线并进行Sharp评分,早期RA患者行双手MRI检查并进行RAMRIS积分。采用ELISA法检测RA患者和正常人外周血RANKL、OPG水平。结果 1对照组、早期RA组、非早期RA组血清OPG、RANKL水平差异有统计学意义(P<0.05);2对照组、早期RA组、非早期RA组在股骨区和腰椎的BMD差异有统计学意义(P<0.000 1),3组骨质疏松的发生率分别为13.92%、23.39%、35.69%(χ2=42.137,P<0.000 1)。3早期RA患者MRI上骨侵蚀、骨髓水肿、滑膜炎、肌腱炎的阳性率分别为89.19%、56.76%、83.78%、29.73%;MRI各指标之间相关分析显示:肌腱炎与骨髓水肿(r=0.391,P<0.05)、滑膜炎(r=0.330,P<0.05)呈正相关。4早期RA组MRI各指标与OPG、RANKL、RANKL/OPG比值间无相关性;早期RA组MRI骨侵蚀评分与大转子和总股骨区的BMD呈负相关(P<0.05),与Sharp评分呈正相关(P<0.05);MRI肌腱炎评分与关节肿胀数、关节压痛数、C反应蛋白(CRP)呈正相关(P<0.05)。5血清OPG水平与多项临床和实验室指标呈正相关(P<0.05);血清RANKL水平与各部位BMD、临床指标、Sharp评分无相关性。结论 RA中MRI的阳性率高于X线,RAMRIS评分异常在早期RA诊断中具有较好的诊断价值,单项以骨侵蚀阳性率最高,且与BMD及Sharp评分有相关性;双手MRI表现联合血清OPG、RANKL异常改变能提高早期RA的诊断率。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 核因子-ΚB受体活化因子配体 护骨素 磁共振 骨质疏松
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失神经支配兔下颌骨骨折愈合过程中CGRP对OPG/RANKL表达的影响 被引量:18
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作者 徐琳 谭颖徽 +1 位作者 王建华 张纲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期988-990,共3页
目的 明了失神经支配兔下颌骨骨折愈合过程中CGRP对OPG/RANKL表达的影响及其调节骨折愈合的机制。方法 40只新西兰白兔随机分为:单纯下颌骨骨折组及下齿槽神经离断+下颌骨骨折组。分别于骨折术后7、14、2 1、2 8d处死,取骨痂标本行HE... 目的 明了失神经支配兔下颌骨骨折愈合过程中CGRP对OPG/RANKL表达的影响及其调节骨折愈合的机制。方法 40只新西兰白兔随机分为:单纯下颌骨骨折组及下齿槽神经离断+下颌骨骨折组。分别于骨折术后7、14、2 1、2 8d处死,取骨痂标本行HE及免疫组织化学染色。结果 单纯骨折组骨折后7d骨痂中即可见到降钙素基因相关肽(CGRP)阳性神经纤维,沿血管分布,14、2 1d在编织骨边缘有大量的CGRP阳性神经纤维,2 8d仍较多。同时骨折后7d骨保护素(OPG)强阳性表达,以后逐渐下降,但均保持较高水平的表达。破骨细胞分化因子(RANKL)的表达高峰则在骨折后第14天;而失神经骨折组除7d骨痂中见CGRP阳性表达外,7d后骨痂中仅有极低水平的CGRP表达。同样,OPG在骨折后7d在骨痂中阳性表达以后持续弱阳性表达。RANKL则持续强阳性表达。结论 在骨折愈合过程中,CGRP能够上调OPG/RANKL的表达量的比值,从而参与骨折愈合过程的调节,失神经支配失去了CGRP对OPG/RANKL表达的调节作用,不利于骨折愈合。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽(CGRP) 骨保护素(OPG) 破骨细胞分化因子(rankl)失神经支配 下颌骨骨折
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清络通痹颗粒对RA患者外周血T淋巴细胞表达RANKL的影响 被引量:5
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作者 周学平 周玲玲 +2 位作者 贾敏 王明艳 陆燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1088-1090,1099,共4页
目的:观察清络通痹颗粒(QLT)对类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞表达破骨细胞分化因子(RANKL)的影响。方法:采用流式细胞术检测RA患者及健康志愿者外周血T淋巴细胞表达RANKL情况;同时检测了添加清络通痹颗粒含药血清后RA患者外周血... 目的:观察清络通痹颗粒(QLT)对类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞表达破骨细胞分化因子(RANKL)的影响。方法:采用流式细胞术检测RA患者及健康志愿者外周血T淋巴细胞表达RANKL情况;同时检测了添加清络通痹颗粒含药血清后RA患者外周血T淋巴细胞表达RANKL的水平。结果:活动期RA患者外周血T淋巴细胞RANKL表达率显著高于健康者(P<0.01);添加清络通痹颗粒含药血清后RA患者外周血T淋巴细胞RANKL表达的水平明显下降(P<0.05或<0.01)。结论:清络通痹颗粒有可能通过下调T淋巴细胞RANKL的表达,从而抑制破骨细胞(OC)的分化。 展开更多
关键词 清络通痹颗粒 类风湿关节炎 rankl 流式细胞术
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LC调节人成骨样MG-63细胞表达OPG、RANKL分子机制的研究 被引量:4
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作者 祁琳 张鹏 +4 位作者 屈野 王文良 毛立群 王越 李灵芝 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期125-130,共6页
目的探讨大黄酸哌嗪雌酚酮(rhein-piperizinyl-estrone,命名为LC)调节人成骨样MG-63细胞表达骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB激活受体配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的分子机制。方法在原工作基础上,选择兼有... 目的探讨大黄酸哌嗪雌酚酮(rhein-piperizinyl-estrone,命名为LC)调节人成骨样MG-63细胞表达骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB激活受体配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的分子机制。方法在原工作基础上,选择兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,采用RT-PCR、免疫印迹及小RNA干扰等技术,探讨LC对人成骨细胞产生的骨吸收调节因子OPG、RANKL表达的作用及作用机制。结果 LC可上调MG-63细胞OPG表达及下调RANKL表达,该作用可被纯ER阻断剂ICI 182,780完全阻断,应用小RNA干扰技术进一步证实LC对成骨细胞OPG、RANKL表达的调节作用主要是由ERα介导的。结论 LC调节成骨细胞表达OPG、RANKL是经ER途径、主要是由ERα介导的。 展开更多
关键词 大黄酸哌嗪雌酚酮(LC) 成骨细胞 骨保护素(OPG) NF-κB激活受体配体(rankl) 雌激素受体(ER)
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长期应用糖皮质激素对大鼠骨组织中HMGB1、RAGE、OPG和RANKL表达的影响 被引量:8
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作者 张彦秋 王春生 +1 位作者 王坤正 蒋朝龙 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期907-913,I0002,共8页
目的:观察长期应用糖皮质激素(GC)对大鼠骨组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖化终产物受体(RAGE)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨其导致激素性骨质疏松症的相关机制。方法:将48只健康成年SD大... 目的:观察长期应用糖皮质激素(GC)对大鼠骨组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖化终产物受体(RAGE)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨其导致激素性骨质疏松症的相关机制。方法:将48只健康成年SD大鼠随机分为低、中、高剂量GC组和对照组,每组12只。低、中、高剂量GC组大鼠分别给予肌肉注射醋酸泼尼松龙7.0、12.5、25.0mg·kg-1,对照组大鼠同时给予相同部位注射等量生理盐水。所有大鼠每周注射2次,干预4周后取材。ELISA法检测大鼠血清中HMGB1、OPG和RANKL水平,HE染色检测大鼠骨组织病理形态学,免疫组织化学和Western blotting法检测大鼠骨组织中HMGB1、RAGE、OPG和RANKL蛋白的表达水平。结果 :ELISA检测,各剂量GC组大鼠血清中HMGB1水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);OPG水平均较对照组降低,且随GC剂量增加OPG水平呈下降趋势,其中高剂量GC组与对照组和低、中剂量GC组OPG水平比较差异有统计学意义(P<0.05);各剂量GC组大鼠血清中RANKL水平均较对照组升高,且随GC剂量增加呈上升趋势,其中高剂量GC组与对照组和低、中剂量GC组RANKL水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色,低剂量GC组大鼠股骨组织接近正常骨组织,中剂量GC组大鼠股骨组织镜下见软骨下区出现骨小梁变细,骨小梁间隙内出现肉芽纤维组织,可见坏死骨细胞及空骨陷窝;高剂量GC组大鼠股骨组织骨小梁紊乱并存在骨折,脂肪细胞空泡变性,骨髓腔水肿,造血细胞稀少,骨小梁周边成骨细胞数量减少,多核破骨细胞增多。免疫组织化学和Western blotting法检测,各剂量GC组大鼠骨组织中HMGB1蛋白表达水平均较对照组明显升高(P<0.05),各剂量GC组大鼠HMGB1蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05);各组大鼠骨组织中RAGE蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);各剂量GC组大鼠骨组织中OPG蛋白表达水平均较对照组明显降低(P<0.05),各剂量GC组大鼠OPG蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05);中和高剂量GC组大鼠骨组织中RANKL蛋白表达水平均较对照组明显升高(P<0.05),中剂量GC组大鼠骨组织中RANKL表达低于高剂量组(P<0.05)。结论:大鼠使用过量GC后,骨组织中HMGB1水平升高,OPG/RANKL比例降低,这可能是激素性骨质疏松症的发病机制之一。 展开更多
关键词 糖皮质激素 高迁移率族蛋白B1 晚期糖化终产物受体 骨保护素 核因子KAPPA B受体活化因子配体
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阿仑膦酸盐对成骨细胞相关基因RANKL、OPG表达的影响 被引量:5
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作者 董伟 戚孟春 +3 位作者 邓久鹏 陈洪伟 冯晓洁 廖囡囡 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1695-1698,共4页
目的研究阿仑膦酸盐(ALN)对体外培养小鼠成骨细胞相关基因OPG、RANKL表达的影响。方法体外培养小鼠成骨细胞,应用碱性磷酸酶染色(ALP)检测成骨细胞ALP染色情况,免疫荧光化学检测成骨细胞RANKL、OPG表达。将第二代成骨细胞分为A、B、C、D... 目的研究阿仑膦酸盐(ALN)对体外培养小鼠成骨细胞相关基因OPG、RANKL表达的影响。方法体外培养小鼠成骨细胞,应用碱性磷酸酶染色(ALP)检测成骨细胞ALP染色情况,免疫荧光化学检测成骨细胞RANKL、OPG表达。将第二代成骨细胞分为A、B、C、D、E五组。A组(对照组),用DMEM培养基培养;B、C、D、E组除加入上述培养基外,加入不同浓度ALN,分别为:B组,加入10-4mol/L ALN;C组,加入10-5mol/L ALN;D组,加入10-6mol/L ALN;E组,加入10-7mol/L ALN。培养48 h后应用Real time PCR、Western blot检测各组成骨细胞基因RANKL、OPG表达情况。结果成骨细胞ALP染色呈阳性,免疫荧光化学检测RANKL、OPG表达阳性。Real time PCR、Western Blot检测各组OPG、RANKL mRNA及蛋白表达水平与ALN浓度密切相关,10-4mol/L ALN时OPG、RANKL表达最低,10-7-10-5mol/L ALN时OPG、RANKL表达依次增高,10-5mol/L ALN时表达量最高。结论 ALN对小鼠成骨细胞RANKL、OPG的表达产生作用:10-4mol/L时明显抑制成骨细胞RANKL、OPG的表达;浓度10-5、10-6、10-7mol/L ALN促进成骨细胞RANKL、OPG的表达,其中10-5mol/L ALN促进作用最强。 展开更多
关键词 成骨细胞 阿仑膦酸盐 碱性磷酸酶 核因子κB受体激动剂配体 骨保护素
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小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)活性区cDNA在毕赤酵母中分泌型表达 被引量:4
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作者 王宝利 郭刚 +3 位作者 梁东春 赵学勤 张镜宇 邱明才 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期451-456,共6页
由小鼠骨组织提取总RNA ,采用RT PCR扩增得到小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)活性区域cDNA .将该cDNA片段克隆入表达载体pPIC9,重组载体转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞 ,筛选Mut+表型 ,经甲醇诱导实现目的基因的分泌型表达 .Tricine... 由小鼠骨组织提取总RNA ,采用RT PCR扩增得到小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)活性区域cDNA .将该cDNA片段克隆入表达载体pPIC9,重组载体转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞 ,筛选Mut+表型 ,经甲醇诱导实现目的基因的分泌型表达 .Tricine SDS PAGE显示 ,表达产物约 2 6kD ,经Western印迹鉴定 ,表达产物可被RANKL抗体识别 .采用硫酸铵盐析、CM SephadexC 2 5层析纯化重组蛋白 .经测定 ,发酵液上清重组蛋白表达量约 11mg L .采用破骨细胞样细胞(osteoclastlikecell,OLC)诱导分化实验检测重组蛋白的生物活性 ,证实该重组蛋白可以促进OLC的生成 。 展开更多
关键词 小鼠 核因子kb受体活化因子配基 活性区 CDNA 毕赤酵母 分泌型表达
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人健康和炎性牙槽骨成骨细胞COX-2、PGE2、OPG,RANKL的表达 被引量:8
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作者 钱毅 乔文静 +3 位作者 马叶华 武岐山 刘国霞 刘琪 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期529-533,共5页
目的:初步探讨COX-2、PGE2、OPG和RANKL在牙周炎发病机制中所起的作用及其相互关系。方法:采用组织块法对人健康和牙周炎性牙槽骨进行体外培养和传代,加入含100μg/LrhOPG的不含胎牛血清的DMEM2mL。严格按照ELISA试剂盒说明进行操作,获... 目的:初步探讨COX-2、PGE2、OPG和RANKL在牙周炎发病机制中所起的作用及其相互关系。方法:采用组织块法对人健康和牙周炎性牙槽骨进行体外培养和传代,加入含100μg/LrhOPG的不含胎牛血清的DMEM2mL。严格按照ELISA试剂盒说明进行操作,获得各指标的检测数值。结果:牙周炎组RANKL、PGE2、COX-2的表达较健康组明显增高,OPG的表达较健康组明显降低。加入rhOPG后,牙周炎组RANKL、PGE2、COX-2的表达明显降低;OPG表达明显增加。健康组RANKL、PGE2、COX-2表达明显降低;OPG表达增加。结论:RANKL、PGE2、COX-2可促进牙周炎的发生、发展,而OPG对牙周炎的发生、发展可起抑制作用,同时表明人工重组OPG可能协同其内源性OPG来共同抑制RANKL、PGE2、COX-2的活性。 展开更多
关键词 人牙槽骨成骨细胞 核因子κB受体活化子 骨保护素 前列腺素E2 环氧酶-2
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RANKL、OPG在初发系统性红斑狼疮患者中的表达及意义 被引量:7
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作者 郑一君 胡大伟 +3 位作者 陈顺乐 鲍春德 敖文 袁敏 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2009年第1期36-39,共4页
目的研究初发系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血淋巴细胞中细胞核因子-κB受体激活剂配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)、护骨素(osteoprotegerin,OPG)基因mRNA的... 目的研究初发系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血淋巴细胞中细胞核因子-κB受体激活剂配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)、护骨素(osteoprotegerin,OPG)基因mRNA的表达情况,探讨其表达水平与初发SLE患者骨质疏松的关系。方法选择初发SLE患者45例及正常对照42例,运用实时定量PCR方法检测患者外周血淋巴细胞RANKL、OPG的mRNA表达水平。采用双能X线骨密度仪分别检测患者腰椎(L1-4)和股骨近端2个部位的骨密度,单因素分析RANKL、OPG基因mRNA表达水平与SLE患者骨密度的关系。结果SLE患者RANKL、OPG基因mRNA表达水平较正常对照组明显减低(P〈0.01);SLE患者2个部位的骨密度均低于正常对照组(P〈0.05),骨量异常发生率为28-89%,骨量异常降低的SLE患者OPG基因mRNA的表达水平比骨量正常的患者显著降低,两者间的差异有统计学意义(P〈0.01);而RANKL基因mRNA表达水平的差异无统计学意义(P〉0.05);OPG基因mRNA表达水平与初发SLE患者骨密度间存在正相关(r=0.461;P=0.001),即OPG表达水平越低,骨量减少越明显;而RANKL基因mRNA表达降低与初发SLE患者骨密度无明显相关性(r=-0.189,P=0.214);初发SLE患者疾病活动度与骨量减少、RANKL及OPG基因表达水平间不存在相关性(r=0.293,P=0.138;r=-0.099,P=0.493;,=0.138,P=0.493)。结论初发SLE患者骨量减少的发病率较正常人群增高,并且初发SLE患者体内RANKL和OPG基因表达存在异常;其中OPG表达水平的降低可能与初发SLE患者的骨量减少有密切关系。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 护骨素 细胞核因子-κB受体活化因子配体 骨密度 荧光实时定量聚合酶链反应
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黄芩苷对人牙周膜细胞RANKL-OPG表达的影响及其作用机制 被引量:4
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作者 陈悦 吴织芬 杨连甲 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期492-497,共6页
目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默... 目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默,继而将转染与未转染靶向性TGF-βⅡR基因沉默的T细胞和正常人牙周膜成纤维细胞置于加有黄芩苷和内毒素的培养基中,分为6组:①正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞+黄芩苷;②正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞;③正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞+黄芩苷;④正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞;⑤正常牙周膜成纤维细胞+黄芩苷;⑥正常牙周膜成纤维细胞。共培养48h,RT-PCR检测牙周膜细胞RANKL和OPG的表达,计算RANKL/OPG比值。结果①酶切鉴定正确的克隆测序结果与设计的目的序列完全一致;②转染siRNA1的T细胞组的TGF-βⅡRmRNA的表达被明显抑制;③RANKL/OPG的比值在各组间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了TGF-βⅡR靶向siRNA真核表达载体并成功转染T细胞;黄芩苷可以降低牙周膜细胞表面RANKL/OPG比值;TGF-β的信号传导在黄芩苷影响牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG表达过程中起着重要作用;黄芩苷并非只通过TGF-β信号传导通路,而是亦通过其他通路对牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG进行调控。 展开更多
关键词 转化生长因子βⅡ型受体 小干扰RNA 核因子-κB受体激活物配基 骨保护素 牙周膜成纤维细胞
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去卵巢大鼠骨代谢及骨髓细胞OPG、RANKL基因表达的实验研究 被引量:5
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作者 魏劲松 王键 +1 位作者 龚颜 曾荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期207-211,共5页
目的观察去卵巢大鼠血清I型原胶原C-端前肽(PICP)、骨钙素(BGP)和I型胶原交联羧基末端肽(ICTP)的变化,以及骨髓细胞骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的基因表达变化。方法取3月龄雌性SD大鼠16只,随机分2组:假手术对照... 目的观察去卵巢大鼠血清I型原胶原C-端前肽(PICP)、骨钙素(BGP)和I型胶原交联羧基末端肽(ICTP)的变化,以及骨髓细胞骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的基因表达变化。方法取3月龄雌性SD大鼠16只,随机分2组:假手术对照组(8只)和假手术组(8只)。采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松大鼠模型。术后12周,应用双能X线吸收仪法(DXA)测骨密度,ELISA法测量血清PICP、BGP及ICTP浓度,qRT-PCR法半定量骨髓细胞OPG和RANKL mRNA表达量。结果与假手术组比较,大鼠去卵巢12周后腰椎和股骨骨密度下降显著(P<0.01);血清PICP、BGP和ICTP含量显著升高(P<0.01);骨髓细胞RANKL的mRNA表达量增加(P<0.05)且OPG/RANKL的比率降低(P<0.01),而两者OPG的mRNA表达量无显著性差别(P>0.05)。结论去卵巢12周后的大鼠表现出高骨转换率的特点。OPG/RANKL/RANK系统失衡可能在以破骨细胞功能亢进为特点的骨代谢中起重要作用。 展开更多
关键词 去卵巢大鼠 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 骨代谢
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降钙素基因相关肽对兔成骨细胞OPG/RANKLmRNA表达的影响 被引量:14
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作者 徐琳 谭颖徽 何海涛 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期396-399,共4页
目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对成骨细胞核因子- κB受体活化因子配体(RANKL)及其饵受体骨保护素(OPG)基因表达的影响,了解CGRP在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法:将体外培养的兔成骨细胞用不同浓度的CGRP处理24h,通... 目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对成骨细胞核因子- κB受体活化因子配体(RANKL)及其饵受体骨保护素(OPG)基因表达的影响,了解CGRP在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法:将体外培养的兔成骨细胞用不同浓度的CGRP处理24h,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)来观察成骨细胞两种目的基因(OPG, RANKL)的mRNA表达强度变化。结果:CGRP呈剂量依赖性的刺激成骨细胞OPGmRNA表达,同时亦下调RANKLmRNA表达。结论:CGRP通过调节成骨细胞OPG/RANKL的比值可间接地调节破骨细胞活性,从而影响骨代谢。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 成骨细胞 破骨细胞 骨保护素 破骨细胞分化因子
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