应用SYBR Green I染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到沙门氏菌fimI基因特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,通过熔解曲线可知其熔点值约为85.6℃,而对其他非沙门氏菌则检测不到荧光信号。建立了一种肉品中的沙门氏菌Real-time PCR...应用SYBR Green I染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到沙门氏菌fimI基因特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,通过熔解曲线可知其熔点值约为85.6℃,而对其他非沙门氏菌则检测不到荧光信号。建立了一种肉品中的沙门氏菌Real-time PCR检测方法,用该方法检测市售牛肉、香肠中的沙门氏菌,其检测灵敏度分别为13,12 cfu/25 g,从样品的处理到得出检验结果可以在10 h内完成。该检测方法具有简便、快速、特异性强、敏感度高等特点。展开更多
目的建立快速、特异性好、灵敏度高的Real-Time PCR方法定量检测沙门菌。方法根据编码沙门菌肠毒素基因stn的核苷酸序列,设计荧光探针和一对引物,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立定量检测沙门菌的方法。结果建立的Real-...目的建立快速、特异性好、灵敏度高的Real-Time PCR方法定量检测沙门菌。方法根据编码沙门菌肠毒素基因stn的核苷酸序列,设计荧光探针和一对引物,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立定量检测沙门菌的方法。结果建立的Real-Ti me PCR方法有很好的特异性与敏感性,所检测沙门菌结果均为阳性,而非沙门菌均为阴性;标准曲线相关系数为R2=0.993,其敏感性为5CFU。运用该方法对108份鸡粪便、50份鸡肉以及58份水样进行检测,阳性率分别为3.7%(6/108)、4%(2/50)和3.4%(2/58),与传统细菌分离检测结果相符。结论结果表明该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点,此研究为环境及疾病诊断中沙门菌快速检测提供了新方法。展开更多
猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。...猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。为了应对口岸对进出境野生及实验用灵长类动物SRV感染情况的监测和流行病学调查的需要,建立了RT-PCR和real-time RT-PCR检测SRV的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了验证。展开更多
文摘目的建立快速、特异性好、灵敏度高的Real-Time PCR方法定量检测沙门菌。方法根据编码沙门菌肠毒素基因stn的核苷酸序列,设计荧光探针和一对引物,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立定量检测沙门菌的方法。结果建立的Real-Ti me PCR方法有很好的特异性与敏感性,所检测沙门菌结果均为阳性,而非沙门菌均为阴性;标准曲线相关系数为R2=0.993,其敏感性为5CFU。运用该方法对108份鸡粪便、50份鸡肉以及58份水样进行检测,阳性率分别为3.7%(6/108)、4%(2/50)和3.4%(2/58),与传统细菌分离检测结果相符。结论结果表明该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点,此研究为环境及疾病诊断中沙门菌快速检测提供了新方法。
文摘猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。为了应对口岸对进出境野生及实验用灵长类动物SRV感染情况的监测和流行病学调查的需要,建立了RT-PCR和real-time RT-PCR检测SRV的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了验证。
