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Performance analysis model for real-time Ethernet-based computer numerical control system 被引量:2
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作者 万加富 李迪 +1 位作者 涂钰青 张春华 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2011年第5期1545-1553,共9页
In order to optimize the embedded system implementation for Ethernet-based computer numerical control (CNC) system, it is very necessary to establish the performance analysis model and further adopt the codesign met... In order to optimize the embedded system implementation for Ethernet-based computer numerical control (CNC) system, it is very necessary to establish the performance analysis model and further adopt the codesign method from the control, communication and computing perspectives. On the basis of analyzing real-time Ethemet, system architecture, time characteristic parameters of control-loop ere, a performance analysis model for real-time Ethemet-based CNC system was proposed, which is able to include the timing effects caused by the implementation platform in the simulation. The key for establishing the model is accomplished by designing the error analysis module and the controller nodes. Under the restraint of CPU resource and communication bandwidth, the experiment with a case study was conducted, and the results show that if the deadline miss ratio of data packets is 0.2%, then the percentage error is 1.105%. The proposed model can be used at several stages of CNC system development. 展开更多
关键词 computer numerical control (CNC) system real-time Ethemet time characteristic parameters performance analysis model manufacturing accuracy
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High performance reconfigurable hardware system for real-time image processing
2
作者 赵广州 张天序 +2 位作者 王岳环 曹治国 左峥嵘 《Journal of Systems Engineering and Electronics》 SCIE EI CSCD 2005年第3期502-509,共8页
A novel reconfigurable hardware system which uses both muhi-DSP and FPGA to attain high performance and real-time image processing are presented. The system structure and working principle of mainly processing multi-B... A novel reconfigurable hardware system which uses both muhi-DSP and FPGA to attain high performance and real-time image processing are presented. The system structure and working principle of mainly processing multi-BSP board, extended multi-DSP board are analysed. The outstanding advantage is that the communication among different board components of this system is supported by high speed link ports & serial ports for increasing the system performance and computational power. Then the implementation of embedded real-time operating systems (RTOS) by us is discussed in detail. In this system, we adopt two kinds of parallel structures controlled by RTOS for parallel processing of algorithms. The experimental results show that exploitive period of the system is short, and maintenance convenient. Thus it is suitable for real-time image processing and can get satisfactory effect of image recognition. 展开更多
关键词 MULTI-DSP fidd programmable gate arrays real-time image processing real time operating systems parallel structure.
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Simultaneous quadratic performance stabilization for linear time-delay systems
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作者 Chen Yuepeng Zhou Zude +1 位作者 Liu Huanbin Zhang Qingling 《Journal of Systems Engineering and Electronics》 SCIE EI CSCD 2006年第4期817-823,共7页
A newly designed approach of simultaneous stabilization is given for linear discrete time-delay systems. The problem of stabilization for a collection of systems is discussed initially. Adequate condition are obtained... A newly designed approach of simultaneous stabilization is given for linear discrete time-delay systems. The problem of stabilization for a collection of systems is discussed initially. Adequate condition are obtained in terms of linear matrix inequalities (LMIs) which are independent of time delays such that the resultant collection of discrete time-delay systems are stable with an upper bound of the quadratic performance index. Subsequently, controllers are designed such that the resultant closed-loop discrete time-delay systems are simultaneously stabilized with the upper bound of the quadratic performance index. Finally,a numerical example is given to illustrate the design method. 展开更多
关键词 linear matrix inequalities (LMIs) simultaneous stabilization discrete time-delay systems quadratic performance index.
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Real-time RT-PCR检测西尼罗病毒一步法的建立 被引量:5
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作者 陈晓 曾志磊 +3 位作者 朱丹 彭丹 余建萍 谢鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1107-1110,共4页
目的建立针对西尼罗病毒E基因的一步法Real-time RT-PCR检测方法,用于西尼罗病毒感染样本的快速准确检测和定量。方法针对西尼罗病毒的保守基因E设计引物和探针,建立一步法Real-time RT-PCR反应方法并分析敏感性和特异性。结果本研究建... 目的建立针对西尼罗病毒E基因的一步法Real-time RT-PCR检测方法,用于西尼罗病毒感染样本的快速准确检测和定量。方法针对西尼罗病毒的保守基因E设计引物和探针,建立一步法Real-time RT-PCR反应方法并分析敏感性和特异性。结果本研究建立的一步法Real-time RT-PCR方法可以特异性检测出西尼罗病毒,不与日本脑炎病毒及其他病毒产生交叉反应。该方法的最低检出浓度为3.6×102copies/μl,标准曲线的线性范围为3.6×102~3.6×107copies/μl。结论本研究建立的一步法real-time RT-PCR方法敏感性和特异性较高,且不易出现污染引起的假阳性结果,适合用于西尼罗病毒感染样本的检测。 展开更多
关键词 西尼罗病毒 realtime RT—PCR 一步法 TAQMAN探针 快速检测
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荧光Real-time PCR鉴定鸡胸骨总RNA质量 被引量:3
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作者 江莎 孟凡 +2 位作者 周振雷 邓益锋 侯加法 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期92-95,共4页
为了更准确地鉴定提取鸡骨总RNA的质量,试验分别用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳和荧光Real-time PCR检测评价3种不同的方法提取成年鸡胸骨总RNA的质量。结果显示,荧光Real-time PCR可更好地鉴定提取的骨总RNA的质量。用核酸蛋白检... 为了更准确地鉴定提取鸡骨总RNA的质量,试验分别用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳和荧光Real-time PCR检测评价3种不同的方法提取成年鸡胸骨总RNA的质量。结果显示,荧光Real-time PCR可更好地鉴定提取的骨总RNA的质量。用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳能粗略检测RNA的纯度和完整性,但不能反映提取过程中是否引起基因不均一的减少,所检测的纯度也不能精确反映RNA的反转录效率。 展开更多
关键词 胸骨 荧光realtime PCR RNA
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基因重组构建AFP mRNA的real time RT-PCR标准定量模板 被引量:2
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作者 王建国 聂常富 +5 位作者 李荣 荆晓岳 王福利 曹淑娥 张宴 何蕴韶 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第2期228-229,共2页
目的 :构建AFPmRNA的realtimeRT PCR标准定量模板。方法 :提取肝瘤细胞株BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,与PMD 1 8T载体连接构建重组质粒。结果 :重组质粒的阳性克隆效率为81 .8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插... 目的 :构建AFPmRNA的realtimeRT PCR标准定量模板。方法 :提取肝瘤细胞株BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,与PMD 1 8T载体连接构建重组质粒。结果 :重组质粒的阳性克隆效率为81 .8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插入PMD 1 8T载体内。结论 :成功构建了AFPmRNA的标准定量模板 ,可应用于该基因的realtimeRT 展开更多
关键词 肝癌 基因重组 AFP MRNA real time RT-PCR
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转基因番茄植株Mi1.2表达水平的Real Time PCR检测体系的建立 被引量:3
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作者 魏振林 田志环 +1 位作者 焦传珍 董玲 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第18期7589-7590,共2页
[目的]为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[方法]利用CTAB法提取番茄叶片总RNA进行Real Time PCR扩增,分析转MI1、2基因的番茄植株表达水平的检测体系。[结果]提取RNA的A260/A280为1.78~1.88,RNA无明显降解。在严谨扩增条件... [目的]为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[方法]利用CTAB法提取番茄叶片总RNA进行Real Time PCR扩增,分析转MI1、2基因的番茄植株表达水平的检测体系。[结果]提取RNA的A260/A280为1.78~1.88,RNA无明显降解。在严谨扩增条件下,引物SYBR2的扩增效率高于SYBR1。Mg^2+的适宜浓度为2.0mg/L。Real Time PCR扩增产物具有良好的特异性,熔解曲线特异峰出现在84.5℃附近,在熔解曲线略低于83℃附近有极微弱的非特异峰。因此在定量反应中信号检测步骤应放在84℃。以4种不同模板分子数条件下扩增曲线Ct值得到的回归方程为Y=-3.78×log(copynumber)+39.50,相关系数为0.998。[结论]该试验获得的Real Time PCR体系可用于转基因植株表达水平的检测。 展开更多
关键词 real time PCR 检测体系 转基因番茄植株 熔解曲线
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Real-time PCR及预测微生物学在白酒酿造中的应用构想 被引量:7
8
作者 孙超 卢慧丽 刘勇 《中国酿造》 CAS 2012年第10期7-10,共4页
利用实时荧光定量PCR技术及预测微生物学建立可培养酿酒微生物资源数据库和预测微生物学数学模型,可探究在白酒酿造过程中可培养酿酒微生物的变化规律及不同环境因素对可培养酿酒微生物菌群变化的影响,为白酒酿造工艺优化提供重要参数。
关键词 realtime PCR 预测微生物学 白酒酿造
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利用Real-Time PCR从无症种薯上快速检测马铃薯环腐病菌 被引量:4
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作者 赵文军 朱水芳 +1 位作者 夏明星 陈红运 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第B08期261-261,共1页
关键词 realtime PCR 马铃薯环腐病菌 病菌检测
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PCR及Real-time PCR评价细菌DNA提取方法 被引量:41
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作者 胡晓红 彭惠民 +2 位作者 刘昕 黄正根 袁科 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第2期155-158,共4页
目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提... 目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度。结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100+NP40法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度。结论:Chelex-100+NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR。 展开更多
关键词 DNA提取 PCR 实时荧光定量PCR
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空肠弯曲菌hipO基因的Real-time PCR检测研究 被引量:13
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作者 祝长青 蒋原 +6 位作者 刘秀梅 邵景东 唐泰山 郭云昌 马群飞 栾军 杨毓环 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期785-787,共3页
目的建立基于新型Taqman荧光探针的荧光实时(Real-time)PCR方法用于空肠弯曲菌的筛选检测与快速鉴定。空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是近十几年来在世界范围内广泛重视的人畜共患病原菌,可以导致人类的急性肠炎与食物中毒,并... 目的建立基于新型Taqman荧光探针的荧光实时(Real-time)PCR方法用于空肠弯曲菌的筛选检测与快速鉴定。空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是近十几年来在世界范围内广泛重视的人畜共患病原菌,可以导致人类的急性肠炎与食物中毒,并能引发格林-巴利综合征等并发症。为更好地利用分子生物学技术对空肠弯曲菌进行快速、准确的基因检测,本研究从样品增菌液与单菌落中提取细菌DNA,建立了针对空肠弯曲菌特异的hipo(hippuricase,马尿酸酶)基因的Real-timePCR方法,用于空肠弯曲菌的快速筛选检测与可疑菌落快速鉴定。试验结果表明,该方法检测细菌的灵敏度为110CFU.人工布菌鸡肉的检测灵敏度为1~10CFU。本研究所建立的空肠弯曲菌荧光实时PCR方法具有准确、可靠、快速的特点。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 hipO基因 荧光实时PCR
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用DGGE和Real-Time PCR对低温沼气池中产甲烷古菌群落的研究 被引量:23
12
作者 王彦伟 徐凤花 +3 位作者 阮志勇 宋金龙 王庆 赵斌 《中国沼气》 北大核心 2012年第1期8-12,共5页
利用DGGE及Real-Time PCR技术对不同地区低温沼气池中沼泥行进发酵前期、后期产甲烷古菌群落变化进行了研究。DGGE技术用于分析发酵前后产甲烷古菌优势群落的变化;Real-Time PCR技术用于分析发酵前期、后期样品产甲烷古菌的数量变化。... 利用DGGE及Real-Time PCR技术对不同地区低温沼气池中沼泥行进发酵前期、后期产甲烷古菌群落变化进行了研究。DGGE技术用于分析发酵前后产甲烷古菌优势群落的变化;Real-Time PCR技术用于分析发酵前期、后期样品产甲烷古菌的数量变化。结果表明,沼气低温发酵的过程中,不同沼泥样品发酵前期、后期产甲烷古菌的优势群落差异明显且数量上也存在较大差异;主要变化的产甲烷古菌的优势群落为甲烷粒菌属(Methanocor-pusculum),甲烷八叠球菌属(Methanosarcina),甲烷鬃毛菌属(Methanosaeta)。甲烷八叠球菌属(Methanosarcina)在黑龙江沼泥样品(A1)发酵后期成为优势群落,甲烷鬃毛菌属(Methanosaeta)在山东发酵前期(B1),后期样品(B2)及安徽发酵前期样品(C1)中占有绝对优势。产甲烷古菌的数量介于104~105个.mL-1之间,其中黑龙江样品中产甲烷菌数量最多,而安徽样品中产甲烷菌数量最少。 展开更多
关键词 沼泥 产甲烷古菌 DGGE real-time PCR
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一种莱姆病螺旋体real-time PCR方法的建立及其在鼠标本检测中的应用评价(英文) 被引量:13
13
作者 耿震 侯学霞 +1 位作者 张琳 郝琴 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期812-816,共5页
目的基于莱姆病螺旋体recA基因,建立一种检测鼠中莱姆病螺旋体的real-time PCR方法。方法通过GenBank分析比较莱姆病螺旋体recA基因,选择其保守序列设计MGB探针及引物并进行方法学评估。并应用建立的real-time PCR方法和nested PCR方法... 目的基于莱姆病螺旋体recA基因,建立一种检测鼠中莱姆病螺旋体的real-time PCR方法。方法通过GenBank分析比较莱姆病螺旋体recA基因,选择其保守序列设计MGB探针及引物并进行方法学评估。并应用建立的real-time PCR方法和nested PCR方法对收集的123份鼠标本进行检测分析。结果本研究建立的real-time PCR方法仅对莱姆病螺旋体检测阳性,其最小检出浓度为101copies/μL。标准曲线各浓度点Ct值批内、批间平均变异系数(CV)分别为1.56%和2.30%。123份鼠标本中,real-time PCR检测59例阳性,nested PCR检测43例阳性。结论新建立的real-time PCR方法具有快速、敏感和特异的优点,可用于鼠标本中莱姆病螺旋体的检测。 展开更多
关键词 莱姆病螺旋体 real-time PCR nested PCR
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无芒稗质体ACCase基因Real-timePCR定量方法的建立 被引量:1
14
作者 郇志博 王金信 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第9期1708-1713,共6页
为研究一种抗精喹禾灵无芒稗的抗药性机理,建立了一种以β-actin为内参基因利用实时荧光定量PCR技术测定抗性无芒稗质体ACCase基因相对表达水平的方法。分析结果表明,设计的实时定量引物特异性非常好,内参基因、目的基因的扩增效率分别... 为研究一种抗精喹禾灵无芒稗的抗药性机理,建立了一种以β-actin为内参基因利用实时荧光定量PCR技术测定抗性无芒稗质体ACCase基因相对表达水平的方法。分析结果表明,设计的实时定量引物特异性非常好,内参基因、目的基因的扩增效率分别为103.2%、104.3%,线性相关系数分别为0.993 0、0.991 2,完全满足Real-time PCR定量方法的要求。所建立的无芒稗质体型ACCase基因Real-time PCR定量方法将为研究质体型ACCase基因的表达和杂草对ACCase抑制剂的抗药性机制研究提供方法学参考。 展开更多
关键词 无芒稗 质体ACCase 基因表达 realtime PCR
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运用Real-time PCR方法研究日粮添加豆油与胡麻油对肉牛瘤胃纤维分解菌数量的影响 被引量:13
15
作者 李旦 王加启 +3 位作者 卜登攀 杨舒黎 魏宏阳 周凌云 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期256-260,共5页
本研究分别以产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、白色瘤胃球菌(Ruminobacter albus)和溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)16S rDNA序列设计引物,运用Real-ti me PCR技术... 本研究分别以产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、白色瘤胃球菌(Ruminobacter albus)和溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)16S rDNA序列设计引物,运用Real-ti me PCR技术研究日粮中添加豆油与胡麻油对肉牛上述4种瘤胃纤维分解菌数量的影响。结果表明,与对照组(CK)相比,添加豆油组(LOC1)和胡麻油(LOC2)组,产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、白色瘤胃球菌(Ruminobacter albus)和溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisol-vens)数量显著减少(P<0.05),分别降低了78%和31%、30%和36%、27%和23%、6%和13%。通过该方法的结果表明日粮中添加4%的豆油和胡麻油显著减少了瘤胃中纤维分解菌,对产琥珀酸丝状杆菌的影响明显。而且采用Real-ti me PCR方法对瘤胃纤维分解菌进行定量,可以快速有效反映出在日粮改变的情况下菌的数量变化趋势,相对于传统计数方法更直观、快捷与准确。 展开更多
关键词 real-time PCR 瘤胃纤维菌 定量 肉牛
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Real-time PCR和常规PCR方法快速鉴定肉骨粉中的牛源性成份 被引量:12
16
作者 李林 陈继明 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期50-54,共5页
疯牛病是一种严重危害动物和人类健康的疾病 ,其病原朊病毒可以通过食物链进行传播 ,因此建立准确的检测牛源性成份的方法非常重要。我们采用常规PCR和Real_timePCR中的TaqMan技术建立了快速鉴定牛源性成份的方法 ,使用Chelex_10 0提取... 疯牛病是一种严重危害动物和人类健康的疾病 ,其病原朊病毒可以通过食物链进行传播 ,因此建立准确的检测牛源性成份的方法非常重要。我们采用常规PCR和Real_timePCR中的TaqMan技术建立了快速鉴定牛源性成份的方法 ,使用Chelex_10 0提取肉骨粉中的DNA ,过程简单可靠仅需要 2 0min左右。对不同含量的牛肉骨粉进行检测 ,常规PCR能够检测到的最低含量是 0 0 0 1% ,而Real_timePCR对相同的样品进行检测所得到的灵敏度更高 ,最高可达到 0 0 0 0 1% ,两种PCR方法的鉴定过程都非常简单快速 ,各需要 2h左右。 展开更多
关键词 牛海绵状脑病 肉骨粉 real—tinm PCR TAQMAN探针
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土壤镰孢菌Real-Time QPCR定量方法的建立及应用 被引量:9
17
作者 魏巍 许艳丽 +4 位作者 刘金波 李春杰 韩晓增 李文滨 李淑娴 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期655-658,662,共5页
基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR(Real-Time QPCR)反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥(NF)、化肥(NP)以及化肥配施有机肥(NPM)等3种施肥措施下大豆田... 基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR(Real-Time QPCR)反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥(NF)、化肥(NP)以及化肥配施有机肥(NPM)等3种施肥措施下大豆田土壤镰孢菌DNA含量。结果表明:引物TS和TR对镰孢菌属真菌有较好的特异性;Real-Time QPCR反应的扩增曲线中各梯度浓度标准品的循环阈值(Ct值)间隔均匀,熔点曲线无杂峰,标准曲线的相关系数R2=0.993,斜率为-0.2927;在大豆生育时期的苗期,NF、NP及NPM措施下土壤镰孢菌总DNA每克干土中含量分别为18.33、44.61和140.83 pg,且NPM措施含量极显著高于NF及NP措施(P<0.01)。 展开更多
关键词 镰孢菌 实时荧光定量PCR 绝对定量
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非洲猪瘟病毒常规PCR及Real-time PCR检测方法的建立 被引量:22
18
作者 张泉 朱鸿飞 孙怀昌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期458-461,共4页
根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P72基因的核苷酸序列,设计并合成引物以及荧光标记的TaqMan探针,以含P72基因的重组质粒作为阳性模板,用于常规PCR和Real-time PCR方法的建立,结果表明常规PCR的检测灵敏度是600个拷贝... 根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P72基因的核苷酸序列,设计并合成引物以及荧光标记的TaqMan探针,以含P72基因的重组质粒作为阳性模板,用于常规PCR和Real-time PCR方法的建立,结果表明常规PCR的检测灵敏度是600个拷贝的病毒核酸分子,Real-time PCR的检测灵敏度是20个拷贝的病毒核酸分子,两种PCR检测方法均具有特异性强、简单快速的优点。可以用于出入境检验检疫部门对非洲猪瘟病毒的快速检测。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 常规PCR real-time PCR
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猪IL-4、IL-6和IL-10 SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立及应用 被引量:11
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作者 施开创 李焕荣 +2 位作者 杨汉春 郭鑫 盖新娜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期102-107,共6页
为探讨PRRSV感染后机体的体液免疫应答、从分子水平深入研究PRRSV的免疫机制,本研究针对Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10以及看家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建... 为探讨PRRSV感染后机体的体液免疫应答、从分子水平深入研究PRRSV的免疫机制,本研究针对Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10以及看家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-4、IL-6、IL-10及β-actin的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法。该方法线性关系好,各种细胞因子及β-actin标准曲线的相关系数均达到0.997以上;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×101copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%。应用所建立的方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染仔猪外周血单个核细胞(PBMC)中IL-4、IL-6和IL-10mRNA的表达水平进行了检测。结果表明,本研究建立的real-timePCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于猪Th2型细胞因子的检测及定量分析。 展开更多
关键词 TH2型细胞因子 荧光定量PCR 检测方法
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生鲜猪肉中含扩增内标的沙门氏菌Real-time PCR检测方法的建立 被引量:7
20
作者 姚大伟 叶可萍 +2 位作者 江芸 徐幸莲 周光宏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期880-885,共6页
建立含扩增内标的生鲜猪肉中沙门氏菌Real-time PCR检测方法,以提高检测的准确性。根据沙门氏菌ttrBCA基因设计引物和探针,利用犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因构建和目标基因相同引物的扩增内标,并对退火温度和引物、探针的浓度进行优化,建... 建立含扩增内标的生鲜猪肉中沙门氏菌Real-time PCR检测方法,以提高检测的准确性。根据沙门氏菌ttrBCA基因设计引物和探针,利用犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因构建和目标基因相同引物的扩增内标,并对退火温度和引物、探针的浓度进行优化,建立含扩增内标的Real-time PCR检测方法,用该方法对人工污染生鲜猪肉样品进行检测。结果显示,该方法对19株非沙门氏菌检测结果均为阴性,对36株沙门氏菌检测结果均为阳性,特异性较好,热学裂解制备DNA模板法检测灵敏度达100 CFU/ml,试剂盒提取DNA制备模板法检测灵敏度达1μl2.66拷贝。在25μl反应体系中加入扩增内标103拷贝不影响目标基因的扩增,该方法能在12 h内对人工污染沙门氏菌的肉样做出检测。该方法不仅可快速检测生鲜猪肉中的沙门氏菌,同时避免了假阳性现象的产生。 展开更多
关键词 猪肉 沙门氏菌 实时荧光定量PCR 扩增内标
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