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Potential Genes for Regulation of Milk Protein Synthesis in Dairy Goat Mammary Gland
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作者 Chen Dan Zhang Na +2 位作者 Nan Xue-mei Li Qing-zhang Gao Xue-jun 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2016年第1期50-56,共7页
The lactating mammary gland is a prodigious protein-producing factory, but the milk protein synthesis mechanisms are not well understood. The major objective of this paper was to elucidate which genes and pathways wer... The lactating mammary gland is a prodigious protein-producing factory, but the milk protein synthesis mechanisms are not well understood. The major objective of this paper was to elucidate which genes and pathways were involved in the regulation of milk protein synthesis in the dairy goat mammary gland. Total 36 primiparous Guanzhong dairy goats were allotted in 12 groups according to their mammary development stages: days 90 and 150 of virgin, days 30, 90, and 150 of pregnancy, days 1, 10, 35, and 60 of lactation and days 3, 7, and 21 of involution (three animals per group). Mammary tissue RNA was isolated for quantitative real- time RT-PCR of four casein genes alpha-s 1 casein (CSN 1S 1 ), alpha-s2 casein (CSN 1 S2), beta-casein (CSN2) and casein kappa (CSN3), four whey protein genes lactoglobulin (LGB), laetalbumin (LALBA), laetofarrin (LTF), and Whey acidic protein (WAP) and the genes which were potentially to regulate dairy goat milk protein synthesis at the level of transcription or translation [prolactin receptor (PRLR), AKT1, signal transducers and activators of transcription 5 (STAT5), E74-Like Factor 5 (ELF5), eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1 (EIF4E-BP1), S6kinase (S6K) and caveolin 1]. The results showed that all genes were up-regulated in lactation period. The expressions of PRLR, AKT1, STAT5, ELF5, and S6K were similar to mRNA expressions of milk proteins. Our results indicated that milk protein synthesis in dairy goat mammary gland was possibly regulated by these genes. 展开更多
关键词 protein synthesis mammary gland dairy goat
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The Effects of Insulin and Prolactin on an Epithelial Cell Line from Mammary Gland of Dairy Goat
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作者 TONG Hui-li GAO Xue-jun +1 位作者 LI Qing-zhang YAN Yun-qin 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期47-50,共4页
Mammary epithelial cells with lactational function can be a valuable cellular model for research of the development and regulation of the mammary gland.This paper describes some aspects of function of an epithelial ce... Mammary epithelial cells with lactational function can be a valuable cellular model for research of the development and regulation of the mammary gland.This paper describes some aspects of function of an epithelial cell line from the mammary gland of the dairy goat.SDS-PAGE,triglyceride and lactose content of cultured cells were used to assess synthetic function of cells and the effects of exposure to insulin and prolactin.Results show that goat mammary epithelial cells can synthesize fat,proteins and lactose when they were cultured in DMEM-F12 medium with added EGF,IGF-1,ITS and FBS.There were no obvious changes after 48h treatment with additional insulin.Prolactin added to the basal medium significantly increased synthesis of proteins and lactose.A mammary gland epithelial cell line from goats which has lactational function has been established.This outcome provides a valuable and convenient model system. 展开更多
关键词 INSULIN PROLACTIN dairy goat mammary gland epithelial cell LACTATION function
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硬脂酸对奶山羊乳腺上皮细胞活力和乳脂合成的影响
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作者 李君 余倩倩 +6 位作者 李佳琳 李忠莹 韩浩园 施会彬 刘昆 张浩 权凯 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期574-581,共8页
[目的]探索不同浓度硬脂酸对奶山羊乳腺上皮细胞(GMECs)活力和乳脂合成的影响。[方法]以体外培养的GMECs为试验材料,采用不同浓度的硬脂酸(0、12.5、25、50、100、200μmol/L)处理GMECs 36 h后,通过CCK-8法检测其对细胞活力的影响,采用... [目的]探索不同浓度硬脂酸对奶山羊乳腺上皮细胞(GMECs)活力和乳脂合成的影响。[方法]以体外培养的GMECs为试验材料,采用不同浓度的硬脂酸(0、12.5、25、50、100、200μmol/L)处理GMECs 36 h后,通过CCK-8法检测其对细胞活力的影响,采用细胞甘油三酯检测试剂盒检测其对细胞甘油三酯含量的影响;选择对细胞活力无抑制作用的最大浓度硬脂酸处理GMECs,油红O染色法检测硬脂酸对细胞中脂滴聚积的影响;采用实时荧光定量PCR检测乳脂合成相关基因mRNA水平的变化。[结果]硬脂酸浓度在0~100μmol/L范围时对细胞活力无显著影响(P>0.05),而当硬脂酸浓度为200μmol/L时GMECs的活力显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,100μmol/L硬脂酸组GMECs内甘油三酯含量和脂滴聚积量显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01)。实时荧光定量PCR结果表明,与对照组相比,100μmol/L硬脂酸处理后,GMECs内白细胞分化抗原36(CD36)和二酰甘油-O-酰基转移酶同源物1(DGAT1)基因mRNA表达量极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05);心脏型脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和叉头框转录因子O1(FoxO1)基因的mRNA表达量极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),而脂肪酸合成酶(FASN)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBF1)基因的mRNA表达无显著影响(P>0.05)。[结论]100μmol/L硬脂酸能通过调控乳脂代谢相关基因的表达,促进GMECs内甘油三酯合成及脂滴分泌。本研究为外源添加长链脂肪酸调控乳脂合成代谢提供参考,对进一步提高奶山羊泌乳性能和乳品质具有重要意义。 展开更多
关键词 奶山羊 硬脂酸 乳腺上皮细胞 乳脂合成
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崂山奶山羊不同泌乳期乳腺组织可变剪接的鉴定与分析 被引量:1
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作者 楚云鹏 鞠林 +8 位作者 李培培 晁天乐 王建民 纪志宾 商营利 张彤晨 王勇 亓宝华 薛海鹏 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2024年第1期108-115,共8页
本研究对崂山奶山羊泌乳初期、高峰期和末期乳腺组织RNA-Seq数据进行可变剪接分析,共鉴定到151503个可变剪接事件,对应17627个可变剪接基因,6323个差异剪接基因,显著富集到细胞器、蛋白质结合、mRNA加工和RNA剪接等相关GO条目,主要参与... 本研究对崂山奶山羊泌乳初期、高峰期和末期乳腺组织RNA-Seq数据进行可变剪接分析,共鉴定到151503个可变剪接事件,对应17627个可变剪接基因,6323个差异剪接基因,显著富集到细胞器、蛋白质结合、mRNA加工和RNA剪接等相关GO条目,主要参与催产素信号通路、钙信号通路、内质网中的蛋白质加工等,与乳腺组织生理活性密切相关的KEGG通路,筛选出PTEN作为参与乳腺发育及泌乳相关生理过程中调控网络的核心基因。研究结果表明,可变剪接在奶山羊不同泌乳期的乳腺组织具有发育阶段特异性,特有可变剪接基因与乳腺组织生理活性特点密切相关,在调控奶山羊乳腺组织发育及泌乳生理中发挥重要作用。本研究可为探究可变剪接机制调控奶山羊乳腺发育与泌乳性状的分子机理提供理论依据。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺 可变剪接 RNA测序
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胰岛素、催乳素对奶山羊乳腺上皮细胞泌乳功能的影响 被引量:29
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作者 佟慧丽 高学军 +1 位作者 李庆章 严云勤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期721-725,共5页
具有泌乳功能的乳腺上皮细胞可作为乳腺生长发育及泌乳功能调控机制研究的细胞模型。本研究对已建立的奶山羊乳腺上皮细胞系的泌乳功能进行评价。应用SDS-PAGE、TG试剂盒及HPLC方法对体外培养奶山羊乳腺上皮细胞总蛋白、乳脂和乳糖的分... 具有泌乳功能的乳腺上皮细胞可作为乳腺生长发育及泌乳功能调控机制研究的细胞模型。本研究对已建立的奶山羊乳腺上皮细胞系的泌乳功能进行评价。应用SDS-PAGE、TG试剂盒及HPLC方法对体外培养奶山羊乳腺上皮细胞总蛋白、乳脂和乳糖的分泌情况进行了测定以确定胰岛素、催乳素处理后的奶山羊乳腺上皮细胞的泌乳功能。结果表明:在添加表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1、转铁蛋白-硒钠、标准胎牛血清的DF12培养液中奶山羊乳腺上皮细胞具有乳脂、乳蛋白及乳糖的分泌能力。胰岛素处理48 h后对细胞的泌乳功能无显著影响,催乳素处理细胞48 h后可使奶山羊乳腺上皮细胞乳蛋白、乳糖分泌能力显著升高。从而建立了具有泌乳功能的奶山羊乳腺上皮细胞系,为奶山羊、奶牛等重要经济动物泌乳机制的研究提供了便利条件。 展开更多
关键词 胰岛素 催乳素 奶山羊 乳腺上皮细胞 泌乳功能
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甘氨酸对奶山羊乳腺炎性应答的调节及其作用机制研究 被引量:11
6
作者 杜瑞平 云伏雨 +2 位作者 张兴夫 宋利文 高民 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3110-3122,共13页
本试验在体内条件下研究了甘氨酸对奶山羊乳腺炎性应答的调节及其信号通路的变化。选用15只泌乳期经产健康萨能奶山羊,分为对照组、脂多糖(LPS)模型组和3个甘氨酸干预组,每组3只,饲养管理程序一致。对照组奶山羊不注射LPS和甘氨酸,以1 m... 本试验在体内条件下研究了甘氨酸对奶山羊乳腺炎性应答的调节及其信号通路的变化。选用15只泌乳期经产健康萨能奶山羊,分为对照组、脂多糖(LPS)模型组和3个甘氨酸干预组,每组3只,饲养管理程序一致。对照组奶山羊不注射LPS和甘氨酸,以1 mL生理盐水取代;LPS模型组奶山羊于左右乳区通过乳头管分别注射1 mL LPS溶液(4μg/乳区);3个甘氨酸干预组奶山羊分别按照1、5、25 g/(只·d)的剂量,于左右乳区通过乳头管分别注射0.5 mL甘氨酸,连续注射5 d,第6天在左右乳区通过乳头管注射1 mL LPS(4μg/乳区)。各组奶山羊在注射LPS或生理盐水24 h后屠宰取乳腺组织样。制作乳腺组织切片,苏木精-伊红(HE)染色后用于观察病理变化;采用实时定量PCR法检测乳腺组织中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)、Toll样受体(TLR)2、TLR4、TLR9、髓样分化因子88(MyD88)、β-干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)基因的表达水平;采用Western blotting法检测乳腺组织中核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白的表达水平。结果显示:注射LPS 24 h后,3个甘氨酸干预组试验羊体温降至39.5℃以下。与LPS模型组相比,3个甘氨酸干预组炎性细胞侵润明显减少,乳腺细胞坏死程度明显减轻;高、中、低剂量甘氨酸干预均显著下调了IL-1β、IL-8和COX-2基因的表达水平(P<0.05),只有中剂量甘氨酸干预显著下调了IL-6、TNF-α基因的表达水平(P<0.05);高、中、低剂量甘氨酸干预均显著下调了TLR4基因的表达水平(P<0.05),只有中剂量甘氨酸干预显著下调了TLR2、TLR9基因的表达水平(P<0.05);高、中、低剂量甘氨酸干预均显著下调了MyD88基因的表达水平(P<0.05),同时低、高剂量甘氨酸干预还显著下调了TRIF基因的表达水平(P<0.05);高、中、低剂量甘氨酸干预均显著下调了核转录因子NF-κB p65蛋白的表达水平(P<0.05)。综上可知:1)甘氨酸通过下调TLR4及其下游关键信号分子MyD88和TRIF基因的表达,抑制转录因子NF-κB p65磷酸化,从而减少炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、COX-2的分泌。2)本研究初步阐明了甘氨酸通过抑制TLR-NF-κB信号通路从而抑制炎性细胞的激活或活性,阻止其炎症介质的释放,进而阻碍炎症反应过程实现。 展开更多
关键词 甘氨酸 炎性调节 乳腺 奶山羊
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奶山羊乳腺上皮细胞系的建立 被引量:19
7
作者 佟慧丽 尹德云 +1 位作者 李庆章 高学军 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第8期104-109,共6页
乳腺上皮细胞系的建立为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺表达载体的检测提供有利条件。本研究建立了正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系。利用胶原酶和透明质酸消化法从奶山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,利用细胞角蛋... 乳腺上皮细胞系的建立为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺表达载体的检测提供有利条件。本研究建立了正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系。利用胶原酶和透明质酸消化法从奶山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行了鉴定。通过细胞生长曲线、群体倍增时间、细胞接种存活率、细胞活力检测等生物学性状的检测建立并鉴定了奶山羊乳腺上皮细胞系。结果表明,奶山羊乳腺上皮细胞在添加表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1、转铁蛋白-硒钠、10%胎牛血清的DF12培养液中生长状态良好,细胞传至30代时仍保持旺盛的增殖活力。通过细胞传代及反复冻存和复苏实现了细胞系的长期保存,建立了乳腺上皮细胞系,获得了大量的乳腺上皮细胞。从而为开展奶山羊、奶牛等产奶动物乳腺生物反应器及泌乳机制的研究提供了便利条件。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺上皮细胞 细胞系
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半胱胺对奶山羊乳腺发育及血浆有关激素水平的影响 被引量:13
8
作者 王月影 王艳玲 +1 位作者 董秀钿 惠参君 《动物营养学报》 CAS CSCD 1999年第S1期144-148,共5页
选3只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和4只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验 ,且各自进行自身前后对照 ,以消除妊娠过程中乳腺自身发育的影响。空怀奶山羊在试验期添加半胱胺(CS) ,妊娠奶山羊在试验组的试验期添加CS(每5天一次 ,剂量为100... 选3只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和4只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验 ,且各自进行自身前后对照 ,以消除妊娠过程中乳腺自身发育的影响。空怀奶山羊在试验期添加半胱胺(CS) ,妊娠奶山羊在试验组的试验期添加CS(每5天一次 ,剂量为100mg/kgBW ,共3次)。结果表明 ,与对照期相比 ,试验期空怀奶山羊乳腺组织的DNA含量明显升高(P<0.05) ,RNA含量变化不明显(P>0.05) ,RNA/DNA值显著下降(P<0.05)。组织学观察发现 ,对照期乳腺的腺泡很少发育 ,几乎看不到乳导管 ;试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育。与对照期相比 ,试验期血浆生长激素(GH)水平升高39.5 %(P<0.05) ,血浆催乳素(PRL)水平提高28.7 %(P<0.05)。与对照组相比 ,试验组妊娠奶山羊乳腺DNA含量明显提高(P<0.05) ,RNA含量显著下降(P<0.05) ,RNA/DNA值明显下降。组织学观察发现 ,对照组山羊乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育 ,腺导管有明显的生长 ;而试验组山羊乳腺有大量的腺泡发育 ,腺导管生长更明显 ,且有分泌物出现。与对照组相比 ,试验组山羊血浆GH水平提高52.1 %(P<0.05) ,血浆PRL水平提高19.8%(P<0.05)。 展开更多
关键词 半胱胺 奶山羊 乳腺发育 生长激素 催乳素
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半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响 被引量:7
9
作者 王月影 王艳玲 +1 位作者 杨国宇 范光丽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期452-456,共5页
为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验。结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山... 为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验。结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现。试验期血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高。以上结果提示半胱胺在一定程度上促进了奶山羊乳腺发育。 展开更多
关键词 半胱胺 奶山羊 乳腺发育 同胎次配对试验
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阴外动脉灌注乙酸钠对奶山羊乳腺营养物质摄取和利用的影响 被引量:8
10
作者 孙满吉 卢德勋 +2 位作者 王丽芳 李然 刘彩娟 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期865-871,共7页
选用体重和产奶量相近的4只安装有阴外动脉血插管的处于泌乳中期的关中奶山羊,采用4×4拉丁方设计,分别灌注乙酸钠0、12、16和24 g/d,研究阴外动脉灌注乙酸钠对乳腺营养物质摄取和利用的影响。结果表明:基础日粮条件下向关中奶山羊... 选用体重和产奶量相近的4只安装有阴外动脉血插管的处于泌乳中期的关中奶山羊,采用4×4拉丁方设计,分别灌注乙酸钠0、12、16和24 g/d,研究阴外动脉灌注乙酸钠对乳腺营养物质摄取和利用的影响。结果表明:基础日粮条件下向关中奶山羊阴外动脉灌注乙酸钠与未灌注相比,可使乳脂率显著提高8.00%~11.71%(P<0.05),其他乳成分含量变化不显著(P>0.05)。乳腺动脉血中乙酸和挥发性脂肪酸浓度、乙酸、丁酸和挥发性脂肪酸摄取量均有极显著提高(P<0.01)。灌注乙酸钠使乳腺动静脉血中氨基酸摄取量有所降低(P>0.05),对葡萄糖和甘油三酯乳腺摄取量没有显著影响(P>0.05)。灌注16和24 g/d乙酸钠组动静脉血中必需氨基酸和非必需氨基酸的比值与灌注0和12 g/d乙酸钠组相比显著升高(P<0.05)。灌注乙酸钠使乳腺摄取的乳脂前体能转化为乳脂能的效率提高了1.02%~2.04%,氨基酸能转化为乳蛋白能的效率提高了4.07%~9.09%,葡萄糖能转化为乳糖能的效率提高了3.39%~5.08%。 展开更多
关键词 关中奶山羊 乳腺 乙酸钠 摄取 利用 动静脉浓度差
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基础日粮下关中奶山羊乳腺对营养物质摄取和利用的研究 被引量:9
11
作者 孙满吉 卢德勋 +1 位作者 王丽芳 李然 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期859-864,共6页
本试验旨在研究基础日粮条件下关中奶山羊乳腺对营养物质摄取和利用的规律。试验选用4只处于泌乳中期且安装有阴外动脉血插管的关中奶山羊测定乳腺血流量和动静脉营养物质浓度差。结果表明,在基础日粮条件下,每天平均产奶量为1.50 kg的... 本试验旨在研究基础日粮条件下关中奶山羊乳腺对营养物质摄取和利用的规律。试验选用4只处于泌乳中期且安装有阴外动脉血插管的关中奶山羊测定乳腺血流量和动静脉营养物质浓度差。结果表明,在基础日粮条件下,每天平均产奶量为1.50 kg的关中奶山羊,每天乳中产出乳蛋白50.18 g、乳脂52.54 g和乳糖69.75 g;每天乳腺摄取乙酸60.65 g、丙酸3.07 g、丁酸6.23 g、葡萄糖126.76 g和甘油三酯26.71 g。奶山羊每天乳腺摄取氨基酸总量50.76 g,乳腺氨基酸摄取率为35.74%,其中必需氨基酸(essential amino acid,EAA)摄取量38.37 g/d,乳腺摄取率45.80%,各氨基酸摄取率由大到小的顺序为:Met>Phe>Leu>Ile>Lys>Thr>Val>His>Arg;非必需氨基酸(nonessential amino acid,NEAA)摄取量12.40 g/d,乳腺摄取率21 28%,各氨基酸摄取率由大到小的顺序为:Glu>Asp>Ala>Tyr>Pro>Ser>Gly。乳腺动脉总氨基酸浓度为282.38 mg/L,静脉氨基酸浓度为181.46 mg/L,动静脉浓度差为100.92 mg/L。在基础日粮条件下,关中奶山羊EAA的乳腺摄取率显著高于NEAA(P<0.05)。乳腺摄取的氨基酸中99%用于合成乳蛋白;乳腺摄取的乳脂前体中98%用于合成乳脂;乳腺摄取的葡萄糖中59%用于合成乳糖,41%葡萄糖用于氧化供能或转化成其他营养物质。 展开更多
关键词 关中奶山羊 乳腺 摄取 利用 动静脉浓度差
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miR-200家族在西农萨能奶山羊乳腺组织中的表达分析 被引量:6
12
作者 张犁苹 罗军 +4 位作者 林先滋 朱江江 石恒波 史怀平 李君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期944-951,共8页
笔者拟获得山羊miR-200家族乳腺组织表达谱,研究miR-200家族成员之间表达相关性及miR-200家族成员与山羊乳成分的相关性。通过定量PCR,检测miR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳中期和干奶期乳腺组织中的表达量;利用Pearson相关系数分析miR-... 笔者拟获得山羊miR-200家族乳腺组织表达谱,研究miR-200家族成员之间表达相关性及miR-200家族成员与山羊乳成分的相关性。通过定量PCR,检测miR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳中期和干奶期乳腺组织中的表达量;利用Pearson相关系数分析miR-200家族不同成员表达量之间的相关性,同时分析miR-200家族成员与山羊乳成分之间的相关关系;利用miRanda和TargetScan 6.2软件分析、RNAhybrid和PITA软件预测miR-200家族的靶基因。结果表明,miR-200家族在奶山羊泌乳中期的乳腺组织中的表达量极显著高于干奶期(P<0.01);miR-200a与miR-141之间的表达量显著相关(P<0.05),miR-200b与miR-200c之间的表达量极显著相关(P<0.01);泌乳中期奶山羊乳腺组织中miR-200c的表达量与乳蛋白、非脂固形物(SNF)、冰点(FPD)的含量显著相关(P<0.05);经软件分析及预测发现,miR-200a/miR-141靶向作用于在乳脂合成中起关键作用的基因STAT4。miR-200家族可能对山羊乳蛋白及乳脂合成具有一定的调控作用。 展开更多
关键词 miR-200家族 西农萨能奶山羊 乳腺组织表达 靶基因
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不同泌乳期奶山羊乳腺OPN基因表达及其对MCF-7细胞生长的影响 被引量:5
13
作者 孙杰 罗军 +1 位作者 刘俊霞 李大全 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期825-830,共6页
为了研究骨桥蛋白基因(OPN)在奶山羊(Capra hircus)乳腺组织不同泌乳期的变化规律及其功能,采用SYBR Green染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,以β-actin基因为内参,对该基因在乳腺组织泌乳28d、60d、100d、190d、270d和3... 为了研究骨桥蛋白基因(OPN)在奶山羊(Capra hircus)乳腺组织不同泌乳期的变化规律及其功能,采用SYBR Green染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,以β-actin基因为内参,对该基因在乳腺组织泌乳28d、60d、100d、190d、270d和330d的mRNA表达水平进行检测;同时将该基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pcDNA3.1-OPN,所获重组质粒经过酶切和测序鉴定后,转染MCF-7细胞,采用MTT(四唑盐,3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromid)法检测OPN对MCF-7细胞的增殖差异,结果表明:OPN基因在泌乳初期(28d)和泌乳后期(190d)表达水平较高,干奶期最低,其表达水平总体呈现高-低-高-低的变化模式。MTT实验表明转染OPN基因的MCF-7细胞较未转染基因组细胞的生长具有显著差异(P<0.05),说明OPN的表达具有促进MCF-7细胞生长的作用。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺组织 骨桥蛋白基因 荧光定量PCR 细胞生长
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乳用动物乳腺特异性miRNAs研究进展 被引量:2
14
作者 曲波 王春梅 +3 位作者 仇有文 袁肖寒 甄贞 姜毓君 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2014年第9期26-29,共4页
乳用动物具有重要的经济价值,其乳腺的健康发育至关重要。miRNA是一种重要的转录后调控的非编码RNA,参与调控哺乳动物乳腺发育和泌乳。就近年来奶牛与奶山羊乳腺特异性miRNAs研究工作做一概述,为未来miRNAs在乳腺生物学上的深入研究提... 乳用动物具有重要的经济价值,其乳腺的健康发育至关重要。miRNA是一种重要的转录后调控的非编码RNA,参与调控哺乳动物乳腺发育和泌乳。就近年来奶牛与奶山羊乳腺特异性miRNAs研究工作做一概述,为未来miRNAs在乳腺生物学上的深入研究提供理论基础和研究思路。 展开更多
关键词 奶牛 奶山羊 MIRNA 乳腺
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半胱胺促进奶山羊乳腺发育的试验研究 被引量:3
15
作者 王月影 王艳玲 +2 位作者 杨国宇 范光丽 李和平 《家畜生态学报》 2005年第6期9-12,共4页
为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验。结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山... 为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验。结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现,血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高。 展开更多
关键词 半胱胺 奶山羊 乳腺发育
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奶山羊泌乳激素及其受体在乳腺发育过程中的变化规律及作用 被引量:2
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作者 李真 曲波 李庆章 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2010年第7期7-10,17,共5页
探讨奶山羊乳腺发育过程中泌乳激素(E2,P和PRL)及其受体(ERα,PR和PRLR)的变化规律及作用。分别在关中奶山羊乳腺发育的青春期、妊娠期、泌乳期及退化期,采集血清并用放射性免疫学方法测定各激素浓度,采集乳腺组织并用免疫荧光和real-ti... 探讨奶山羊乳腺发育过程中泌乳激素(E2,P和PRL)及其受体(ERα,PR和PRLR)的变化规律及作用。分别在关中奶山羊乳腺发育的青春期、妊娠期、泌乳期及退化期,采集血清并用放射性免疫学方法测定各激素浓度,采集乳腺组织并用免疫荧光和real-timePCR检测各激素受体表达量。青春期和妊娠早期E2,P和PRL缓慢上升,妊娠晚期E2和P达峰值,泌乳启动后PRL达高峰,泌乳高峰过后各激素均回复正常水平。ERα和PRLR青春期开始缓慢上升,泌乳启动后ERα达到高峰,而泌乳期PRLR维持在高水平,并在退化期达到表达高峰。青春期PR较妊娠期高,妊娠后期又开始升高,退化期下降。E2与ERα,E2与P及P与ERα之间正相关,其余的激素和受体之间相关性不显著。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺 激素 受体
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西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织差异基因的筛选 被引量:1
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作者 武会娟 罗军 +1 位作者 赵旺生 王伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期16-21,共6页
旨在利用抑制性削减杂交(SSH)技术筛选西农萨能奶山羊泌乳中期和后期的差异表达基因,并用实时定量PCR(Q-PCR)分析差异基因的表达丰度,探讨奶山羊不同泌乳阶段乳腺组织的基因表达规律。本研究以西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织... 旨在利用抑制性削减杂交(SSH)技术筛选西农萨能奶山羊泌乳中期和后期的差异表达基因,并用实时定量PCR(Q-PCR)分析差异基因的表达丰度,探讨奶山羊不同泌乳阶段乳腺组织的基因表达规律。本研究以西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织的mRNA互为检测子(Tester)和驱动子(Driver)构建cDNA消减文库(M-L和L-M),随机挑选克隆测序,进行序列比对分析,并检测部分差异基因在乳腺组织中的表达丰度。结果,成功构建了泌乳中期和后期的cDNA文库,随机挑选30个克隆测序,得到M-L和L-M文库中与细胞凋亡、抗氧化、脂类代谢、能量代谢等生理过程相关的差异基因,对其中的6个基因进行实时定量分析,发现5个均为阳性克隆,表达水平增加了1.3~5.5倍不等。结果表明,利用SSH技术成功构建了泌乳中期和后期乳腺组织正反向消减cDNA文库,筛选出24个差异基因,为进一步研究奶山羊乳腺组织基因调控机理奠定了基础。 展开更多
关键词 西农萨能羊 乳腺组织 抑制性削减杂交 差异表达基因 实时定量PCR
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灌注葡萄糖对奶山羊乳腺营养摄取的影响 被引量:1
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作者 李然 孙满吉 +1 位作者 刘彩娟 单安山 《中国饲料》 北大核心 2010年第1期17-21,共5页
本试验研究了阴外动脉灌注葡萄糖对乳腺营养物质吸收和乳成分的影响。选用体重和产奶量相近的4只泌乳中期关中奶山羊,做阴外动脉和腹部皮下静脉手术安装血插管,采用4×4拉丁方设计,每天分别灌注葡萄糖0、12、24g和36g。结果表明:乳... 本试验研究了阴外动脉灌注葡萄糖对乳腺营养物质吸收和乳成分的影响。选用体重和产奶量相近的4只泌乳中期关中奶山羊,做阴外动脉和腹部皮下静脉手术安装血插管,采用4×4拉丁方设计,每天分别灌注葡萄糖0、12、24g和36g。结果表明:乳脂率随葡萄糖灌注量的增加而显著降低(P<0.01)。灌注36g/d处理组乳脂产量显著低于其他处理组(P<0.01);葡萄糖灌注提高了奶山羊的产奶量,24g/d处理组的产奶量显著高于对照组(P<0.01);36g/d处理组乳腺对葡萄糖的摄取量和乳糖的产量都显著高于对照组(P<0.01)。甘油三酯和非脂固形物的含量各组间差异不显著(P>0.05),但葡萄糖灌注提高了乳蛋白产量,其中24g/d处理组乳蛋白产量最高,并显著高于对照组(P<0.05)。葡萄糖的灌注显著降低了奶山羊干物质的采食量(P<0.01)。葡萄糖的灌注对乳腺氨基酸的摄取影响不显著。葡萄糖的灌注使氨基酸合成乳蛋白的产出率提高1%~9%,葡萄糖合成乳糖的产出率提高0%~5%,有效改善了乳成分。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺 葡萄糖 摄取
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奶山羊青春期乳腺发育重要基因RelA的全长克隆
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作者 王立娜 苑春艳 +2 位作者 李春 李庆章 高学军 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第2期31-33,52,共4页
从本实验室已建立的关中奶山羊7个时期乳腺Long-SAGE标签库中筛选出在青春期高表达的RelA基因,用RACE方法克隆并获得关中奶山羊RelA基因的全长,将全长序列与NCBI GenBank中人(H.sapiens)和牛(Bos taurus)数据库进行同源性比对,证实用所... 从本实验室已建立的关中奶山羊7个时期乳腺Long-SAGE标签库中筛选出在青春期高表达的RelA基因,用RACE方法克隆并获得关中奶山羊RelA基因的全长,将全长序列与NCBI GenBank中人(H.sapiens)和牛(Bos taurus)数据库进行同源性比对,证实用所选EST标签引物克隆出的基因全长是奶山羊RelA基因。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺 RACE RELA
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西农萨能羊两个泌乳阶段差异表达基因SAA3的克隆和序列分析
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作者 武会娟 罗军 +6 位作者 张丽娟 韩雪峰 杨宝进 王海滨 单翠燕 张宁 余刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期110-114,共5页
为了研究不同泌乳期乳腺组织中差异表达基因,利用抑制性削减杂交技术构建西农萨能羊泌乳60 d乳腺组织及泌乳28 d乳腺组织中差异表达基因文库,用Real-Time PCR技术验证阳性克隆血清淀粉样蛋白A 3(SAA3)基因,通过RT-PCR方法克隆西农萨能... 为了研究不同泌乳期乳腺组织中差异表达基因,利用抑制性削减杂交技术构建西农萨能羊泌乳60 d乳腺组织及泌乳28 d乳腺组织中差异表达基因文库,用Real-Time PCR技术验证阳性克隆血清淀粉样蛋白A 3(SAA3)基因,通过RT-PCR方法克隆西农萨能羊乳腺组织SAA3,并进行序列比对和功能预测。结果成功构建了西农萨能羊不同泌乳期乳腺组织中差异表达基因文库,筛选克隆了乳腺组织SAA3基因,GenBank登录号为:DQ839400,编码区长度为396 bp,含有131个氨基酸。西农萨能羊乳腺组织中SAA3与牛(GenBank:NM_181016)、兔(GenBank:M64696.1)、人(GenBank:BC020795)、鼠(GenBank:NM_011315)核苷酸同源性分别为95%、84.3%、81.3%和81.9%,氨基酸同源性为93%、76%、72%、72%;在编码区261-287位较人、兔、鼠SAA编码区多27个碱基,连续大于5个氨基酸的保守区域有6个,较人SAA多3个潜在功能基序。 展开更多
关键词 西农萨能羊 乳腺组织 血清淀粉样蛋白A3 抑制性削减杂交
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