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血清Ⅱ型鸡马立克氏病毒的分离鉴定及SW14分离株pp24基因的序列分析 被引量:3
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作者 林雨萌 胡明雪 +10 位作者 刘长军 葛成菲 郭榕容 李凯 崔红玉 高立 祁小乐 王素艳 王笑梅 高玉龙 张艳萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期864-868,共5页
为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得2... 为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得21株能够形成典型MDV蚀斑的分离株,依次命名SW1~SW21,采用PCR分别扩增MDV血清Ⅰ型(MDV-1) Meq基因、Ⅱ型(MDV-2) ORF873基因、Ⅲ型(MDV-3) US3基因进行MDV分型鉴定,扩增鸡传染性贫血病毒(CAV) VP3基因、禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) LTR基因、禽白血病病毒A亚群(ALV-A)、B亚群(ALV-B)、J亚群(ALV-J)的env基因进行外源病毒检测,结果显示MDV-1均为阴性,MDV-2均为阳性,MDV-3阳性率为38.1%(8/21),未检测到外源病毒基因。在MDV-2分离株中选择SW14株进行pp24基因的PCR扩增,测序后与MDV-2参考株SB-1、301B/1、HPRS24的pp24基因进行基因序列比对分析,结果显示,SW14和SB-1株同源性(96.3%)最高。通过透射电镜观察SW14,可见分离株呈双环型,直径约110 nm,符合MDV病毒粒子形态特征。本研究证实该鸡场中存在MDV-2流行,可能会影响疫苗的免疫效果,但其致病性有待进一步研究。本研究从疑似发病蛋鸡中分离到新的MDV-2株,为我国MDV-2的研究提供重要参考依据,同时为我国MD疫情防控提供有价值的研究材料。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病毒 分离鉴定 血清Ⅱ型 血清Ⅲ型 pp24基因序列分析
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马立克氏病病毒pp38基因启动子和增强子的克隆和序列分析 被引量:3
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作者 丁家波 赵文明 +3 位作者 姜世金 张纪元 王增福 崔治中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期93-96,共4页
参考GeneBank发表的马立克氏病病毒(MDV)国际标准强毒株GA的基因序列,设计合成一对引物,分别以RB1B,814,GD2(广东分离株),J 1 E(北京分离株),Md11,Md5,CVI988等不同毒株的MDV基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得了预期大小的PCR产物。该... 参考GeneBank发表的马立克氏病病毒(MDV)国际标准强毒株GA的基因序列,设计合成一对引物,分别以RB1B,814,GD2(广东分离株),J 1 E(北京分离株),Md11,Md5,CVI988等不同毒株的MDV基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得了预期大小的PCR产物。该产物经pGEM T easy克隆后测序,将所得序列进行比较分析。结果发现:不同毒株间pp38基因的启动子和增强子序列间有缺失突变,序列的同源性大于95 9%,其中大多数的突变发生在MDV复制的原点附近。 展开更多
关键词 马立克氏病 病毒 pp38基因 启动子 增强子 基因克隆 序列分析
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DNA修复基因RAD_(24)的分子克隆和序列分析 被引量:2
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作者 朱应葆 Praka.,L 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第5期541-550,共10页
利用缺口修复(gaprepair)方法克隆啤酒酵母(S.cerevisiae)野生型RAD_(24)基因,并将其亚克隆到M13mp18和M13mp19,用双脱氧末端终止法对该基因的两条链均进行了序列测定。DNAStr... 利用缺口修复(gaprepair)方法克隆啤酒酵母(S.cerevisiae)野生型RAD_(24)基因,并将其亚克隆到M13mp18和M13mp19,用双脱氧末端终止法对该基因的两条链均进行了序列测定。DNAStrider程序分析显示该基因编码268个氨基酸的蛋白质;基因缺失试验表明,该基因为细胞生存所必需。 展开更多
关键词 DNA修复 基因 RAD24 分子克隆 序列分析
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