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PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆Mx蛋白基因的转录
被引量:
1
1
作者
王印庚
毛明光
+4 位作者
刘宗柱
张家松
陈贵平
廖梅杰
曲江波
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2009年第6期1-6,共6页
以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白Mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-Mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上...
以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白Mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-Mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上3种途径都能高效诱导Mx蛋白mRNA的转录,均在48h之后达到高峰,其中以浸泡的方式更容易诱导Mx基因转录,且在120h时仍保持较高水平。Mx基因转录的时相变化证明了国产PolyI∶C可以通过多种途径诱导抗病毒蛋白Mx的表达,为实际应用中确定用药途径提供了理论依据。另外,实验初步建立了半定量RT-PCR方法,为检测鱼体内干扰素的表达提供了技术方法。
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关键词
polyi
∶
c
大菱鲆
MX蛋白
干扰素诱导剂
基因转录
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职称材料
聚肌胞免疫刺激下仔猪外周血单核细胞的基因表达分析
被引量:
3
2
作者
王彦平
王怀中
+3 位作者
郭建凤
王海飞
刘剑锋
王继英
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期63-69,共7页
聚肌胞(Poly I:C)是一种天然双链RNA(Double strand RNA,dsRNA)的拟似物,能够模拟病毒感染后所形成的dsRNA及刺激机体产生抗病毒免疫反应。文章以抗病力存在差异的大蒲莲和长白仔猪为研究对象,分离外周血单核细胞(Peripheral blood mono...
聚肌胞(Poly I:C)是一种天然双链RNA(Double strand RNA,dsRNA)的拟似物,能够模拟病毒感染后所形成的dsRNA及刺激机体产生抗病毒免疫反应。文章以抗病力存在差异的大蒲莲和长白仔猪为研究对象,分离外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),在20μg/m L的Poly I:C的免疫刺激下体外培养24 h,对影响免疫应答过程中的7个细胞因子(IRF3、IL6、IL8、IL10、TNFα、IFNγ和IFNα)和3个模式识别受体(TLR3、TLR4和RIG1)利用实时荧光定量PCR检测Poly I:C免疫刺激组相对于对照组的基因表达变化倍数。结果表明:检测的大部分细胞因子和受体(6个)表达量变化倍数很大,其中3种白细胞介素IL6、IL8和IL10免疫刺激变化倍数最大,平均变化倍数分别为20.71、10.87和5.18倍。对不同个体和品种间的比较发现,不仅大蒲莲和长白两品种间(大蒲莲猪的变化倍数平均高于长白猪)而且同品种的3头全同胞仔猪间对Poly I:C免疫刺激的应答也存在较大的变化。文章利用Poly I:C体外模拟dsRNA对PBMC的感染,为下一步筛选仔猪对Poly I:C刺激的免疫应答基因及鉴定大蒲莲猪特殊的抗性基因奠定了基础。
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关键词
聚肌胞
外周血单核细胞
细胞因子
模式识别受体
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职称材料
聚肌胞诱导鸡胚成纤维细胞和鸡胚及肉鸡抵抗新城疫病毒感染的研究
被引量:
2
3
作者
吕英军
倪嘉宁
鲍恩东
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期97-101,共5页
为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验。结果显示:125和250μg.mL-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍TC ID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;...
为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验。结果显示:125和250μg.mL-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍TC ID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;5 mg.mL-1的聚肌胞溶液(每个胚0.1 mL)能明显抑制NDV在SPF鸡胚中的繁殖,减轻NDV对鸡胚生长的抑制作用,降低病毒血凝效价和鸡胚死亡数。聚肌胞对肉鸡抵抗NDV感染试验结果显示,肌肉注射0.01 mg.kg-1的聚肌胞注射液能明显提高治愈率和显效率。但反映细胞活性状态的中性红染色(D570值)随着聚肌胞浓度的增大而变小的结果说明,聚肌胞对鸡胚成纤维细胞的增殖有一定程度的抑制。
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关键词
多聚核苷酸(聚肌胞)
新城疫病毒
抗病毒
鸡胚成纤维细胞
鸡胚
肉鸡
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职称材料
尼罗罗非鱼干扰素诱导蛋白44基因克隆及表达分析
被引量:
2
4
作者
翁婷婷
夏立群
黄瑜
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期3548-3557,共10页
【目的】探索干扰素诱导蛋白44基因(ifi44)在尼罗罗非鱼各组织的分布特征及其响应无乳链球菌感染和聚肌胞苷酸[Poly(I∶C)]刺激过程中的表达模式,为进一步揭示ifi44基因在鱼类免疫应答中的作用机制打下基础。【方法】克隆On-ifi44基因...
【目的】探索干扰素诱导蛋白44基因(ifi44)在尼罗罗非鱼各组织的分布特征及其响应无乳链球菌感染和聚肌胞苷酸[Poly(I∶C)]刺激过程中的表达模式,为进一步揭示ifi44基因在鱼类免疫应答中的作用机制打下基础。【方法】克隆On-ifi44基因开放阅读框(ORF),通过ExPASy、TMHMM-2.0、Euk-mPLoc 2.0、SOPMA和SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析,根据单细胞转录组测序结果分析On-ifi44基因在细胞层面的分布情况,并采用实时荧光定量PCR检测On-ifi44基因在尼罗罗非鱼各组织中的表达分布特征及在无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后的时序表达情况。【结果】On-ifi44基因ORF序列全长1437 bp,编码478个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为52.7 kD,理论等电点(pI)为4.97。On-ifi44含有1个TLDc_dom结构域(1~157 aa)和1个GTP-bd结构域(197~322 aa),不含跨膜结构域。On-ifi44氨基酸序列与奥利亚罗非鱼ifi44氨基酸序列的相似性为97.94%;基于ifi44氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示On-ifi44氨基酸序列与奥利亚罗罗非鱼ifi44氨基酸序列聚为一支,二者具有较近的亲缘关系。On-ifi44基因在尼罗罗非鱼的肠道、肝脏、鳃、皮肤、脾脏、体肾、胸腺、脑、头肾、肌肉、心脏等11个组织中均有表达,且主要在T细胞亚群表达;经无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后,On-ifi44基因在尼罗罗非鱼脾脏、肾脏、头肾和肠道组织中的相对表达量均发生变化,且存在明显的时间依赖性。【结论】On-ifi44含有1个TLDc_dom结构域和1个GTP-bd结构域,进化保守且在不同物种间具有相似的生物学功能;On-ifi44基因在无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后呈时间依赖性上调表达,表明ifi44基因作为重要的调节因子,参与了尼罗罗非鱼抗细菌感染、抗病毒增殖的免疫应答过程。
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关键词
尼罗罗非鱼
ifi44基因
组织表达特征
免疫应答
无乳链球菌
聚肌胞苷酸[
poly
(I∶
c
)]
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职称材料
题名
PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆Mx蛋白基因的转录
被引量:
1
1
作者
王印庚
毛明光
刘宗柱
张家松
陈贵平
廖梅杰
曲江波
机构
中国水产科学研究院黄海水产研究所
厦门大学海洋与环境学院
青岛农业大学生命科学学院
烟台开发区天源水产有限公司
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2009年第6期1-6,共6页
基金
国家863计划(2003AA622070)
国家十一五科技支撑计划(2006BAD09A11)
行业专项(nyhyzx07-046)共同资助
文摘
以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白Mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-Mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上3种途径都能高效诱导Mx蛋白mRNA的转录,均在48h之后达到高峰,其中以浸泡的方式更容易诱导Mx基因转录,且在120h时仍保持较高水平。Mx基因转录的时相变化证明了国产PolyI∶C可以通过多种途径诱导抗病毒蛋白Mx的表达,为实际应用中确定用药途径提供了理论依据。另外,实验初步建立了半定量RT-PCR方法,为检测鱼体内干扰素的表达提供了技术方法。
关键词
polyi
∶
c
大菱鲆
MX蛋白
干扰素诱导剂
基因转录
Keywords
polyinosinic
-
polycytidylic
acid
(poly
I :
c)
S
c
ophthalmus maximus Mx protein Interferon indu
c
er Gene trans
c
ription
分类号
S942.5 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
聚肌胞免疫刺激下仔猪外周血单核细胞的基因表达分析
被引量:
3
2
作者
王彦平
王怀中
郭建凤
王海飞
刘剑锋
王继英
机构
山东省农业科学院畜牧兽医研究所
中国农业大学动物科技学院
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期63-69,共7页
基金
国家自然科学基金项目(编号:31201779)
山东省农业良种工程项目(编号:2011LZ13-01
+2 种基金
02)
山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(编号:BS2013SW026)
山东省农业产业技术体系生猪创新团队建设项目(编号:SDAIT-06-011-03)资助
文摘
聚肌胞(Poly I:C)是一种天然双链RNA(Double strand RNA,dsRNA)的拟似物,能够模拟病毒感染后所形成的dsRNA及刺激机体产生抗病毒免疫反应。文章以抗病力存在差异的大蒲莲和长白仔猪为研究对象,分离外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),在20μg/m L的Poly I:C的免疫刺激下体外培养24 h,对影响免疫应答过程中的7个细胞因子(IRF3、IL6、IL8、IL10、TNFα、IFNγ和IFNα)和3个模式识别受体(TLR3、TLR4和RIG1)利用实时荧光定量PCR检测Poly I:C免疫刺激组相对于对照组的基因表达变化倍数。结果表明:检测的大部分细胞因子和受体(6个)表达量变化倍数很大,其中3种白细胞介素IL6、IL8和IL10免疫刺激变化倍数最大,平均变化倍数分别为20.71、10.87和5.18倍。对不同个体和品种间的比较发现,不仅大蒲莲和长白两品种间(大蒲莲猪的变化倍数平均高于长白猪)而且同品种的3头全同胞仔猪间对Poly I:C免疫刺激的应答也存在较大的变化。文章利用Poly I:C体外模拟dsRNA对PBMC的感染,为下一步筛选仔猪对Poly I:C刺激的免疫应答基因及鉴定大蒲莲猪特殊的抗性基因奠定了基础。
关键词
聚肌胞
外周血单核细胞
细胞因子
模式识别受体
Keywords
polyinosinic
-
polycytidylic
acid
(poly
I:
c)
peripheral blood mononu
c
lear
c
ell (PBM
c)
c
ytokine
pattern re
c
ognition re
c
eptors
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
聚肌胞诱导鸡胚成纤维细胞和鸡胚及肉鸡抵抗新城疫病毒感染的研究
被引量:
2
3
作者
吕英军
倪嘉宁
鲍恩东
机构
南京农业大学动物医学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期97-101,共5页
基金
江苏省科技攻关(三药)项目(BE2005605)
文摘
为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验。结果显示:125和250μg.mL-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍TC ID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;5 mg.mL-1的聚肌胞溶液(每个胚0.1 mL)能明显抑制NDV在SPF鸡胚中的繁殖,减轻NDV对鸡胚生长的抑制作用,降低病毒血凝效价和鸡胚死亡数。聚肌胞对肉鸡抵抗NDV感染试验结果显示,肌肉注射0.01 mg.kg-1的聚肌胞注射液能明显提高治愈率和显效率。但反映细胞活性状态的中性红染色(D570值)随着聚肌胞浓度的增大而变小的结果说明,聚肌胞对鸡胚成纤维细胞的增殖有一定程度的抑制。
关键词
多聚核苷酸(聚肌胞)
新城疫病毒
抗病毒
鸡胚成纤维细胞
鸡胚
肉鸡
Keywords
polyinosinic: polycytidylic acid (poly i: c)
NDV
antiviral effe
c
t
c
EF
c
hi
c
k embryo
broiler
分类号
S859.7 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
尼罗罗非鱼干扰素诱导蛋白44基因克隆及表达分析
被引量:
2
4
作者
翁婷婷
夏立群
黄瑜
机构
广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室
广东海洋大学深圳研究院/广东省水生动物健康评估工程技术研究中心
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期3548-3557,共10页
基金
国家自然科学基金项目(32002426)
广东省自然科学基金项目(2022A1515010553)。
文摘
【目的】探索干扰素诱导蛋白44基因(ifi44)在尼罗罗非鱼各组织的分布特征及其响应无乳链球菌感染和聚肌胞苷酸[Poly(I∶C)]刺激过程中的表达模式,为进一步揭示ifi44基因在鱼类免疫应答中的作用机制打下基础。【方法】克隆On-ifi44基因开放阅读框(ORF),通过ExPASy、TMHMM-2.0、Euk-mPLoc 2.0、SOPMA和SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析,根据单细胞转录组测序结果分析On-ifi44基因在细胞层面的分布情况,并采用实时荧光定量PCR检测On-ifi44基因在尼罗罗非鱼各组织中的表达分布特征及在无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后的时序表达情况。【结果】On-ifi44基因ORF序列全长1437 bp,编码478个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为52.7 kD,理论等电点(pI)为4.97。On-ifi44含有1个TLDc_dom结构域(1~157 aa)和1个GTP-bd结构域(197~322 aa),不含跨膜结构域。On-ifi44氨基酸序列与奥利亚罗非鱼ifi44氨基酸序列的相似性为97.94%;基于ifi44氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示On-ifi44氨基酸序列与奥利亚罗罗非鱼ifi44氨基酸序列聚为一支,二者具有较近的亲缘关系。On-ifi44基因在尼罗罗非鱼的肠道、肝脏、鳃、皮肤、脾脏、体肾、胸腺、脑、头肾、肌肉、心脏等11个组织中均有表达,且主要在T细胞亚群表达;经无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后,On-ifi44基因在尼罗罗非鱼脾脏、肾脏、头肾和肠道组织中的相对表达量均发生变化,且存在明显的时间依赖性。【结论】On-ifi44含有1个TLDc_dom结构域和1个GTP-bd结构域,进化保守且在不同物种间具有相似的生物学功能;On-ifi44基因在无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后呈时间依赖性上调表达,表明ifi44基因作为重要的调节因子,参与了尼罗罗非鱼抗细菌感染、抗病毒增殖的免疫应答过程。
关键词
尼罗罗非鱼
ifi44基因
组织表达特征
免疫应答
无乳链球菌
聚肌胞苷酸[
poly
(I∶
c
)]
Keywords
Nile tilapia(Oreo
c
hromis niloti
c
us)
ifi44 gene
tissue expression
immune response
Strepto
c
o
c
c
us agala
c
tiae
polyinosinic
-
polycytidylic
acid
[
poly
(I∶
c
)]
分类号
S965.125 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
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出处
发文年
被引量
操作
1
PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆Mx蛋白基因的转录
王印庚
毛明光
刘宗柱
张家松
陈贵平
廖梅杰
曲江波
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2009
1
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职称材料
2
聚肌胞免疫刺激下仔猪外周血单核细胞的基因表达分析
王彦平
王怀中
郭建凤
王海飞
刘剑锋
王继英
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
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职称材料
3
聚肌胞诱导鸡胚成纤维细胞和鸡胚及肉鸡抵抗新城疫病毒感染的研究
吕英军
倪嘉宁
鲍恩东
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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职称材料
4
尼罗罗非鱼干扰素诱导蛋白44基因克隆及表达分析
翁婷婷
夏立群
黄瑜
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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